CLCN7基因突變致Ⅱ型常染色體顯性遺傳性骨硬化癥1例報告并文獻復習

劉雪婷 王雙義

(1 鎮江市第四人民醫院口腔科,江蘇 鎮江 212008; 2 青島大學附屬醫院口腔頜面外科)

骨硬化癥又稱石骨癥,是一種以骨吸收障礙、骨密度異常增高為特點的遺傳性骨骼疾病[1],臨床上以骨骼廣泛硬化為特征。該病遺傳方式包括常染色體隱性遺傳、常染色體顯性遺傳(ADO)及X染色體遺傳[2],其中ADO有ADOⅠ、ADOⅡ以及ADOⅢ 3種亞型。ADOⅡ最為常見的病因是CLCN7基因突變[3],該基因雜合突變可引起部分破骨細胞氯離子通道功能的缺陷,從而使骨吸收酸性微環境受損,影響骨的吸收能力,導致骨形成和骨吸收不平衡,引起骨硬化癥[4-8]。本研究通過對1例ADOⅡ患者及其家庭成員的臨床特點及遺傳特點進行分析,并以CLCN7作為候選基因進行基因檢測,以提高對該病認識,為骨硬化癥的分類、診斷和治療提供依據。

1 臨床資料

患者,男,80歲,因左下后牙區腫痛3個月就診于青島大學附屬醫院口腔頜面外科。入院情況:咀嚼及張口時左下后牙區疼痛,無發熱。于外院應用青霉素和頭孢類抗生素治療20 d,局部疼痛及腫脹情況緩解不明顯。18年前曾出現左下肢骨折?？趦葯z查:上頜牙列缺失,下頜34～37區下頜骨下緣略膨隆,壓痛,下唇無麻木感。36殘根,35、37中齲,無叩痛,38牙槽窩空虛、質硬,無肉芽,可探及骨質?？谇磺鏀鄬邮旧舷骂M骨高密度影,左下頜骨體部見骨質破壞,病變周圍界限清晰,有死骨形成。全身X線檢查顯示顱骨、胸骨、肋骨、髂骨骨質密度增高,骨髓腔狹小,腰椎呈“夾心蛋糕狀”。初步診斷:左下頜骨中央性頜骨骨髓炎并死骨形成。全麻下行左下頜骨骨髓炎刮治術并死骨摘除術,術中將下頜骨骨髓炎肉芽腫及死骨送檢,病理診斷示(下頜骨骨髓)慢性化膿性炎伴肉芽組織增生、(下頜骨)部分壞死骨組織。術后給予補液、抗感染治療。出院時患者一般情況良好,左下頜區無腫痛,口內切口無滲血,愈合良好。

通過詳細詢問患者及其親屬得知:患者已過世的父親在中年時曾有過肢體骨折,老年時因頜面部間隙感染而死亡,推測其可能也患有骨硬化癥;患者妹妹也曾因頜骨骨髓炎就診于我院口腔科,全身X線檢查示顱骨、胸骨、肋骨骨質密度增高,確診為骨硬化癥;患者兒子健康,43歲時骨盆X線顯示髂骨密度增高,未出現過骨折、骨髓炎等癥狀;患者第三代出現的1例骨硬化癥患者,在18歲時因意外致左下肢骨折,經骨折復位內固定后恢復良好,X線檢查確診為骨硬化癥?；颊呒捌洳糠旨覍倬哂械湫偷腁DOⅡ影像學改變,根據家系遺傳特點及臨床癥狀分析,符合ADOⅡ型骨硬化癥[9]。

本研究遵守醫學研究的倫理和知情同意原則,采集該患者及其妻子和女兒的外周靜脈血,并采用PCR方法擴增CLCN7基因的外顯子,將擴增出的PCR產物純化測序篩選突變位點(由上海天昊遺傳分析中心完成基因檢測)。該患者CLCN7基因外顯子的純化測序分析結果顯示,CLCN7的24號外顯子處發生了核苷酸突變(雜合突變),突變位點為p.Arg743Trp,即編碼CLCN7蛋白序列的743號氨基酸突變,精氨酸(Arg)突變為色氨酸(Trp)。見圖1。2名親屬中未發現該突變。

圖1 患者基因檢測結果

2 討 論

ADOⅡ患者典型X線表現為椎體上下緣密度增高,呈現“夾心蛋糕”狀。四肢干骺端呈“酒瓶征”;髂骨呈“骨中骨”[10]。臨床表現多樣,包括長骨骨折、骨關節炎、骨髓炎等。其中頜骨骨髓炎是骨硬化癥患者常見的并發癥之一。牙源性感染如齲病、牙周炎等容易導致頜骨感染。頜骨骨質硬化、骨髓腔消失均會導致骨硬化癥患者骨骼本體血供欠佳,頜骨抗感染能力差,在牙源性感染基礎上易并發頜骨骨髓炎[11]。既往報道顯示,很多骨硬化癥患者因頜骨骨髓炎首診于口腔科,該例患者及其妹妹均因頜骨骨髓炎就診于口腔科,后被確診為骨硬化癥。

CLCN7是ADOⅡ主要致病基因,位于人類染色體16p13.3,由25個外顯子構成。目前所有報道中的ADOⅡ病例都與CLCN7基因突變有關,其中大約70%的ADOⅡ患者是由CLCN7基因的雜合錯義突變引起的[12-14]。因此本研究以CLCN7作為候選基因,對該家族部分成員進行基因檢測。既往研究結果發現CLCN7基因突變位點包括G215R、L213F、P249L、R286W、DL688、R767W等[10,15]。熱點突變位點則為R286W(42%)、G215R(31%)、R767W(19%)[16]。本研究中發現的患者經基因檢測發現,編碼CLCN7蛋白序列的743號氨基酸發生突變,精氨酸突變為色氨酸,屬于CLCN7第24外顯子的錯義突變,該突變為已知突變。WANG等[17]曾于2012年報道過同樣位點突變的患者,為31歲女性,臨床表現為背痛,X線檢查示腰椎呈典型的“夾心蛋糕”狀,髂骨及顱底密度增高。

目前該疾病無有效治療藥物,只能對癥治療。此類家系患者主要臨床癥狀為頜骨骨髓炎和骨折,臨床上可以通過對家系成員進行口腔衛生宣教、牙齒定期檢查等方式預防頜骨骨髓炎發生,避免劇烈運動以預防骨折發生。雖然ADOⅡ多為CLCN7雜合子錯義突變,患者的臨床表型不如純合子患者嚴重,但是可以在青年或晚年時期出現骨折、頜骨感染、神經壓迫綜合征等癥狀,嚴重影響著患者的生活質量[18]。ADOⅡ表型有著顯著的異質性以及地域特點,因此在本研究當中發現的CLCN7突變位點p.Arg743Trp可為本地區骨硬化癥人群今后在基因層面的診斷和治療提供參考依據。

作者聲明：所有作者均參與了研究設計、論文的寫作和修改。所有作者均閱讀并同意發表該論文,并均聲明不存在利益沖突。