反復呼吸道感染患兒細胞因子及T 淋巴細胞亞群水平的變化及臨床意義

何其瑞，金玉林，丁興華，徐陽

（河南省信陽市中心醫院輸血科，河南 信陽 464000）

小兒反復呼吸道感染（RRI）指在單位年限內，呼吸道感染發生頻次超出正常次數（7 次以上或下呼吸道感染3 次以上）的呼吸道疾病[1]?？諝馕廴?、環境變化、嬰幼兒期喂養不當以及患兒體質等因素，均可誘發該疾病。在兒科呼吸道疾病中，RRI 的發病率高達50%，病程遷延難愈，影響后患兒生長發育[2]。小兒由于呼吸系統發育尚未完善，其鼻腔相對成年人短且狹窄，故而更易發生微生物感染；除此之外，小兒免疫細胞功能與氣道體液免疫功能相對薄弱，如T 淋巴細胞含量少且功能差，氣道分泌物中含可抗病原菌的物質（如干擾素、補體等）少，使得小兒成為RRI 的主要發病人群[3-4]。為探究反復呼吸道感染患兒細胞因子及T 淋巴細胞亞群水平的變化及臨床意義，本次研究選擇2020年4 月至2021 年4 月期間我院收治的反復呼吸道感染患兒40 例及正常健康兒童40 例作為研究對象，詳細報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020 年4 月至2021 年4 月期間我院收治的反復呼吸道感染患兒40 例及正常健康兒童40 例作為研究對象，分別作為反復呼吸道感染組（n=40）、對照組（n=40）。對照組男性23例，女性17 例；年齡1～13 歲，平均（5.84±1.46）歲。反復呼吸道感染組男性22 例，女性18 例；年齡1～12歲，平均（5.94±1.53）歲。兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），有可比性。

1.2 納入標準與排除標準 納入標準：（1）符合《諸福棠實用兒科學(第7 版)》[5]中關于RRI 的診斷標準；（2）年齡≤14 歲；（3）發病頻率為0～2 歲，1 年呼吸道感染≥7 次或支氣管炎＞3 次，2 歲以上至5歲，1 年呼吸感染≥6 次或支氣管炎＞2 次，5 歲以上至14 歲，1 年上呼吸道感染≥5 次或支氣管炎＞2 次。

排除標準：（1）原發性系統缺陷、先天性呼吸系統畸形因素造成的呼吸道感染；（2）合并嚴重貧血、糖尿病、結核或明顯臟器功能障礙；（3）入組前7 d 曾使用免疫制劑、益生菌或維生素等可能對研究結果產生影響患兒。

1.3 方法

1.3.1 治療方法 入組患兒均采用維生素D 滴劑[國藥控股星鯊制藥（廈門）有限公司，國藥準字H35021450]治療，800 U/次，1 次/d。在此基礎上，給予對照組患兒布拉氏酵母菌散（法國百科達制藥廠，批準文號S20100086）口服治療，0.25 g/次，2次/d，連續治療20 d、停藥10 d 為一療程，共治療2個療程。

1.3.2 檢測方法 取患兒靜脈血5 mL，經3 000 r/min分離血清后將其置于-4℃冰箱保存待檢。采用武漢默沙克生物科技有限公司生產的相關試劑盒，以免疫比濁法測定患兒免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）；采用酶聯免疫吸附法測定血清25 羥基纖維素D3 [25（OH）D3]，采用BD FACSCanto 做干擾素γ（IFN-γ），白細胞介素-4（IL-4）水平和患兒T 淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）進行檢測[5-9]。

1.4 統計學方法 應用SPSS 20.0 工具進行處理，計量資料（比如[25（OH）D3]、IFN-γ 等指標）用（）表示（組間對比采用t 檢驗），P＜0.05 為對比差異有統計學意義。

2 結果

2.1 免疫球蛋白對比 反復呼吸道感染組治療前、治療后與對照組的IgG、lgA、IgM 水平結果，見表1。

表1 兩組治療前后免疫球蛋白對比（）

表1 兩組治療前后免疫球蛋白對比（）

注：與治療前對比，*P＜0.05；與對照組對比，#P＜0.05。

2.2 兩組25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 對比 反復呼吸道感染組治療前25（OH）D3、IFN-γ 水平較對照組低，IL-4 水平較對照組高（P＜0.05），治療后，反復呼吸感染組25（OH）D3、IFN-γ 水平顯著提高，IL-4水平顯著降低（P＜0.05），治療后25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 與對照組對比無明顯差異（P＞0.05），見表2。

表2 兩組25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 對比（）

表2 兩組25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 對比（）

2.3 兩組T 淋巴細胞亞群水平對比 反復呼吸道感染組治療前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較對照組低，CD8+水平較對照組高（P＜0.05），治療后，反復呼吸感染組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平顯著提高，CD8+水平顯著降低（P＜0.05），治療后T 淋巴細胞亞群水平與對照組對比，無統計學差異（P＞0.05），見表3及圖1。

圖1 兩組T 淋巴細胞亞群水平

表3 兩組T 淋巴細胞亞群水平

3 討論

RRI 臨床主要表現為咳嗽咳痰、流鼻涕、乏力等，與一般呼吸道感染相似，但由于該病反復發作，病程遷徙，不及時治療容易誘發其他系統疾病[10]。小兒由于呼吸系統發育尚未完善，其鼻腔相對成年人短且狹窄，故而更易發生微生物感染[11-12]。除此之外，小兒免疫細胞功能與氣道體液免疫功能相對薄弱，如T 淋巴細胞含量少且功能差，氣道分泌物中含可抗病原菌的物質（如干擾素、補體等）少，使得小兒成為RRI 的主要發病人群[13]。

IgA、IgG、IgM 是體液免疫的主要組成部分，是反映體液免疫功能的主要指標。25（OH）D3 有調節細胞免疫的作用，IFN-γ、IL-4 為反映炎性因子的指標，其中IFN-γ 能夠抑制IL-4 水平，減輕炎性癥狀；T 淋巴細胞亞群則是反映細胞免疫功能的指標[14]。本次研究中，反復呼吸道感染組治療前，IgG、IgA、IgM、25（OH）D3、IFN-γ 水平較對照組低（P＜0.05），IL-4 水平較對照組高，治療后，反復呼吸感染組IgG、IgA、IgM、25(OH)D3、IFN-γ 顯著提高，IL-4水平顯著降低（P＜0.05），治療后與對照組對比，無統計學差異（P＞0.05）。

T 淋巴細胞亦可簡稱為T 細胞，主要來源于骨髓的淋巴干細胞，并且在胸腺中發育并成熟[15]。T細胞的異質性較高，根據T 細胞表面標志物以及分化抗原的差異，分為不同的亞群，主要包括CD4和CD8 T 淋巴細胞二個亞群，生理狀態下，T 細胞的數目和亞群的比例維持在恒定水平，其中CD4占T 淋巴細胞的60%～65%，CD8 占30%～35%，CD4 和CD8 的比例在正常機體中處于穩定狀態，各個亞群之間既相互協作又相互制約，當機體免疫狀態發生改變時，二者的比值隨之變化[16-17]。T 細胞具有介導細胞適應性免疫作用，是發揮細胞免疫的主要細胞。成熟的T 細胞中只能檢測到CD4或CD8 分子的表達，而這兩種分子的主要作用是在T 細胞抗體對抗原進行識別或者對T 細胞活化信號進行傳導時，起輔助作用[8]。CD4 主要分布在T細胞的輔助細胞誘導亞群和抑制細胞誘導亞群表面，CD4 的結構是一條單鏈的跨膜蛋白，在其遠膜端的2 個結構域結合主要組織相容性抗原Ⅱ的β2的結構域，對T 細胞轉化為效應細胞和B 細胞生成抗體具有輔助作用。CD8 主要分布抑制性T 淋巴細胞和殺傷性T 淋巴細胞表面，CD8 是由兩條肽鏈組成的，即組成的異二聚體（CD8α 和β）的細胞外區各包含一個結構域，該結構與能夠結合MHC I 類分子的α3 功能區，進而使信號發生轉導。CD8 還可直接將靶細胞裂解，或者將其殺死，主要作用機制由穿孔素、顆粒酶、淋巴毒素相互作用完成的，CD8 通過作用Fasl 促進靶細胞的凋亡[19]。CD3 屬于T 細胞的另一個亞群，具有5 種肽鏈的跨膜蛋白，表達于所有T 細胞表面。CD3 主要與TCR 相結合形成復合物，CD3 的作用是將TCR 通過對抗原所產生的活化信號進行識別，活化信號轉導至T 細胞中[20]。CD3 是所有T 細胞的表面標志物，因此CD3 的數值可反應T 細胞狀態。通過對CD3、CD4、CD8 進行研究，了解T 細胞的反應情況。反復呼吸道感染組治療前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較對照組低，CD8+水平較對照組高（P＜0.05），治療后，反復呼吸道感染組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平顯著提高，CD8+水平顯著降低（P＜0.05），治療后T 淋巴細胞亞群水平與對照組對比差異無統計學意義（P＞0.05）。

綜上所述，RRI 患兒細胞因子及T 淋巴細胞亞群存在異常，可用于評估病情，而且有利于評估治療效果。