2例犬脾臟淋巴組織結節性增生組織病理學診斷

陳舒懷，吳曉星，吳 波，孟 雪，康 樺*

（ 1.浙江省食品藥品檢驗研究院藥品安全評價研究中心，浙江 杭州 310052 ； 2.浙江大學醫學院附屬第二醫院 臨床研究中心，浙江 杭州 310009 ）

犬的脾臟腫大病理性變化主要為血腫、血管瘤、血管肉瘤和脾臟淋巴組織結節性增生（FHN）[1]。FHN臨床表現為腹部出血、腹脹、嗜睡和厭食[2]。臨床中直接診斷FHN較困難，通常肉眼可見脾臟呈結節性腫大，診斷時應優先考慮腫瘤和血腫兩種情況，再區分良性疾?。ㄑ[、結節性增生或良性纖維組織細胞結節、血管瘤）和惡性腫瘤（血管肉瘤、惡性纖維組織細胞結節、其他肉瘤）。有研究表明，小型犬（體重小于15 kg）中，雪納瑞犬、達克斯犬和比格犬更易出現惡性腫瘤；大型犬中，金毛獵犬、德國牧羊犬、拉布拉多獵犬、拳擊手和標準貴賓犬易出現惡性腫瘤[1]。

FHN的組織病理學變化較復雜，只有對適當取樣的標本進行仔細的組織病理學檢查后才能夠做出準確診斷[3]。FHN是由淋巴組織和纖維組織、細胞組織共同增生而成的結節，增生中的梭形細胞和組織細胞有時會取代結節中的濾泡結構，最終形成真正的纖維組織細胞腫瘤[4]。FHN分為Ⅰ級FHN（淋巴結增生）、Ⅱ級FHN（增生性淋巴結，含有相似數量的纖維組織細胞和淋巴組織或良性纖維組織細胞瘤）和Ⅲ級FHN（惡性纖維組織細胞瘤或伴有少量淋巴細胞的多形性肉瘤）[5]，根據其增生的細胞類型、形態學等類型可進行更細致的分類。為闡明細胞和基質增生的性質，對FHN進行準確分級還需要進行IHC染色加以鑒別。本文對2例犬脾臟淋巴組織結節性增生病例采用H.E.和IHC染色，進行較為系統的鑒別診斷，以期為臨床、實驗室診斷提供更為全面的參考。

1 病例資料

1.1 病例1

老年田園犬，雄性，年齡不詳，因食欲差就診，超聲發現脾臟腫大，臨床肉眼觀察可見脾臟結節性腫大。脾臟切除后，取腫大處脾臟約3 cm×2 cm×2 cm，腫塊表面呈葡萄狀結節，部分結節與正常脾臟顏色接近，部分結節呈灰白色，老年田園犬腫瘤外觀見圖1。

圖1 老年田園犬腫瘤外觀Fig.1 Appearance of tumor in elderly pastoral dogs

1.2 病例2

拳師犬，10歲，雌性，超聲檢查發現脾臟巨大。臨床肉眼觀察可見脾臟頭部腫大，邊緣頓圓，脾尾處巨大纖維樣腫物，拳師犬脾臟腫物見圖2。

圖2 拳師犬脾臟腫物外觀Fig.2 Appearance of spleen tumor in boxer dogs

取脾尾處腫塊約3 cm×1.5 cm×1.5 cm，切面呈乳白色，質地較硬，拳師犬腫瘤切面見圖3。

圖3 拳師犬腫瘤切面Fig.3 Tumor appearance in Boxer canine

2 檢查結果

腫瘤使用10%中性福爾馬林固定，經常規脫水、透明后包埋，切片后進行H.E.和IHC染色。使用Leica Aperio GT450數位載玻片掃描儀掃描切片，觀察數字切片。

2.1 老年田園犬組織病理學檢查結果（見圖4~圖7）

圖4 淋巴組織結節性增生Fig.4 Nodular hyperplasia of lymphoid tissue

圖5 淋巴組織結節性增生導致血腫Fig.5 Nodular hyperplasia of lymphoid tissue causing hematoma

圖6 CD3 IHC染色Fig.6 CD3 IHC staining

圖7 CD19 IHC染色Fig.7 CD19 IHC staining

由圖4可知，老年田園犬脾臟形成淋巴小結樣的結構，中心部淡染，有外套層結構。

由圖5可知，紅髓結構中含有大量的紅細胞、含鐵血黃素沉著；髓竇擴張、被膜下血腫，可見形成高內皮微靜脈，淋巴組織結節性增生導致血腫。

由圖6、圖7可知，IHC染色CD3為部分陽性，CD19為部分陽性。綜上所述，SMA為陰性，診斷為Ⅰ級FHN。

2.2 拳師犬脾臟組織病理學檢查結果（見圖8~圖11）

圖8 Ⅱ級FHN脾臟形態Fig.8 Spleen morphology of grade Ⅱ FHN

圖9 腫瘤細胞多樣Fig.9 Composed variety type of tumor cell

圖10 CD3 IHC染色Fig.10 CD IHC staining

圖11 Vimentin IHC染色Fig.11 Vimentin IHC staining

由圖8可知，拳師犬脾可見臟紅髓、白髓結構消失，未形成淋巴小結樣的結構，可見多個壞死區，壞死區可見血管。

由圖9可知，大量細胞核深染的淋巴細胞樣腫瘤細胞、細胞核淡染的纖維樣腫瘤細胞增生，可見核分裂象。

由圖10、圖11可知，IHC染色CD3部分為陽性，Vimentin部分為陽性。綜上，診斷為Ⅱ級FHN。

3 討論

脾臟的組織學結構在不同物種間存在差異。犬脾臟的包膜和小梁含有更多的平滑肌，能夠進行擴張以儲存大量的紅細胞[6]。在診斷犬脾臟病理變化時，應注意與人、大鼠、小鼠脾臟的區別。

2021年的一項回顧性研究發現，脾臟淋巴增生是犬脾切除術中最常見的疾?。?5/44，34%）；血管肉瘤是犬脾切除術中最常見的惡性腫瘤（5/44，11%）；而淋巴瘤在犬脾切除術的發病率較低（1/44，2.3%）[7]。通過對165例被診斷為犬FHN的病例進行研究發現，該病平均發病年齡為10.1歲（老年犬）[8]。犬脾臟結節性腫大通常為腫瘤性，原發性脾臟結節性腫大可由多種組織產生，血管、纖維、平滑肌和淋巴組織[4]。本研究中，2例FHN的臨床表現為脾臟結節樣腫大，切面均可見灰白色區域，表面極可能是纖維組織增生，與組織病理學檢查結果一致。

據統計，犬最常見的脾臟腫大為淋巴和纖維組織細胞聯合增生結節[4,9]，其中結節性淋巴增生是犬中最常見的良性病變，也有報道于人、牛、羊中的情況[7,9]。結節性淋巴增生有多種分類方法，Bettini等[4]根據結節中的細胞類型，將其分為淋巴型、漿細胞型、混合型等；Valli等[10-11]根據B淋巴細胞的特點，將其分為邊緣區淋巴瘤（MZL）和套細胞淋巴瘤（MCL）；Moore等[12]根據腫瘤細胞的特征將其分為淋巴結增生（LNH）和復雜結節增生（CNH）。也有研究提出，參考原有分類特征，應將該疾病分類為淋巴增生、復合增生、間質肉瘤和組織細胞肉瘤[13]，并且不同的結節分類與犬的年齡、品種、性別和存活時間有關，8~10歲的犬多診斷為組織細胞肉瘤或間質肉瘤[8]。

綜上所述，本研究中病例均為IHC染色CD3（T細胞）陽性，老年田園犬病例的分類為淋巴增生，良性；拳師犬病例的分類為復合增生，具有向腫瘤性疾病發展的趨勢，應結合更多臨床信息進行綜合診斷。老年田園犬H.E.染色切片可見被膜下血腫。犬脾臟中常與血腫有關的病理性組織改變即鐵質結節（siderotic nodules）和淋巴增生（lymphoid hyperplasia）[14]。病例中的血腫可能是由淋巴細胞組成的“白髓”體積增大和數量增加，又因淋巴組織的變化導致了血液流動改變，出現了血腫[15]。

無論處于何種時期，手術切除均是犬脾臟結節性腫大的最佳治療方案[16]。對于FHN的診斷，通過中低倍鏡觀察H.E.染色切片的形態學結構最重要，但對于判斷FHN處于哪種病變時期，則需要對免疫表型進行檢測，可采用IHC染色或通過PCR技術進行抗原受體基因重排（PARR）[17-19]。但目前國內尚無較為準確的免疫組化染色的標準。本文采用H.E.和IHC染色方法診斷兩例處于不同時期的FHN，以期為制定規范的犬FHN免疫學診斷方法提供參考。

4 結論

與人脾臟功能相比，犬脾臟參與更少的免疫系統的調節過程，更多是具有儲血的功能。因此，臨床中對犬采用脾臟切除的治療方法具有非常好的療效。本文采用H.E.染色和IHC染色方法鑒別診斷兩例分級不同的FHN病例，對臨床診斷犬脾臟FHN具有一定參考價值。