戊二醛添加順序對膠原蛋白腸衣膜品質的影響

徐菲菲，許 健，劉 飛*，陳茂深，夏熠珣，鐘 芳

（1.江南大學未來食品科學中心，江蘇 無錫 214122；2.江南大學江蘇省食品安全與質量控制協同創新中心，江蘇 無錫 214122；3.嘉興未來食品研究院，浙江 嘉興 314015）

膠原蛋白腸衣是一種蛋白質類可食用膜，為提升其適用性，很多研究采用化學或物理交聯的方式來改善膠原蛋白腸衣的性能。通過交聯處理后，蛋白質分子內或蛋白質分子間可以通過交聯鍵形成更致密的空間網絡結構，從而改善腸衣的機械特性及阻隔特性[1-2]。交聯劑種類繁多，選擇合適的交聯劑及其使用量至關重要。Wang 等通過紫外照射、熱交聯對膠原蛋白腸衣進行交聯處理，使膜的力學性能與熱穩定性得到了改善[3]。Bigi 等通過加入京尼平對蛋白質膜進行交聯[1]。Casanova 等用京尼平交聯酪蛋白膠束[4]。朱雪珂等借助京尼平，實現了多肽在絲素蛋白表面的接枝[5]。但京尼平價格十分昂貴，通常應用在醫學領域中。國內外研究中，醛類、離子類和酶是最常用的交聯劑。在膠原蛋白腸衣生產工業中，醛類是使用最廣泛的交聯劑，效果也最優異。

在歐洲、美國、中國等地戊二醛被允許使用在膠原蛋白腸衣工業中。戊二醛以抗酸能力強、交聯效率高、反應迅速、價格低廉等特點，成為膠原蛋白腸衣工業中使用最廣泛的交聯劑[6-8]。

作者采用戊二醛對膠原蛋白腸衣膜進行交聯。分別探討制膠時、成膠后以及成膜后3 種戊二醛的添加方式對膠原蛋白腸衣膜品質的影響，以期獲得戊二醛的最佳添加方式，提高牛皮的利用率和利用價值，提高食品行業包裝材料的質量，減少白色污染，創造更大的社會價值和經濟效益。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

牛二層皮：內蒙古秋實生物有限公司提供；甘油、硫酸銨、鹽酸、戊二醛、檸檬酸、檸檬酸鈉：國藥集團化學試劑有限公司產品。

1.2 儀器與設備

均質機：德國GEA 公司產品；真空反應器：上海弗魯克設備有限公司產品；物性分析儀：英國SMS 公司產品；傅里葉紅外光譜儀：美國Thermo Fisher 公司產品；高精度分光測色儀：美國Hunterlab公司產品；差式掃描量熱儀：德國Netzsch 公司產品。

1.3 實驗方法

1.3.1 牛二層皮洗滌將牛二層皮用去離子水多次清洗，去除灰分，至水洗液電導率降至4 500 μm/s以下。加入質量分數3%（以牛皮干質量計）的硫酸銨繼續清洗，去除鈣離子。加入質量分數1%檸檬酸鈉（以牛皮干質量計），緩慢滴入質量分數1%檸檬酸（以牛皮干質量計），將水洗液pH 調至4.6，繼續清洗。最后用去離子水清洗，使水洗液電導率降至500 μm/s 以下，至此，洗滌工作完畢。

1.3.2 膠原團的制備將牛二層皮裁成塊狀，與碎冰一起放入高速粉碎機，粉碎制得皮漿。再將皮漿與鹽酸溶液 （質量分數0.96%） 按照體積比1∶1 混合，攪拌至均勻。在4 ℃下，進行酸化膨脹20 h，間隙攪動后，使用均質機（27.5 MPa）均質1 次，再在真空反應器中進行攪拌脫氣，制得膠原團。操作參數為：攪拌速度200 r/min，真空度0.8 MPa。

1.3.3 膠原蛋白腸衣膜的制備將膠原團壓制成片，在質量分數3% NaOH 溶液中浸泡，中和鹽酸后，再用去離子水清洗至中性，最后在25 ℃下干燥24 h，置于干燥箱（相對濕度53%，25 ℃）回濕72 h，制得膠原蛋白腸衣膜。

1.3.4 交聯劑的添加順序實驗

1）制膠時加入 將戊二醛與鹽酸溶液一同與皮漿混合?？刂颇z原團內戊二醛質量濃度為0、50、100、200、400 mg/L。

2）成膠后加入 當鹽酸溶液與皮漿混合后再采用與膠原團滾揉的方法加入戊二醛?？刂颇z原團內戊二醛質量濃度為0、50、100、200、400 mg/L。

3）成膜后加入 當鹽酸溶液與皮漿混合成為膠原團后，將制備好的膠原團壓板成膜。將干燥后的腸衣膜浸入質量濃度為0、50、100、200、400 mg/L的500 mL 戊二醛溶液中15 min 后，于干燥箱（相對濕度53%，25 ℃）內平衡72 h。

1.3.5 干態下膠原蛋白腸衣膜抗拉強度和斷裂延伸率測定將腸衣膜裁成1 cm×5 cm，用物性分析儀測定其抗拉強度、斷裂延伸率[9-10]，重復3 次取平均值。計算公式如下：

式中：T為抗拉強度，MPa；F為斷裂力，g；S為橫截面積，mm2；B為斷裂延伸率，%；d1為斷裂伸長長度，mm；d0為原長度，以夾具之間的間隙距離計，為30 mm；膜厚度作為測試參數輸入。

1.3.6 濕態下膠原蛋白腸衣膜抗拉強度和斷裂延伸率的測定將裁好的腸衣膜于25 ℃水中浸泡1 min 取出，用濾紙吸干水分，其他方法同1.3.5。

1.3.7 煮態下膠原蛋白腸衣膜抗拉強度和煮斷裂延伸率的測定將裁好的腸衣膜于沸水中煮1 min取出，用濾紙吸干水分，其他方法同1.3.5。

1.3.8 膠原蛋白腸衣膜熱收縮率測定將腸衣膜裁成1 cm×5 cm，于沸水中浸泡1 min 后取出測定長度變化，重復3 次取平均值。計算公式如下：

式中：H為熱收縮率，%；d0為原長度，5 cm；d2為煮后腸衣膜長度，cm。

1.3.9 膠原蛋白腸衣膜溶脹率的測定取一定量腸衣膜，置25 ℃水中浸泡24 h 取出，用濾紙吸干水分后稱量，測定腸衣膜的吸水溶脹率[11-12]，重復3 次取平均值。計算公式如下：

式中：E為吸水溶脹率，%；m1為腸衣膜質量，g；m2為吸干水分后腸衣膜質量，g。

1.3.10 膠原蛋白腸衣膜的色澤及透光率的測定將腸衣膜裁成5 cm× 5 cm，用測色儀測定其色澤，結果用L*、a*、b*值表示[11，13]。將腸衣膜裁成2 cm×5 cm，用紫外分光光度計測定其透光率，計算公式如下[11，14]：

式中：T為透光率，%；T530為樣品在530 nm 條件下的透光率，%；L為膜的厚度，μm。

1.3.11 膠原蛋白腸衣膜的紅外光譜將腸衣膜裁成2 cm×2 cm，置于干燥箱 （相對濕度0，25 ℃）72 h，再用傅里葉紅外光譜儀在衰減全反射模式下進行分析，記錄從4 000～400 cm-1的紅外譜圖[11，15]。

1.3.12 膠原蛋白腸衣膜的變性溫度測定將膠原蛋白腸衣膜剪成2 cm× 2 cm，置于干燥箱（相對濕度53%，25 ℃）72 h，用差式掃描量熱儀（differential scanning calorimetry，DSC）進行測定。測試條件為：溫度掃描范圍25～180 ℃，升溫速率5 ℃/min[11，16]。

1.4 數據處理

對實驗數據進行統計學分析，實驗結果用平均值±標準差的形式表示。采用SPSS 23.0 分析，用t檢驗進行兩樣本比較，用ANOVA 進行單因素方差分析，用Duncan 多重比較法（P＜0.05）進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 在制膠時加入交聯劑

2.1.1 干、濕、煮態下膠原蛋白腸衣膜的抗拉強度變化如圖1（a）所示，干態下，隨著戊二醛質量濃度的升高，腸衣膜的抗拉強度有所升高，但不顯著（P＞0.05）；當戊二醛質量濃度達到100 mg/L 時，腸衣膜的抗拉強度不再增加。如圖1（b）所示，濕態下，當戊二醛質量濃度達到100 mg/L 時，腸衣膜的抗拉強度還在繼續增加，但不顯著（P＞0.05）。如圖1（c）所示，隨著戊二醛質量濃度的增加，煮態下腸衣膜的抗拉強度繼續增加，當達到400 mg/L 時，腸衣膜的抗拉強度顯著增強到約1 MPa（P＜0.05）。

圖1 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的抗拉強度（制膠時加入交聯劑）Fig.1 Tensile strength of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added during the process of paste making)

2.1.2 干、濕、煮態下膠原蛋白腸衣膜的斷裂延伸率變化如圖2所示，加入交聯劑提高膠原蛋白腸衣膜抗拉強度的同時，不會降低其斷裂延伸率，這說明膠原蛋白的交聯反應不會對腸衣膜的斷裂延伸率起負面作用。當戊二醛質量濃度為200 mg/L時，干態下腸衣膜的斷裂延伸率有所增加，而濕態下腸衣膜的斷裂延伸率隨戊二醛質量濃度增加并未發生太大變化，但在煮態下腸衣膜的斷裂延伸率隨戊二醛質量濃度增加略有增加。由此可知，在制膠時加入戊二醛，對膠原蛋白腸衣膜的斷裂延伸率沒有顯著影響。

圖2 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的斷裂延伸率（制膠時加入交聯劑）Fig.2 Elongation of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added during the process of paste making)

2.1.3 膠原蛋白腸衣膜的溶脹率、熱收縮率戊二醛的加入使膠原纖維網絡結構變得更加致密，導致可以容納水分子的空間不斷減少，腸衣膜的溶脹率與戊二醛的質量濃度呈負相關（見圖3（a）），尤其當戊二醛質量濃度為200 mg/L 和400 mg/L 時，腸衣膜的溶脹率顯著降低（P＜0.05）。如圖3（b）所示，隨著戊二醛質量濃度增加，腸衣膜的熱收縮率也呈下降趨勢，即其抗熱縮能力增強。戊二醛質量濃度為400 mg/L 的膠原團所制腸衣膜的熱收縮率約為33%，相較于對照組下降了約10%。由此說明，加入戊二醛后，膠原蛋白腸衣膜的溶脹率與熱收縮率都得到明顯改善。

圖3 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜溶脹率、熱收縮率的變化（制膠時加入交聯劑）Fig.3 Swelling rate and heat shrinkage rate of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added during the process of paste making)

2.1.4 膠原蛋白腸衣膜的色澤用高精度分光測色儀測定膜的色澤[17]，結果用L*、a*、b*值表示。根據葉勇的結果[18]，在膠原蛋腸衣膜中加入戊二醛，會使腸衣膜的顏色發生變化，即b*值增加（變黃）。如表1所示，隨著戊二醛質量濃度提高，腸衣膜的b*值明顯增加，當戊二醛質量濃度為400 mg/L 時，腸衣膜的b* 值為13.39，發生了十分明顯地變黃。腸衣膜變色的原因主要是戊二醛中醛基和膠原中的氨基發生了交聯反應[19]。由于新雙鍵的生成，與肽鏈上的肽鍵等其他雙鍵體系形成超共軛系統，從而顯示出一定的顏色。

表1 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的色澤 （制膠時加入交聯劑）Table 1 Color of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added during the process of paste making)

2.1.5 膠原蛋白腸衣膜的FTIR 光譜FTIR 可用來分析加入交聯劑后膠原蛋白腸衣膜內官能團及鍵的變化[20-21]。交聯可以使—OH 發生明顯地伸縮振動，向更高的波長發生位移，即藍移[19]。如圖4所示，對照組—OH 峰的位置在3 280.55 cm-1，當戊二醛質量濃度為50、100、200、400 mg/L 時，—OH 峰的位置分別在3 286.41、3 281.40、3 281.73、3 281.89 cm-1，發生了一定的藍移。而加入戊二醛后，膠原蛋白腸衣膜的酰胺I、II、III、IV 和V 帶都沒有發生明顯位移，說明膠原蛋白腸衣膜本身的結構并未遭到破壞，加入適量的戊二醛并不會對腸衣膜的化學鍵產生明顯影響。

圖4 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的紅外光譜 （制膠時加入交聯劑）Fig.4 FTIR spectrum of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations(crosslinking agent added during the process of paste making)

2.1.6 膠原蛋白腸衣膜的變性溫度如圖5所示，用DSC 對制備的腸衣膜進行熱分析[22]。加入戊二醛后，膠原蛋白腸衣膜的熱穩定性有了較大改善。不加入戊二醛的腸衣膜，變性溫度為75.9 ℃。當戊二醛質量濃度為50、100、200、400 mg/L 時，腸衣膜的變性溫度分別為81.4、79.4、76.6、75.6 ℃。根據結果可知，當戊二醛質量濃度為50、100 mg/L 時，腸衣膜的熱穩定性顯著增強。而當戊二醛質量濃度為400 mg/L 時，膠原蛋白腸衣膜的熱穩定性反而有所下降，這說明戊二醛不宜添加過多。

圖5 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的變性溫度 （制膠時加入交聯劑）Fig.5 Denaturation temperature of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added during the process of paste making)

2.2 成膠后加入交聯劑

2.2.1 干、濕、煮態下膠原蛋白腸衣膜的抗拉強度變化通過滾揉的方法加入戊二醛并測定腸衣膜的抗拉強度。如圖6所示，當戊二醛質量濃度為100 mg/L 時，干態下膠原蛋白腸衣膜的抗拉強度不再繼續增加；而戊二醛交聯對濕態下膠原蛋白腸衣膜的抗拉強度稍有提升，但沒有顯著差異（P＞0.05）；煮態下，對照組的抗拉強度僅為0.2 MPa，但當戊二醛質量濃度達到400 mg/L 時，膠原蛋白腸衣膜的抗拉強度增加到1.2 MPa。

圖6 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的抗拉強度（成膠后加入交聯劑）Fig.6 Tensile strength of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added after the process of paste making)

2.2.2 干、濕、煮態下膠原蛋白腸衣膜斷裂延伸率的變化如圖7所示，干態下膠原蛋白腸衣膜的斷裂延伸率呈波動趨勢，當戊二醛質量濃度為100 mg/L時腸衣膜的斷裂延伸率最大，為10%，高于戊二醛質量濃度為400 mg/L 的樣品。這可能是因為滾揉法并不能使戊二醛溶液與膠原團充分接觸，從而導致了這樣的波動趨勢。濕態下腸衣膜的斷裂延伸率變化不大，這說明戊二醛交聯對濕態下腸衣膜的斷裂延伸率沒有顯著影響。但當戊二醛質量濃度為100 mg/L 和400 mg/L 時，煮態下腸衣膜的斷裂延伸率顯著增大（P＜0.05）。

圖7 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的斷裂延伸率（成膠后加入交聯劑）Fig.7 Elongation of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added after the process of paste making)

2.2.3 膠原蛋白腸衣膜的溶脹率、熱收縮率的變化與未加入戊二醛的對照組相比，加入戊二醛后腸衣膜的溶脹率有所升高（見圖8），這與預期的結果不符，說明加入了戊二醛后腸衣膜的內部結構并未變致密。從側面說明了在成膠后加入戊二醛并不是一種較為有效的方法。腸衣膜的熱收縮率略有下降，說明在成膠后加入戊二醛，對改善腸衣膜的熱收縮率有一定幫助。

圖8 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜溶脹率、熱收縮率的變化（成膠后加入交聯劑）Fig.8 Swelling rate and heat shrinkage rate of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added after the process of paste making)

2.2.4 膠原蛋白腸衣膜的色澤加入戊二醛后，膠原蛋白腸衣膜會因其超共軛系統而導致b* 值增加，即變黃，這也是工業生產中膠原蛋白腸衣膜變黃的主要原因。但4 種質量濃度的戊二醛溶液都未明顯改變腸衣膜的b* 值（見表2），這也證明了在成膠后用混揉法加入戊二醛并非一種有效的交聯方法。原因是膠原團本身就是結合較緊密的多孔網絡結構，因此在成膠后加入戊二醛無法使其均勻滲透在腸衣膜內。

表2 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的色澤 （成膠后加入交聯劑）Table 2 Color of casing films crosslinked by gluta -raldehyde with different concentrations (crosslinking agent added after the process of paste making)

2.2.5 膠原蛋白腸衣膜的FTIR 光譜成膠后添加不同質量濃度戊二醛的腸衣膜—OH 峰的位置分別為3 279.56、3 283.68、3 280.34、3 282.69 cm-1，而對照組腸衣膜—OH 峰的位置為3 282.69 cm-1，并未發生明顯的藍移（見圖9）。這與文獻中報道的情況不符，也從側面說明了交聯反應的不充分。由此說明，相對于在制膠時加入戊二醛，在成膠后加入戊二醛不能充分交聯腸衣膜。

圖9 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的紅外光譜 （成膠后加入交聯劑）Fig.9 FTIR spectrum of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations(crosslinking agent added after the process of paste making)

2.2.6 膠原蛋白腸衣膜的變性溫度成膠后加入戊二醛，腸衣膜的熱穩定性并沒有明顯改善，對照組膠原蛋白腸衣膜的變性溫度為77.6 ℃，當戊二醛質量濃度為50、100、200、400 mg/L 時，腸衣膜的變性溫度分別為79.9、77.1、78.0、77.2 ℃（見圖10）。當戊二醛質量濃度為50 mg/L 時，腸衣膜的熱穩定性最好。相較于在制膠時加入戊二醛，成膠后加入戊二醛對腸衣膜的熱穩定性沒有明顯改善，這也反映了在成膠后用滾揉的方法加入戊二醛存在難度，不是一種好的交聯方法。

圖10 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的變性溫度（成膠后加入交聯劑）Fig.10 Denaturation temperature of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added after the process of paste making)

2.3 成膜后加入交聯劑

2.3.1 干、濕、煮態下膠原蛋白腸衣膜的抗拉強度變化將制備好的膠原蛋白腸衣膜浸泡在戊二醛溶液中交聯并測定腸衣膜的抗拉強度。結果見圖11，雖然戊二醛質量濃度為100 mg/L 時，干態下膠原蛋白腸衣膜的抗拉強度不再增加。但不同于前兩種方法的結果，隨著戊二醛質量濃度增加，濕、煮態下，腸衣膜的抗拉強度持續顯著增加（P＜0.05），這說明成膜后浸泡法是一種極高效的交聯方法。特別地，濕態下對照組抗拉強度僅為2.4 MPa，當戊二醛質量濃度為400 mg/L 時，腸衣膜的抗拉強度提升到10 MPa，提升了約300%，說明成膜后浸泡法可在保持膠原蛋白腸衣膜緊密程度的基礎上，顯著提升交聯強度。

圖11 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的抗拉強度（成膜后加入交聯劑）Fig.11 Tensile strength of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added after paste film formation)

2.3.2 干、濕、煮態下膠原蛋白腸衣膜斷裂延伸率的變化如圖12所示，干態下腸衣膜斷裂延伸率的增加較為顯著，但當戊二醛質量濃度為100 mg/L時，腸衣膜的斷裂延伸率不再增加。隨著戊二醛質量濃度增加，濕態下腸衣膜的斷裂延伸率有所下降，但無顯著差異。此外，雖然煮態下腸衣膜的斷裂延伸率在戊二醛加入后有所增加，但并無規律，當戊二醛質量濃度為50 mg/L 時，腸衣膜的斷裂延伸率最大。

圖12 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的斷裂延伸率（成膜后加入交聯劑）Fig.12 Elongation of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added after paste film formation)

2.3.3 膠原蛋白腸衣膜的溶脹率、熱收縮率如圖13所示，膠原蛋白腸衣膜經過浸泡法處理后其溶脹率、熱收縮率都明顯降低，原因是交聯反應使腸衣膜內部可以容納水分子的空間減少，同時膠原纖維結合更加緊密，使膠原蛋白腸衣膜的抗熱縮能力增強。

圖13 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜溶脹率、熱收縮率的變化（成膜后加入交聯劑）Fig.13 Swelling rate and heat shrinkage rate of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added after paste film formation)

2.3.4 膠原蛋白腸衣膜的色澤在成膜后，將膠原蛋白腸衣膜浸入戊二醛中的方法交聯效率極高。如表3所示，在浸入不同質量濃度的戊二醛溶液后，腸衣膜的b*值明顯增加。當戊二醛質量濃度為400 mg/L 時，腸衣膜的b*值達到17.99，高過其他兩種方法，說明其交聯效果明顯優于其他兩種。

表3 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的色澤 （成膜后加入交聯劑）Table 3 Color of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations(crosslinking agent added after paste film formation)

2.3.5 膠原蛋白腸衣膜的FTIR 光譜加入戊二醛后，腸衣膜的—OH 峰發生了較為明顯的藍移（見圖14）。當戊二醛質量濃度為50、100、200、400 mg/L時，腸衣膜的—OH 峰的位置分別為3 282.69、3 284.08、3 285.04、3 290.78 cm-1。其中，當戊二醛質量濃度為400 mg/L 時腸衣膜的—OH 峰藍移最明顯，相對于對照組腸衣膜的—OH 峰的位置 （3 280.90 cm-1）藍移了約10 cm-1，這也從側面說明相對于制膠時、成膠后2 種方法，在成膜后將腸衣膜浸入戊二醛溶液中的方法交聯效率最高。

圖14 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的紅外光譜（成膜后加入交聯劑）Fig.14 FTIR spectrum of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concen -trations (crosslinking agent added after paste film formation)

2.3.6 膠原蛋白腸衣膜的變性溫度對照組腸衣膜的變性溫度為77.6 ℃，浸入了50、100、200、400 mg/L戊二醛溶液的腸衣膜變性溫度分別為75.7、80.5、79.4、80.4 ℃（見圖15）。當戊二醛質量濃度為50 mg/L時，腸衣膜的熱穩定性有所下降，但不明顯。當戊二醛質量濃度為100、200、400 mg/L 時，膠原蛋白腸衣膜的熱穩定性有了一定改善。在成膜后浸入戊二醛溶液的交聯方法對膜熱穩定性的改善要優于在成膠后加入戊二醛的方法，但不如在制膠時加入戊二醛的方法。這可能與成膠時加入戊二醛的不均勻交聯有關。

圖15 不同質量濃度戊二醛交聯腸衣膜的變性溫度（成膜后加入交聯劑）Fig.15 Denaturation temperature of casing films crosslinked by glutaraldehyde with different mass concentrations (crosslinking agent added after paste film formation)

3 結 語

確定了戊二醛的最佳加入方式：在成膜后浸入戊二醛溶液，交聯效率最高，濕、煮態下腸衣膜抗拉強度明顯增大，溶脹率、熱收縮率下降，熱穩定性提高。其次是在制膠時與酸液一同加入，這種交聯方式可以縮短制備膠原蛋白腸衣的周期，同時節約生產車間的空間，進一步降低制備膠原蛋白腸衣膜的成本，具有很好的應用前景。