紫荊花總黃酮的提取及在牙膏中的應用

李江平 黃曉燕 王小敏 許 遜

(柳州兩面針股份有限公司技術中心,廣西 柳州 545001)

據統計，我國人群口腔患病率達 80% 以上，并已威脅到各個年齡段的人群，口腔護理迫在眉睫。常見的口腔問題包括齲病、牙周炎等。有關研究顯示，口腔菌屬的分類也較細，以厭氧菌為多。其中，齲病的主要致病菌為變形鏈球菌，是造成齲齒的主要原因；牙周炎的主要致病菌為牙齦卟啉單胞菌，其可能作為內源性致病菌在特定條件下過度生長而導致牙周破壞，同時也是口臭主要致病厭氧菌，甚至是成人失牙的主要原因。選擇合適的口腔抑菌護理產品,可以有效地控制口腔有害細菌增長，使我們在日常生活中輕松地預防口腔疾病的發生。

近年來，以作用溫和且具有一定功效的中草藥提取物作功效添加劑應用于日用品中已經成為新產品開發熱點?，F代藥理學表明：黃酮類化合物具有抗菌消炎、抗氧化美白等多種功效 。

紫荊花，系豆科紫荊屬植物，全國大部分地區均有分布，其中華南地區分布最廣。據《中藥大辭典》記載，紫荊花具有清熱涼血、去風解毒的等功效。研究發現，紫荊花中含有大量的總黃酮，總黃酮是指黃酮類化合物，是以α-苯基苯并吡喃酮為主體的一系列物質的總稱，主要類型有黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、雙黃酮和異黃酮。

1 實驗部分

1.1 黃酮類有機物的提取

1.1.1 紫荊花總黃酮提取物

采用乙醇回流提取技術，稱取紫荊花花粉 100g，搗碎研磨后，加入75%食用乙醇2000mL, 70℃回流2h,過濾，濾渣中再加1000 mL 75%乙醇70℃回流2h，合并濾液，抽濾。濾液減壓濃縮得浸膏，真空干燥。

表1 紫荊花的提取率

1.1.2 紫荊花黃酮類化合物含量的測定

1.1.2.1 黃酮類化合物標準曲線繪制

精確稱取干燥至恒重的蘆丁對照品5.0mg于25mL容量瓶中，用70%乙醇溶解、定容。分別稱取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL標準品溶液于25mL容量瓶中，加入5%亞硝酸鈉溶液1mL，混勻，放置6min，加入10%硝酸鋁溶液1mL，搖勻，放置6min，加入10%氫氧化鈉溶液10mL，加水至刻度，搖勻，放置156min。用分光光度法，在510nm波長測定吸光度。

表2 蘆丁標準液含量與吸光度的關系

1.1.2.2 紫荊花黃銅含量測定

精確稱取紫荊花浸膏粉末用70%乙醇溶解并定容至25mL。吸取取樣品液3.00mL，置于25mL容量瓶中，加入5%亞硝酸鈉溶液1mL，混勻，放置6min，加入10%硝酸鋁溶液1mL，搖勻，放置6min，加入10%氫氧化鈉溶液10mL，加水至刻度，搖勻，放置156min。用分光光度法，在510nm波長測定吸光度。

表3 紫荊花提取物總黃酮含量和紫荊花總黃酮得率

1.2 紫荊花總黃酮提取物抑菌試驗

采用最小抑菌濃度(MIC)試驗方法，用無菌蒸餾水將紫荊花總黃酮提取物按成倍稀釋成不同的質量濃度下對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、牙齦卟啉單胞菌和變形鏈球菌的抑制情況如表4，從而確定紫荊花提取物的最小抑菌濃度(MIC)。

表4 不同濃度紫荊花提取物對大腸桿菌、 金黃色葡萄球菌、牙齦卟啉單胞菌、變形鏈球菌的MIC值

由表4可知，紫荊花總黃酮提取物對供試菌大腸桿菌的抑菌MIC值為0.391%，紫荊花總黃酮提取物對供試菌金黃色葡萄球菌的抑菌MIC值為0.391%，紫荊花總黃酮提取物對供試菌牙齦卟啉單胞菌的抑菌MIC值為0.782%，紫荊花總黃酮提取物對供試菌變形鏈球菌的抑菌MIC值為0.782%。

1.3 青紫荊花總黃酮提取物牙膏的配伍研究

采用二氧化硅牙膏基質配方表5，將紫荊花總黃酮提取物添加到牙膏配方基質進行配伍性研究與測試，保證含紫荊花總黃酮提取物牙膏的穩定性。

表5 青蒿提取物牙膏配方

牙膏穩定性測試：測試依據為GB/T 8372。取樣3支牙膏，放3支到-8℃冰箱中 8 小時，取出牙膏后放入 45℃恒溫培養箱8小時，再取出試樣牙膏放在常溫處，穩定性無異常。

1.4 紫荊花總黃酮提取物牙膏的抑菌效果

按照《消毒技術規范(2002 版)》2.1.11.3.2溶出性抗(抑)菌產品抑菌性能測試方法中規定的檢測方法。樣品作用濃度1∶1，作用時間5min，試驗菌種為金黃色葡萄球菌 (ATCC 6538)和大腸桿菌 (ATCC 25922)、牙齦卟啉單胞菌(ATCC 33277)、變形鏈球菌(ATCC 25175)標準菌種，試驗重復3次；抑菌率≥50%時，產品為有效抑菌，抑菌率≥90%時，產品有較強抑菌作用。

表6 青蒿提取物牙膏抑菌效果的檢測結果

1.5 紫荊花總黃酮提取物牙膏的止血效果

紫荊花總黃酮提取物牙膏止血作用藥理實驗，采用兔肝臟局部創面損傷出血模型，在出血創面局部敷涂樣品后，觀察記錄止血時間，計算止血效果分值F。

表7 受試樣品對兔肝臟局部創面 損傷出血的止血效果

口腔中的炎癥主要有牙齦炎、牙周炎等，其表現為牙齒腫脹、出血、疼痛等癥狀。止血藥理試驗結果顯示：含紫荊花總黃酮提取物牙膏對樣品能兔肝臟局部創面損傷出血有明顯止血作用。

3 結論

現代藥理學表明，黃酮類化合物具有抗菌消炎、抗氧化美白等多種功效。本研究對紫荊花總黃酮提取物的最小抑菌濃度(MIC)值進行測試，其對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、牙齦卟啉單胞菌和變形鏈球菌的具有較強抑制作用；對紫荊花總黃酮提取物與牙膏基質復配后有效含量值的牙膏抑菌效果進行檢測，紫荊花總黃酮提取物牙膏對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、牙齦卟啉單胞菌、變形鏈球菌均具有一定的抑菌性能；對紫荊花總黃酮提取物牙膏進行動物止血藥理試驗，具有較好的止血效果。中草藥因“純天然”的特點受到現代人的認同，以其為原料生產的日化產品、保健品等均受到廣大消費者的熱捧。開發中藥抑菌成分，并在發揮抑制口腔有害菌的同時，減少耐藥性的產生，能降低化學劑用量及刺激性，達到保障口腔清潔衛生健康、維護口腔微生態平衡的目的，符合并滿足消費者需求。將中草藥抑菌成分應用于產品中，該技術的市場應用前景廣闊，必將受到廣大消費者青睞。