三種酶解蛋白肽分別替代部分魚粉對凡納濱對蝦幼蝦生長、體組成和抗氧化性能的影響

鮑清華 夏輝 楊煜潔 黃小容

摘 要：為研究使用低值動物酶解蛋白替代部分魚粉對凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）生長、體組成和抗氧化性能的影響，以初始體重為（0.05±0.01）g的凡納濱對蝦為研究對象，進行為期8周的養殖試驗，未替代魚粉組為對照組，用5%的魷魚肽、魚肽和雞肽分別替代飼料中的魚粉為替代組，配制4種等氮等脂飼料。結果表明：魷魚肽組和魚肽組與對照組相比特定生長率顯著提高，而雞肽組無顯著差異，與對照組相比僅魷魚肽組粗蛋白含量顯著增加，各替代組的粗脂肪含量均顯著升高。各替代組肝胰腺T-AOC活性均顯著上升。與對照組相比，魷魚肽組SOD、GSH-Px和CAT的活性均顯著上升，而魚肽和雞肽組均未顯著上升，各替代組血淋巴和肝胰腺中MDA含量均顯著下降，魷魚肽組上調了Nrf2基因表達和HO-1基因表達，下調了Keap1基因表達。綜上所述，魷魚肽和魚肽對凡納濱對蝦幼蝦的生長性能都有著顯著的促進作用，但在提高對蝦的營養水平，促進抗氧化基因的表達，減少抗氧化過程對機體內細胞的損傷方面，魷魚肽效果更佳。

關鍵詞：凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）；酶解蛋白；生長性能；抗氧化性能

凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）是我國對蝦主導養殖品種，養殖產量呈現逐年遞增的趨勢，2022年養殖產量達到209.87萬t，比2021年增長了12.99%[1]。隨著凡納濱對蝦養殖規模的增加，對蝦飼料需求量增加，魚粉的需求量也隨之飆升。然而，魚粉受海洋捕撈量、極端天氣以及海洋環境等多方面因素的影響，出現了供求關系失衡的狀況。目前，尋求價格低廉、來源廣泛、以及對生態環境沒有負影響的魚粉替代蛋白源已成為當務之急。

現階段，利用低值動物蛋白酶解后的產品替代魚粉成為解決魚粉短缺問題極具經濟價值的方式。Zhou等[2]研究表明在低值飼料中添加3%的魷魚水解物增加了對蝦的攝食量，降低了魚粉使用量，節約了飼料成本，對生長性能未表現負面影響。低值蛋白經過酶解后，蛋白質以游離氨基酸、小肽和寡肽的形式存在，由于動物機體對小肽和寡肽的吸收效率遠遠高于氨基酸，因此酶解后的蛋白對生長具有促進作用。此外，酶解動物蛋白除了為水產動物提供營養外，還兼具其他功能特性，在黃顙魚、凡納濱對蝦、美洲黑石斑幼魚和大菱鲆幼魚等研究中表明，酶解蛋白能夠提高水產動物生長性能、抗氧化性能和誘食效果等[3-6]。Hlordzi[7]研究表明，水解魚蛋白粉替代魚粉對凡納濱對蝦的增重率、特定生長率和體組成等生長性能有積極影響。在水解魷魚內臟投喂真鯛魚的研究表明，水解魷魚內臟促進了真鯛魚的消化能力和攝食量，顯著提高真鯛魚的生長性能[8]。

目前，有關酶解動物蛋白對水產動物的生長性能和抗氧化性能影響的研究很多，但是飼料中魷魚肽、魚肽和雞肽分別替代部分魚粉對凡納濱對蝦幼蝦影響的對比研究未見報道。本研究針對當前狀況，在飼料中添加三種不同酶解動物蛋白肽對凡納濱對蝦幼蝦生長、體組成以及抗氧化性能進行了研究，為酶解蛋白在凡納濱對蝦幼蝦飼料中的開發利用提供一定的實驗數據和理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

試驗中使用的原料有魚粉、豆粕、面粉、血粉、魚油、豆油及添加劑，根據飼料配方（見表1）制作4組等氮等脂等能試驗飼料：在本研究中，以魚粉含量25%的基礎飼料為對照組，分別以5%酶解魷魚膏（魷魚肽組）、酶解鱈魚排（魚肽組）和酶解雞架（雞肽組）替代基礎飼料中的魚粉，制備3種飼料。原料粉碎過80目篩后按照配方混勻，用雙螺桿擠條機擠壓成粒徑1.0 mm的飼料，置于烘箱60 ℃熟化30 min后，自然風干，-20 ℃凍存備用。

1.2 試驗養殖管理

將購買同一批次的蝦苗暫養7 d，然后選用大小均勻，體型健壯的蝦苗進行分組，每組設置3個平行，每個水箱120尾蝦苗，蝦苗的初始平均體重為（0.05±0.001）g，試驗用的水箱大小為0.12 m3，養殖試驗周期為56 d。養殖期間，每天投喂5次，日投喂量控制在蝦體重的6%～12%，每天換水2次，每次換水量為1/3。養殖期間不間斷供氧，水中溶解氧含量＞6.0 mg/L，海水鹽度為（30±1）‰，水溫保持在27～28 ℃，pH值為7.5～8.5，氨氮＜0.2 mg/L，亞硝酸鹽含量＜0.2 mg/L。

1.3 樣品采集與分析

養殖試驗56 d后，禁食24 h，測定全蝦生長性能指標。每組隨機抽取10尾，其中5尾用于全蝦體成分分析，剩余5尾采集圍心腔血淋巴，離心（4 ℃，4 000 r/min，10 min）取上清液；取血后置于冰盤上，解剖取出肝胰腺組織，保存于-80 ℃備用，用于測定酶活指標及總RNA的提取。

1.4 測定指標和方法

1.4.1 常規成分及體成分測定指標 水分測定用105 ℃烘干恒重法；粗蛋白含量用凱氏定氮法測定，粗脂肪用索氏抽提法測定，灰分用馬弗爐550 ℃灼燒至恒重。

1.4.2 肝胰腺和血淋巴抗氧化指標 總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性以及丙二醛（MDA）的含量均采用南京建成生物科技有限公司的試劑盒測定，檢測方法嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.4.3 RNA分析和PCR熒光定量 提取肝胰腺組織的總RNA，并用生物分析儀和瓊脂電泳法檢測RNA完整性，用顯微分光光度計測定RNA純度和濃度，用熒光定量PCR檢測和定量RNA特定序列，引物序列見表2，運行geNorm軟件作內參優選，選出EF1-α作為最優內參，并計算各組基因相對表達量。

1.4.4 數據統計與分析 試驗數據用SPSS 260分析軟件進行單因素方差分析（one-way ANOVA），用Duncan′s均值多重比較法對試驗結果差異顯著性進行分析，差異顯著時（P<005），用GraphPad 8.0作圖。

2 結果

2.1 酶解蛋白替代魚粉對凡納濱對蝦生長性能的影響

三種酶解蛋白替代魚粉對凡納濱對蝦幼蝦生長性能的影響見表3，魷魚肽組和魚肽組的終末體重（FBW）、增重率（WGR）和特定生長率（SGR）與對照組相比均顯著升高（P<0.05）；試驗各組間飼料系數（FCR）、蛋白質效率（PER）、出肉率（MR）和肝體比（HBI）均無顯著性差異（P>0.05）。

2.2 酶解蛋白替代魚粉對凡納濱對蝦體成分的影響

由表4可知，全蝦粗蛋白含量除魷魚組顯著高于對照組外（P＜0.05），其他各組均顯著降低（P＜0.05）；與對照組相比，替代組全蝦粗脂肪均顯著高于對照組（P＜0.05）；與其他組相比，僅雞肽組全蝦灰分含量顯著升高（P＜0.05）；全蝦水分含量各組間均無顯著性差異（P>0.05）。

2.3 酶解蛋白替代魚粉對凡納濱對蝦幼蝦抗氧化及相關基因表達的影響

由圖1可知，3個替代組肝胰腺中T-AOC活性均顯著高于對照組，但魷魚肽組更明顯（P＜0.05），而在血淋巴中只有魷魚肽組T-AOC活性顯著高于對照組，其他替代組并沒有觀察到顯著差異（P＞0.05）。由圖2可知，在肝臟中，魷魚肽組的SOD和GSH-PX的活性與對照組相比均顯著升高（P＜0.05），而CAT的活性除魷魚肽組與對照組相比沒有顯著性差異外（P＞0.05），其他各組間CAT活性均顯著下降（P＜0.05），試驗各組間MDA含量與對照相比均顯著下降（P＜0.05）；在血淋巴中，與對照組相比，CAT的活性魷魚肽顯著上升（P＜0.05），雞肽組顯著下降（P＜0.05），而魚肽組沒有差異（P＞0.05）。所有試驗組血淋巴的MDA含量均表現出顯著下降（P＜0.05）。由圖3可知，魷魚肽組中Nrf2基因表達與對照組相比顯著上調，而其他試驗組中Nrf2基因表達顯著下降。在試驗各組中，Keap1基因表達均顯著下降（P＞0.05）。此外，Nrf2基因表達與Keap1基因表達的相對量呈負相關關系。魷魚肽組HO-1基因表達與對照組相比顯著上調（P＜0.05），其他各組間HO-1基因表達與對照組相比均沒有顯著性差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 三種酶解蛋白分別替代部分魚粉對凡納濱對蝦生長的影響

本研究生長結果表明，魷魚肽組和魚肽組凡納濱對蝦幼蝦的生長性能顯著提高，雞肽組與基礎組無顯著性差異。魷魚本身具有強烈的芳香魚腥味，添加到飼料中能夠起到誘食劑的作用，因此能夠提高生物的攝食率，增強其生長性能。已有研究表明，酶解魷魚內臟粉或魷魚膏添加到飼料中，對提高凡納濱對蝦、中華鱉和真鯛魚的攝食性能和生長性能均有顯著影響[9-11]。呂斌等[3]的研究表明，酶解魷魚內臟粉中含有的豐富游離氨基酸、小肽、?；撬嵋约捌渌麪I養因子，飼料中酶解魷魚內臟粉替代3%的魚粉，可以顯著提高黃顙魚的攝食率，促進其生長性能的提升。酶解蛋白肽中的小肽或寡肽被轉運進入小腸黏膜的吸收細胞，在腸黏膜相應的小肽載體作用下直接進入血液循環系統。由于小肽間的吸收是相互獨立，因此小肽或寡肽能夠快速地被生物機體吸收利用，促進生物機體的蛋白質代謝，進而提高其生長性能。Hlordzi等[12]的研究表明，水解魚副產物中的小肽更易于被腸細胞吸收，當替代4%的魚粉時，顯著提高了對蝦生長性能。在對克林雷式鲇（Rhamdia quelen）的研究中顯示，飼料中添加水解魚蛋白提高了其生長性能，魚蛋白水解物含有豐富的氨基酸和營養物質，可以增加魚類的攝食率，并促進其生長和發育[13]。目前，也有研究表明，酶解雞漿或酶解家禽副產物對大口黑鱸和凡納濱對蝦的生長無促進作用[14-15]。Hlordzi[7]研究表明，酶解雞肉漿對凡納濱對蝦的生長性能沒有明顯影響。該結論與本研究中雞肽組對凡納濱對蝦幼蝦的生長性能無顯著影響基本一致。酶解蛋白肽中的小肽或寡肽能夠快速地被生物機體吸收利用，酶解物小肽的快速吸收特性能夠促進生物體的蛋白質代謝，提高其生長性能。然而，還需要進一步的研究來探索小肽或寡肽的特性和作用機制。此外，從本研究結果看，魷魚肽組和魚肽組促生長效果要優于雞肽組，這可能是三種酶解動物蛋白肽中的小肽分子量分布和游離氨基酸的含量差異，以及魷魚肽和魚肽所具有的誘食性能所致。因此下一步還需要對三種酶解動物蛋白肽中小肽、寡肽及氨基酸的分布情況進行更深入的研究和探討。

3.2 三種酶解蛋白分別替代部分魚粉對凡納濱對蝦體成分的影響

高質量的蛋白源能夠提高生物機體消化吸收利用率，促進機體生長和組織更新[16]。本研究中魷魚肽組的全蝦粗蛋白含量顯著高于其他組。王寧等[17]研究表明，添加魷魚組，促進全蝦粗蛋白質的合成，提高了凡納濱對蝦粗蛋白含量，效果優于酶解魚漿和酶解蝦漿組，可能是魷魚組飼料中組胺含量更低，顯著提高了凡納濱對蝦腸道酶蛋白活性。魷魚肽中高蛋白源營養物質，能夠更好地提高凡納濱對蝦幼蝦的消化吸收利用率，并增加其全蝦粗蛋白含量。本研究發現，雞肽組的全蝦粗蛋白含量與對照組相比顯著降低，而灰分含量則顯著升高。這表明凡納濱對蝦幼蝦對雞肽的吸收利用率較低，可能導致全蝦粗蛋白含量的下降。三種酶解蛋白中小肽或氨基酸營養成分含量存在差異，可能是導致吸收利用率不同的一個原因。然而，具體的機制仍需要進一步的研究來探索。

本研究中三個替代組全蝦粗脂肪含量均顯著高于對照組。肝體比通?？梢宰鳛楦闻K脂肪或糖原蓄積的表觀指標，但飼料中添加酶解蛋白均未對凡納濱對蝦幼蝦的肝體比造成顯著的影響，推測可能是對蝦體內脂肪含量的增加并不足以引起脂肪在肝臟中沉積。呂斌等[18]研究表明，隨著飼料中酶解溶漿粉（魚、魷魚）添加水平的增加，黃顙魚的粗脂肪含量呈現逐漸下降的趨勢，添加過高水平的酶解溶漿粉，影響黃顙魚腸道對營養物的吸收利用率，因吸收的營養物質不平衡導致生長發育受阻，增加了脂肪消耗的速率，魚體粗脂肪含量下降。王銨靜等[19]研究發現2%～3%酶解蛋白能顯著降低凡納濱對蝦幼蝦肌肉粗脂肪含量。Li等[20]研究表明，添加小肽會顯著增加大口黑鱸肌肉粗蛋白與粗脂肪含量。根據本研究的生長性能以及肝體比等生長指標分析，三種不同酶解肽能夠滿足其正常生長的營養需要，生長發育中脂肪累積速率大于脂肪消耗速率，因此，魷魚肽組的脂肪利用要優于魚肽和雞肽組。

3.3 三種酶解蛋白分別替代部分魚粉對凡納濱對蝦抗氧化及相關基因表達的影響

總抗氧化能力（T-AOC）水平的高低反映了機體防御系統抗氧化能力的綜合性指標[21]。Keap1-Nrf2介導氧化還原反應體系，是生物機體內源性抗氧化信號通路的重要組成部分[22]。Nrf2是一種氧化還原敏感轉錄因子，主要功能是調節細胞保護的基因。Keap1負向調節Nrf2的功能，Keap1-Nrf2信號通路可激活調控機體內一些抗氧化酶和蛋白質的表達和轉錄，并參與炎癥、腫瘤、細胞凋亡、細胞自噬和病毒感染等過程[23]。當生物機體發生氧化應激時，激活了Nrf2調控的下游靶基因包括SOD、GSH-Px、HO-1、CAT等基因的表達[24]。SOD、CAT和GSH-Px是酶促抗氧化防御系統的基本成分，它們共同參與機體氧化損傷的防御，其活性與生物機體免疫性能和外界環境脅迫有關[25]。MDA是脂質過氧化反應的終產物，是氧化損傷的重要標志物。HO-1血紅素氧合酶1（Heme Oxygenase-1）是Nrf2主要依賴性基因，HO-1能夠抵御機體氧化應激產生的過氧化物和超氧化物自由基對機體的損傷，在抗氧化防御和細胞凋亡預防中起重要作用[24]。本研究結果表明，魷魚肽的總抗氧化能力顯著上升，上調了凡納濱對蝦Nrf2基因表達，激活后的Nrf2調控下游靶基因SOD、GSH-Px、HO-1和CAT的表達顯著上升，下調Keap1基因表達，降低了MDA的含量，抑制了幼蝦機體細胞損傷，而魚肽和雞肽組雖然總抗氧化能力顯著上升，但是下調了Nrf2和Keap1基因表達。Jiang等[26]研究表明，魷魚肽中的小分子活性肽對自由基清除能力，以及增強抗氧化活性起著至關重要的作用，小分子活性肽可以作為生物食物中的抗氧化劑，具有抗氧化性、非特異性免疫和抗菌性。Suárez-Jiménez等[27]研究表明，水解魷魚副產物具有抗氧化、抗突變和抗增殖活性，水解后的魷魚副產物的抗氧化性增強是由于水解后產生的肽含有電子供體，這些電子供體更容易與自由基發生反應，將它們轉化為更為穩定的產物，從而終止自由基鏈式反應。凡納濱對蝦的研究表明，當飼料中添加5%的魷魚膏和1.5%的魚油時，可以增強肝胰腺中SOD的活性，清除凡納濱對蝦體內過多的自由基，保護肝胰腺細胞免受毒害，同時也提高了CAT的活性，降低了MDA活性以及機體細胞應激反應帶來的損傷，增強機體吞噬細胞的防御能力，進而提高其抗病力，促進其健康生長[28]。本研究說明魷魚肽在調節Nrf2信號通路中的潛在作用機制，通過上調Nrf2基因的表達，調控抗氧化防御系統，降低Keap1基因的表達，魷魚肽有助于增強機體的抗氧化能力，減輕由氧化應激引起的細胞損傷。然而，魚肽和雞肽組展示了對Nrf2和Keap1基因表達不同的調節效果?？赡苷f明魷魚肽中小肽物質有助于防止凡納濱對蝦發生脂質過氧化，從而降低了MDA的含量，減少對細胞的氧化毒性損傷。它們對于增強生物體的抗氧化能力的重要作用，特別是魷魚肽中的小分子活性肽在清除自由基、增強抗氧化活性等方面具有重要的功能，是一種有潛力的抗氧化劑。然而，需要進一步探究魷魚肽中小肽的特性和效果，以及其抗氧化方面的應用潛力。

未來的研究可以探討不同酶解蛋白中的營養成分對Nrf2信號通路的調節作用以及調控下游抗氧化防御系統，更進一步探索細胞氧化應激反應和氧化還原平衡調節的分子機制，為開發水產養殖中新的酶解蛋白源提供理論支持。

4 結論

通過對凡納濱對蝦幼蝦生長、體組成、抗氧化能力以及相關基因表達的影響分析，研究結果表明魷魚肽組在促進凡納濱對蝦的生長、改善體組成、增強抗氧化能力以及調節相關基因表達等方面表現出最佳效果。其次是魚肽，雖然其效果略遜于魷魚肽組，但仍然對凡納濱對蝦的生長和健康發育產生了積極影響，這為水產養殖業飼料中添加魷魚肽、魚肽和雞肽等肽類飼料添加劑的使用提供重要參考數據。

參考文獻：

[1]農業農村部漁業漁政管理局，全國水產技術推廣總站，中國水產學會.2023中國漁業統計年鑒[M].北京：中國農業出版社，2023：1-144.

[2] ZHOU Y A，THIRUMURUGAN R，WANG Q K，et al.Use of dry hydrolysate from squid and scallop product supplement in plant based practical diets for Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei[J].Aquaculture，2016，465：53-59.

[3] 呂斌，孫飛，呂昊，等.黃顙魚飼料中酶解魚溶漿粉、酶解蝦溶漿粉和酶解魷魚內臟溶漿粉替代魚粉的研究[J].動物營養學報，2021，33（9）：5363-5378.

[4] WEI H J，TAN B P，YANG Q H，et al.Growth， nonspecific immunity， intestinal flora， hepatopancreas， and intestinal histological results for Litopenaeus vannamei fed with diets supplement with different animal by-products[J].Aquaculture Reports，2023，29：101521.

[5] DAWSON M R，ALAM M S，WATANABE W O，et al.Evaluation of poultry byproduct meal as an alternative to fish meal in the diet of juvenile black sea bass reared in a recirculating aquaculture system[J].North American Journal of Aquaculture，2018，80（1）：74-87.

[6] ZHUANG Y W，ZHANG W C，ZHENG J C，et al.Effects of enzymatic hydrolysis chicken by‐product in high plant‐based protein diet on growth performance， digestive capacity， antioxidant capacity and non‐specific immunity of juvenile turbot （Scophthalmus maximus L.）[J].Aquaculture Nutrition，2021，27（5）：1578-1589.

[7] HLORDZI V. 水解魚蛋白粉和家禽副產品粉對凡納濱對蝦和珍珠龍膽石斑魚生長性能和肝腸健康的影響[D].湛江：廣東海洋大學，2022.

[8] KONDO F， OHTA T， IWAI T，et al.Effect of the squid viscera hydrolysate on growth performance and digestion in the red sea bream Pagrus major[J].Fish physiology and biochemistry，2017，43（6）： 1543-1555.

[9] HE G L， CHEN X， ZENG Q T，et al. Effects of compound feed attractants on growth performance， feed utilization， intestinal histology， protein synthesis， and immune response of white shrimp （Litopenaeus vannamei）[J].Animals，2022，12（19）：2550.

[10] 孫存鑫.中華鱉低魚粉飼料開發及其蛋白代謝和攝食調控的研究[D].南京：南京農業大學，2019.

[11] KHOSRAVI S，RAHIMNEJAD S，HERAULT M，et al.Effects of protein hydrolysates supplementation in low fish meal diets on growth performance， innate immunity and disease resistance of red sea bream Pagrus major[J]. Fish & shellfish immunology， 2015， 45（2）： 858-868.

[12] HLORDZI V，WANG J Q，FELIX K.A.et al.Hydrolysed fish protein powder is better at the growth performance， hepatopancreas and intestinal development of Pacific white shrimp （Litopenaeus vannamei）[J].Aquaculture Reports，2022，23：101025.

[13] HA N，ALVES JESUS G F，NASCIMENTO GONALVES A F，et al.Sardine （Sardinella spp.） protein hydrolysate as growth promoter in South American catfish （Rhamdia quelen） feeding： Productive performance， digestive enzymes activity， morphometry and intestinal microbiology [J].Aquaculture，2019，500：99-106.

[14] 馮轉東，廖瑞生，孫皓，等.飼料中添加酶解雞漿對大口黑鱸肝臟抗氧化能力、腸道物理屏障和腸道菌群的影響[J].水產學報，2022，46（10）：1824-1835.

[15] 路晶晶，郭冉，夏輝，等.家禽副產物酶解肽對凡納濱對蝦生長性能、消化指標和非特異性免疫指標的影響[J].動物營養學報，2018，30（2）：797-806.

[16] 李二超，陳立僑，顧順樟，等.水產飼料蛋白源營養價值的評價方法[J].海洋科學，2009，33（7）：113-117.

[17] 王寧，鄧登，馬迎飛，等.軟顆粒飼料中替代魚粉對選育中間養成階段的凡納濱對蝦生長性能、體組成和免疫的影響[J].中國飼料，2023（23）：114-120.

[18] 呂斌，易皓明，馬杰，等.酶解魷魚內臟漿超濾分離物對黃顙魚生長性能和生理健康的影響[J].飼料工業，2023，44（6）：83-95.

[19] 王銨靜，楊奇慧，譚北平，等.大豆酶解蛋白對凡納濱對蝦幼蝦生長性能、血清生化指標、非特異性免疫力和抗病力的影響[J].廣東海洋大學學報，2018，38（1）：21-24.

[20] LI X，WEI X，GUO X，et al.Enhanced growth performance， muscle quality and liver health of largemouth bass （Micropterus salmoides） were related to dietary small peptides supplementation[J]. Aquaculture Nutrition， 2020， 26（6）：2169-2177.

[21] ZHANG C N，LI X F，XU W N et al.Combined effects of dietary fructooligosaccharide and Bacillus licheniformis on innate immunity， antioxidant capability and disease resistance of triangular bream （Megalobrama terminalis）[J].Fish & shellfish immunology， 2013， 35（5）： 1380-1386.

[22] 王際英，姜柯君，夏斌，等.小肽對星斑川鰈幼魚消化酶活性、抗氧化能力和生化組成的影響[J].中國水產科學，2014，21（6）：1154-1164.

[23] WANG W L，JIANG D T，YI G F，et al.An evaluation of replacing soybean meal with proteolytic soybean meal in low-fish-meal diet on growth performance， expression of immune-related genes， and resistance against Vibrio alginolyticus in white shrimp （Litopenaeus vannamei）[J].Aquaculture Nutrition， 2022：8384917.

[24] 黃永雄. Nrf2在凡納濱對蝦抗氧化應激中的作用[D].湛江：廣東海洋大學，2022.

[25] TEIXEIRA T M，DA COSTA D C，RESENDE A C，et al.Activation of Nrf2-antioxidant signaling by 1， 25-dihydroxycholecalciferol prevents leptin-induced oxidative stress and inflammation in human endothelial cells[J]. The Journal of nutrition， 2017， 147（4）： 506-513.

[26] JIANG W，LIU Y，YANG X，et al.Recovery of proteins from squid by-products with enzymatic hydrolysis and increasing the hydrolysate’s bioactivity by Maillard reaction[J].Journal of Aquatic Food Product Technology， 2018， 27（8）： 900-911.

[27] SUREZ-JIMNEZ G M，ROBLES-SNCHES R M，YPIZ-PLASCENCIA G，et al.In vitro antioxidant， antimutagenic and antiproliferative activities of collagen hydrolysates of jumbo squid （Dosidicus gigas） byproducts[J]. Food Science & Technology， 2015，35（3）：421-427.

[28]馮田.魷魚膏替代物對凡納濱對蝦生長、免疫及抗氧化性能的影響[D].廣州：華南農業大學，2017.

Effects of three enzymatic protein peptides replacing fishmeal on growth，body composition and antioxidant properties of juvenile Litopenaeus vannamei

BAO Qinghua， XIA Hui， YANG Yujie， HUANG Xiaorong

（College of Oceanography，Hebei Agricultural University，Qinhaungdao 066000，China）

Abstract：To understand the effects of replacing fish meal with low-value animal enzymatic protein on the growth， body composition， and antioxidant performance of Litopenaeus vannamei， L.vannamei were used as the research subjects with the initial weight of 0.05 ± 0.01 g for 8 weeks. The group which fish meal was not replaced served as the control group. The fish meal was replaced respectively with 5% of the squid peptide， fish peptide and chicken peptide in the replacement groups. Four types of equi-protein and equi-fat feeds were formulated.The results showed as follows： special growth rate of the the squid peptide group and the fish peptide group were significantly higher than the control group. the crude protein content of the squid peptide group was significantly higher than the control group in the body composition， the crude fat content was significantly higher in all substitution groups than the control group. The hepatic and pancreatic T-AOC activities significantly increased in all three enzymatic peptide groups compared to the control group. The activities of SOD， GSH-Px and CAT increased significantly in the squid peptide compared to the control group， while no significant difference were observed in fish peptide and chicken peptide groups， the content of MDA in all substitution sroups decreased significantly in hemolymph and hepatopancreas. The Nrf2 gene and HO-1 gene expression were up-regulated significantly， and the Keap1 gene expression was down-regulated significantly in squid peptide group. In conclusion， the growth performance of L.vannamei was significantly promoted in the squid peptide group and fish peptide group， but the squid peptide was better than the other groups，in improving the nutritional level of shrimp， promoting the antioxidant genes expression and reducing the damage to cells in the body during antioxidant process.

Key words：Litopenaeus vannamei; enzymatic hydrolysis protein; growth performance; antioxidant properties