微粒體
- 瑞格列奈在人肝微粒體中的酶促反應動力學及葛根素對其代謝的影響
實驗將基于人肝微粒體孵育實驗研究葛根素對瑞格列奈酶促反應動力學的影響，進而考察葛根素對瑞格列奈代謝的影響，為兩藥合用的安全性提供參考依據。1 儀器與試藥1.1 儀器超高效液相色譜儀（美國Waters 公司）；冷凍離心機（GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學儀器廠）；超低溫冰箱（MDF-U 3386S，Panasonic）；恒溫混勻儀（MTH-100，杭州米歐儀器有限公司）；渦旋混合器（XW-80A，上海醫科大學儀器廠）；電子分析天平（CPA225D，德國Sart
中南藥學 2022年10期2022-11-16
- 刺囊酸在不同種屬肝微粒體中代謝消除和酶動力學的比較研究*
等缺點，通過肝微粒體實驗研究可以發現刺囊酸在人體肝微粒體中的吸收分布和代謝情況。藥物體外代謝的體內外代謝情況的深入研究與其數據分析是具有一定程度相關性的。體外實驗研究很可能有效的用來幫助我們解釋這些臨床的醫學數據，并且它們可以用于準確評估這些藥物在人體內潛在的代謝情況。通過的體外實驗研究，人們可以發現抗癌藥物在人體內的主要細胞代謝轉化途徑和主要代謝轉化產物，為臨床前沿的研究工作提供明確的研究方向，減少了實驗的盲目性；影響酶活性的因素有很多，之中主要有時間、
廣州化工 2022年18期2022-10-22
- ACLY抑制劑脫氫彎孢霉菌素肝微粒體代謝
不同種屬來源肝微粒體中的代謝速率差異，并推測了可能的代謝產物，對DCV代謝特點做了初步探索，為DCV可藥性開發提供一定參考.1 儀器與材料1.1 儀器Ultimate 3000型高效液相色譜儀(美國Dionex公司)；Synapt G2型UPLC-Q-TOF-MS儀(美國waster公司)；Vortex genie 2漩渦儀(上海芃奇科學儀器有限公司)；Centrifuge 5418 R高速冷凍離心機(Eppendorf中國有限公司)；DK-8A型電熱恒溫
華中師范大學學報（自然科學版） 2022年5期2022-10-20
- 氯丙嗪在不同種屬肝微粒體中代謝差異研究
采用體外孵育肝微粒體的方法進行代謝研究，既可模擬藥物在體內的代謝過程[4]，又可避免體內復雜基質對結果產生影響[5]，因此，研究肝微粒體體外孵育氯丙嗪的代謝對于指導臨床用藥具有重要意義。氯丙嗪代謝產物種類多、含量低，對其分析檢測存在困難，常用的檢測方法有毛細管電泳安培法[6]、分光光度法[7]、高效液相色譜法[8]、液相色譜-質譜聯用法[9-10]、酶聯免疫法[11-12]等，其中，液相色譜-質譜法具有檢出限低、選擇性強等優點[13]，已成為目前檢測氯丙嗪
質譜學報 2022年3期2022-06-15
- 松脂醇二葡萄糖苷在人和大鼠肝微粒體中的代謝比較
藥理作用來源。微粒體體外代謝試驗快速簡便，可直接觀察酶與底物之間的相互選擇性作用，減少了諸多體內因素的干擾，能作為體內外整體研究可靠的理論來源[11]，其中肝微粒體是最有效的手段。目前，國內外尚未見松脂醇二葡萄糖苷在肝微粒體中代謝的報道，故本實驗采用高效液相色譜串聯四極桿質譜(HPLC/QQQ-MS)法比較該成分在人和大鼠肝微粒體中的代謝，以期為該成分藥理活性及作用機制的進一步研究奠定基礎。1 材料1.1 儀器 Agilent 1200高效液相色譜儀、Ag
中成藥 2022年1期2022-01-27
- 新型降糖化合物LSM-13在大鼠肝微粒體中的穩定性研究及代謝產物分析
-13在大鼠肝微粒體中的代謝穩定性，并分析其可能的代謝產物。方法：將LSM-13溶解于由還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸啟動的大鼠肝微粒體孵育體系中，置于37 ℃水浴中進行孵育，分別于孵育0、5、10、15、20、30、45、60 min時用乙腈終止反應。以吲哚美辛為內標，采用高效液相色譜法測定孵育體系中LSM-13的質量濃度。以孵育0 min時LSM-13的質量濃度為參照，計算其在不同孵育時間下的剩余百分比和酶動力學參數。采用超高效液相色譜-串聯四極桿飛行
中國藥房 2021年17期2021-09-22
- Foretinib衍生物LWK-126在不同種屬肝微粒體中的代謝穩定性研究
的：建立測定肝微粒體中Foretinib衍生物LWK-126質量濃度的方法，研究其在大鼠、比格犬、人肝微粒體中的代謝穩定性。方法：采用體外肝微粒體孵育體系，將LWK-126分別溶于由還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸溶液啟動的大鼠、比格犬、人肝微粒體孵育體系中，于37 ℃水浴下分別孵育0、5、10、20、30、60 min時加入含內標（1 μg/mL甲苯磺丁脲）的乙腈終止反應，并采用超高效液相色譜-串聯質譜法檢測各孵育體系中LWK-126的質量濃度。以Wate
中國藥房 2021年11期2021-07-20
- 白藜蘆醇抑制人肝微粒體代謝色氨酸的研究
的報道，關于肝微粒體代謝色氨酸的研究也很少。因此，本研究基于體外人肝微粒體孵育色氨酸代謝體系，探討白藜蘆醇對犬尿氨酸途徑代謝的影響；為進一步研究白藜蘆醇的藥理作用機制及色氨酸代謝提供理論依據。1 材料與方法1.1 儀器LC-20A高效液相色譜儀(Shimadzu)，配有電噴霧電離(ESI)源的API 4000 QTrap三重四極桿質譜儀(AB Sciex)；Milli-Q純化系統(EMD Millipore,Billerica)；DSHZ-300A 水浴鍋
中國藥理學通報 2021年3期2021-03-11
- 探針藥物法評價不同羥基位點苯乙酸對4種肝微粒體酶的代謝影響
研究應用大鼠肝微粒體孵育法和Cocktail探針法，與美國食品藥品監督管理局(Food and Drug Administration，FDA)推薦的探針底物[9]非那西丁、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗和睪酮在體外孵育后，利用液相色譜技術評價不同羥基位點苯乙酸對大鼠主要的CYP450酶系4種亞型CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4的體外抑制作用，以期探討不同羥基位點苯乙酸的代謝差異，為新藥合成奠定基礎。1 實驗材料1.1 實驗試劑3-羥基苯乙酸(
陜西理工大學學報(自然科學版) 2021年1期2021-03-02
- 枸櫞酸愛地那非人肝微粒體代謝產物鑒定及性別差異*
同性別來源人肝微粒體體外代謝孵育體系模型，通過超高效液相色譜-四極桿-飛行時間質譜技術，鑒定愛地那非代謝產物，探究不同性別人肝微粒體代謝差異，以期為擴大臨床應用范圍提供實驗依據。從學生的舉例中選擇一個命題，做為課堂研究的對象.如在本節課中，有同學舉例“若2b=a+c，則a,b,c成等差數列”，以下討論便圍繞此命題展開.在鉆進機構抵達限幅機構預定位置時，對接鎖合組件能夠實現限幅機構與鉆進機構的鎖定，從而使得限幅機構與鉆進機構進行隨動，保證后續的鉆取采樣作業順
醫藥導報 2020年11期2020-10-29
- 雷公藤內酯醇在不同種屬肝微粒中體外穩定性性別差異研究*
種屬不同性別肝微粒體代謝特點，再結合動物代謝性別差異體內外相關性分析，最終通過人肝微粒代謝性別研究來初步推測藥物在人體內是否存在代謝的性別差異。1 材料與方法1.1 試劑和儀器PG490，純度>98.5%，批號為020601，由北京美迪克斯生物技術有限公司提供；納曲酮，純度>99%，批號為051205，由軍事醫學科學院提供。甲醇為色譜純，乙酸乙酯為分析純，甲酸銨為分析純，實驗用水為重蒸水。Finnigan TM TSQ Quantum三級四極桿串聯質譜聯用
九江學院學報(自然科學版) 2020年1期2020-05-29
- 喜樹堿衍生物NCP4在不同種屬肝微粒體中代謝穩定性研究
酶主要存在于肝微粒體中，決定藥物代謝途徑、代謝速率，與藥物清除率直接相關[10，11]。采用體外肝微粒體溫孵系統進行代謝研究，不僅可排除體內諸多因素的干擾，還具有反應干擾小、操作簡單、代謝條件易于控制等優點。同時，體外代謝還能迅速有效地解決藥物代謝中的關鍵問題，例如代謝物結構鑒定、代謝途徑推斷等，為體內代謝研究提供重要的線索和依據[12]。為此，本研究選擇人、SD大鼠、beagle犬的體外肝微粒體溫孵體系，建立HPLC-UV-MS(Q-TOF)定性分析方法
天然產物研究與開發 2019年11期2019-12-05
- 補骨脂酚在大鼠和人肝微粒體中細胞色素P450酶和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶代謝穩定性及性別差異
、比格犬和人肝微粒體中細胞色素P450（cytochrome P450，CYP）酶的代謝穩定性和代謝動力學，并比較了種屬差異。除了CYP 酶參與補骨脂酚的代謝外，Li 等［20］研究表明，尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶（UDP-glucuronosyl transferase，UGT）也參與了補骨脂酚的代謝。目前尚無CYP酶和UGT酶同時參與補骨脂酚的體外代謝研究報道。研究該2種酶對補骨脂酚的代謝性質和性別差異，有助于了解其在體內的代謝，對指導臨床合理用藥具有
中國藥理學與毒理學雜志 2019年5期2019-10-09
- 香柑內酯在不同種屬肝微粒體中的代謝差異研究*
中最重要的肝臟微粒體混合功能酶系統，能作用于各種外源性化合物，使其在肝臟內進行生物轉化，對藥物在機體內的代謝起到極其重要的作用[8-10]。藥物代謝過程中存在的種屬差異，對于藥物的安全性評價、藥效學及藥物動力學研究具有重要的意義[11-12]。當動物與人體實驗結果存在明顯差異時，如何將動物實驗的結果外推至人體是一個難題。確切地估計藥物代謝的種屬差異，對評價動物實驗數據、科學地預測藥物毒理學、藥物動力學、藥理學特性是至關重要的[13-14]。圖1 香柑內酯F
天津中醫藥 2019年9期2019-09-18
- 玻璃珠破碎法制備重組人CYP2C9酵母微粒體的條件優化
YP2C9酵母微粒體，從而為建立更加靈敏快捷的體外代謝篩選模型提供依據。方法 利用玻璃珠破碎的方法，制備重組人CYP2C9酵母微粒體。通過改變渦旋振蕩次數和玻璃珠用量，優化制備微粒體的條件。用Lowry法測定微粒體中的蛋白含量，用CYP2C9的典型底物雙氯芬酸與微粒體進行反應，以單位時間（h）內單位蛋白（mg/ml）所對應的雙氯芬酸代謝物4-羥基雙氯芬酸的生成量來確定微粒體的蛋白活性。結果 隨著渦旋振蕩次數和玻璃珠用量的增加，所制備微粒體蛋白的含量增加。當
中國當代醫藥 2019年18期2019-09-12
- 不同種屬來源活化體系中CYP2A6 酶活及其對煙堿代謝的動力學
用不同動物的肝微粒體或同源重組人工酶進行體外藥物代謝研究［21-22］，但不同種屬間CYP2A6 酶蛋白表達水平及酶活性差異尚不明確。所以，在體外條件下探究不同來源活化體系中的CYP2A6 酶活對卷煙煙氣的體外毒理學研究具有重要意義。因此，本研究中選取CYP2A6 重組酶、不同來源的人肝微粒體及藥代動力學實驗中常用的動物肝微粒體等進行CYP2A6 酶體外活性研究，以期為煙堿的體外毒理學評價提供數據支撐。圖1 煙堿主要代謝通路：由CYP2A6 及醛氧化酶依次
煙草科技 2019年7期2019-08-13
- 白及有效成分Militarine在肝微粒體中的體外代謝途徑及其酶促動力學特征Δ
所[10］。肝微粒體是應用最為廣泛的一個體外代謝模型，通過其獲得的藥物體外代謝特征可在一定程度上反映藥物的體內代謝特性[11］。目前，關于Militarine的體內過程研究鮮見報道，其吸收、分布、代謝和排泄特征尚不明確。因此，本課題組采用肝微粒體體外孵育法對Militarine進行代謝研究，通過超高效液相色譜-四極桿-飛行時間質譜聯用技術對Militarine的代謝產物進行結構鑒定，推測其在肝微粒體中可能的代謝途徑；并通過超高效液相色譜-三重四極桿串聯質譜
中國藥房 2019年10期2019-05-31
- N-(4-丁酸甲酯)-4-羥基-1,8-萘酰亞胺葡萄糖醛酸苷的高效制備
。本文利用牛肝微粒體能夠高效催化NMHN發生葡萄糖醛酸化反應生成NMHNG,同時借助固相萃取柱實現了NMHNG的高效分離及純化，獲得了純度大于98%的代謝產物。1 實驗部分1.1 試劑與儀器Bruker ARX 500 MHz 超導核磁共振波譜儀(瑞士Brucker公司);UPLC-UV-ESI-MS 高效液相色譜-串聯質譜儀(日本島津公司); Allegra X-30R高速冷凍離心機(美國克曼庫爾特有限公司)；MS-100恒溫混勻儀(杭州奧盛儀器有限公司
山東化工 2019年6期2019-04-15
- N-正丁基-4-羥基-1,8-萘酰亞胺葡萄糖醛酸苷的高效制備
不同種屬動物肝微粒體催化NBHN發生葡萄糖醛酸化反應的轉化效率,篩選出能夠高效轉化NBHN的酶源。 同時,應用固相陰離子交換柱實現了目標產物的特異性收集、高效分離及純化，并對其結構進行了表征，獲得了純度大于95%的NBHN葡萄糖醛酸苷產物單體。1 實驗部分1.1 試劑尿苷二磷酸葡萄糖醛酸鈉鹽(UDPGA)、聚氧乙烯十六烷基醚(Brij58)、MgCl2和三羥甲基氨基甲烷(Tris)均購自Sigma公司; 人肝微粒體(HLM)、食蟹猴肝微粒體(CyLM)、大
山東化工 2019年6期2019-04-15
- UFLC-MS/MS研究胡椒堿在不同種屬肝微粒體中的代謝穩定性和代謝表型
p在不同種屬肝微粒體中的代謝穩定性及在人體肝微粒體中的代謝產物，采用選擇性化學抑制法考察Pip在人肝微粒體中的代謝表型，為深入了解Pip的代謝特征和臨床合理用藥提供依據。1 實驗材料超快速液相色譜(UFLC)系統包括：SIL-30AC 自動進樣器，LC-30AD 高壓輸液泵，CBM-20A 連接器，CTO-20AC柱溫箱(日本島津公司)、Acquity UPLC?Hss C18(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)；AB SCIEX QTRAP550
天然產物研究與開發 2019年2期2019-03-08
- 微粒體在缺血性卒中的作用
因型5種類型。微粒體是由活化細胞所釋放的一種囊泡，目前多項研究認為微粒體可以作為缺血性卒中有前景的生物標志物之一。1 微粒體來源微粒體是不同類型的細胞活化、損傷或凋亡時從其表面脫落下來直徑為100～1000 nm之間的富含脂質的囊泡顆粒[3]。微粒體含有母體細胞來源的各種蛋白質、脂質、信使RNA（messenger RNA，mRNA）和微小核糖核酸（micro RNA，miRNA）等生物活性物質，在細胞間信號傳導及相互作用過程中起著媒介作用，并參與了內皮細
中國卒中雜志 2019年6期2019-01-03
- 夏枯草顆粒在橋本甲狀腺炎相關神經系統損害患者中的應用效果探究
點，而抗甲狀腺微粒體抗體、Th1類細胞因子作為在本病患者中表達異常的指標，對其表達的調控也是研究的重點[1]。本研究就夏枯草顆粒在橋本甲狀腺炎相關神經系統損害患者中的應用效果進行觀察，結果總結如下。1 資料與方法1.1 臨床資料選取2015年3月—2017年10月的46例橋本甲狀腺炎相關神經系統損害患者為研究對象，所有患者隨機分為對照組（常規治療組）23例和觀察組（常規治療加夏枯草顆粒組）23例。對照組中男6例，女17例，年齡為29～65歲，平均為（38.
中國衛生標準管理 2018年18期2018-10-16
- 組蛋白去乙?；敢种苿㏒25的代謝穩定性和表型研究
要影響因素。肝微粒體是藥物代謝的主要場所[7]，在本研究中，我們將通過體外構建的包括人在內的不同種屬肝線粒體系統研究S25藥物的代謝特征，為該藥的進一步基礎和臨床研究奠定基礎。1 材料與方法1.1 試劑與儀器S25：由本實驗室合成；大鼠肝微粒體(RLM)、人肝微粒體(HLM)、犬肝微粒體(DLM)、猴肝微粒體(MLM)、小鼠肝微粒體(MouLM)購自武漢普萊特生物醫藥技術有限公司，于-80 °C冷凍保存；NADPH發生系統：A液、B液，購自武漢普萊特生物醫
川北醫學院學報 2018年2期2018-05-16
- 基于高效液相色譜-串級質譜法研究肝微粒體中T-2毒素代謝的種屬差異性
級質譜法研究肝微粒體中T-2毒素代謝的種屬差異性林妮妮，郭 磊，陳 佳，謝劍煒（軍事醫學科學院毒物藥物研究所毒物分析實驗室，抗毒藥物與毒理學國家重點實驗室，北京 100850）目的比較T-2毒素在不同種屬動物肝微粒體中代謝的差異性。方法將T-2毒素與小鼠、大鼠、比格犬、猴和人肝微粒體37℃孵育不同時間，孵育液經蛋白沉淀后采用高效液相色譜-質譜法檢測，比較T-2毒素在不同種屬動物中代謝動力學參數及代謝產物生成量的差異。結果T-2毒素在人肝微粒體中半衰期（t1
中國藥理學與毒理學雜志 2017年7期2017-12-08
- 鉤吻素子在人和豬、大鼠、猴、犬肝微粒體的酶促動力學及CYP450酶亞型分析
大鼠、猴、犬肝微粒體的酶促動力學及CYP450酶亞型分析魏文增1,2，黃慧玲1，葉麗香3， 林 菁1,3， 俞昌喜1目的 研究和比較鉤吻素子(KM)在人與各種實驗動物肝微粒體體外代謝的酶促動力學及選擇性CYP450酶抑制劑對其代謝的影響。 方法 采用優化的反應體系和UPLC檢測方法，測定系列濃度的KM與各種屬肝微粒體孵育的降解曲線，以底物消除法計算酶動力學參數；共孵育方法考察選擇性CYP450酶抑制劑對KM在各種屬肝微粒體代謝的影響。 結果 在人肝微粒體，
福建醫科大學學報 2017年2期2017-08-07
- 齊墩果酸在人及其他種屬肝微粒體CYP450中代謝的差異研究
人及其他種屬肝微粒體CYP450中代謝的差異研究邱 敏，周 林，徐亞沙，魯艷柳，陸遠富(遵義醫學院 基礎藥理教育部重點實驗室，貴州 遵義 563099)目的 比較齊墩果酸在人和其他種屬肝微粒體CYP450酶中的代謝差異。方法 采用基于多重質量虧損(Multiple mass defect filter, MMDF)的四極桿-靜電場軌道阱高分辨質譜色譜聯用儀，分析齊墩果酸經人及昆明小鼠、C57小鼠、SD大鼠、豬、牛、羊、兔肝微粒體體外代謝的產物及種屬差異。利
遵義醫科大學學報 2017年1期2017-04-25
- 羥基化多溴聯苯醚(OH-PBDEs)在小鼠肝臟微粒體的體外代謝及對CYP450酶活性的影響
s)在小鼠肝臟微粒體的體外代謝及對CYP450酶活性的影響張易曦1,2，張圣虎2,*，吳永貴1，劉濟寧2，石利利21. 貴州大學 資源與環境工程學院，貴陽 550025 2. 環境保護部南京環境科學研究所，南京 210042羥基化多溴聯苯醚(OH-PBDEs)是一類具有內分泌干擾效應的酚類化合物，生物毒性要高于母體多溴聯苯醚(PBDEs)，研究OH-PBDEs的體外代謝行為對于理解其在生物體內的富集轉化具有重要意義。以小鼠肝臟微粒體作為研究對象，考察了3-
生態毒理學報 2016年2期2016-12-12
- 異佛司可林在人肝微粒體與人工胃腸液中的代謝與降解
佛司可林在人肝微粒體與人工胃腸液中的代謝與降解汪亞勤1， 殷嘉珺1， 毛玉昌2， 胡卓漢1，2*， 黃建明1* （1.復旦大學藥學院，上海201203；2.瑞德肝臟疾病研究 ［上海］有限公司，上海201203）目的 研究異佛司可林在人肝微粒體及人工胃腸液中的代謝與降解動力學。方法 將異佛司可林與人肝微粒體、人工胃液、人工腸液進行體外共孵育，采用高效液相色譜-串聯質譜 （HPLC-MS/MS）法測定人肝微粒體孵育體系中異佛司可林的剩余濃度，高效液相色譜-紫外
中成藥 2016年6期2016-09-06
- 血漿內皮微粒水平與腔隙性腦梗死患者腦微出血的關系研究
腔隙性；內皮；微粒體；腦微出血胡偉，劉丹榮.血漿內皮微粒水平與腔隙性腦梗死患者腦微出血的關系研究[J].實用心腦肺血管病雜志，2016，24(7)：36-40.[www.syxnf.net]HU W，LIU D R.Relationship between plasma endothelial microparticle level and cerebral microbleeds in patients with lacunar infarction[J
實用心腦肺血管病雜志 2016年7期2016-08-16
- 高效液相色譜法研究大鼠肝微粒體中布地奈德異構體的酶促反應動力學
譜法研究大鼠肝微粒體中布地奈德異構體的酶促反應動力學劉艷雙1，郭煒2*(1.河北省永清縣人民醫院兒科，河北 永清 065600；2.河北醫科大學藥學院臨床藥學與藥事管理學教研室，河北 石家莊 050017)[摘要]目的研究布地奈德2個差向異構體在大鼠肝微粒體孵育體系中的酶促反應動力學。方法超速離心法制備大鼠肝微粒體，采用高效液相色譜法測定布地奈德2個差向異構體在大鼠肝微粒體孵育體系中的濃度。結果布地奈德與大鼠肝微粒體孵育后，2個差向異構體的代謝存在差異，在
河北醫科大學學報 2016年5期2016-08-15
- 參芎葡萄糖注射液對肝臟6種亞型微粒體細胞色素P450酶的抑制作用*
對肝臟6種亞型微粒體細胞色素P450酶的抑制作用*孫佳1,2,3,4, 陸苑2,3, 潘潔3, 鄭林2,3, 黃勇2,3, 王永林2,3, 李勇軍1,3**(1.貴州醫科大學 民族藥與中藥開發應用教育部工程研究中心， 貴州 貴陽550004； 2.貴州醫科大學 貴州省藥物制劑重點實驗室， 貴州 貴陽550004； 3.貴州醫科大學 藥學院， 貴州 貴陽550004； 4.貴州醫科大學 國家苗藥工程技術研究中心， 貴州 貴陽550004)[摘要]目的： 考察
貴州醫科大學學報 2016年7期2016-08-01
- 牛血清白蛋白對人肝微粒體UGT2B7代謝齊多夫定的影響
清白蛋白對人肝微粒體UGT2B7代謝齊多夫定的影響汪洋 高潔 喬海靈 (鄭州大學醫學院臨床藥理研究所 河南鄭州 450052)【摘要】目的 研究牛血清白蛋白對人肝微粒體尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶(uridine-5'-diphosphate glucuronosyl-transferase,UGT)2B7代謝活性的影響?方法 采用差速離心法制備人肝微粒體,以齊多夫定(3'-疊氮-3'-脫氧胸苷)為探針,考察人肝微粒體孵育體系中UGT2B7代謝活性,采用反相
河南醫學研究 2016年1期2016-03-18
- 雙環醇對二甲雙胍、非諾貝特、環孢素A、他克莫司藥物體外代謝的影響
);(2)人肝微粒體購自上海瑞德肝臟疾病研究有限公司，產品編號LM-H-010M，批號FZTO;(3)實驗動物:雄性SD 大鼠，200 ～220 g，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司。動物許可證編號:SCXK(京)2012-0001;(4)儀器與設備:GL-88B 漩渦混合器(江蘇海門麒麟醫用儀器廠)，HZS-H水浴振蕩器(哈爾濱市東明醫療儀器廠制造)，AR1140/C 精密天平(美國OHAUS 公司)，Thermo Biofuge Prime R 低
胃腸病學和肝病學雜志 2015年12期2015-12-31
- 配置環境對鹽酸氨溴索注射液與溶媒配伍后不溶性微粒的影響
鍵詞]氨溴索；微粒體；環境doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2015.07.017靜脈輸注給藥是臨床給藥途徑中使用最普遍的給藥方式之一，是治療患者疾病的重要手段。在靜脈輸注給藥過程中，由于輸液質量引起的不良反應越來越引起醫護人員的重視。其中，不溶性微粒是引起不良反應、導致輸液安全事件發生的重要因素[1]。不溶性微粒主要來自注射劑本身和復配過程兩方面[2-4]，其通過輸液進入人體后，可能對人體造成難以發現和潛在的嚴重危害[5-7]。2
河北醫科大學學報 2015年7期2015-12-28
- 重組肝CYP3A4與CYP3A29細胞微粒體藥物代謝動力學比較
P3A29細胞微粒體藥物代謝動力學比較薛正楷1，2，魏泓2(1.瀘州職業技術學院生物與醫學工程研究所，瀘州 646005；2.第三軍醫大學實驗動物中心，重慶 400038)目的 比較巴馬小型豬CYP3A29和人CYP3A4穩定表達重組肝癌細胞株微粒體的藥物代謝特征，在分子水平為巴馬小型豬作為臨床前藥物代謝實驗動物提供科學依據。方法 以CYP3A特異性代謝底物硝苯地平、睪酮及其抑制藥酮康唑為探針藥物，將探針藥物與重組CYP3A4、CYP3A29細胞微粒體在優
醫藥導報 2015年1期2015-12-09
- 補骨脂素和異補骨脂素在大鼠和人肝微粒體的酶促動力學
素在大鼠和人肝微粒體的酶促動力學陽海鷹，鐘玉環，陳琳，李樺，莊笑梅 （抗毒藥物與毒理學國家重點實驗室，軍事醫學科學院毒物藥物研究所，北京 100850）目的 研究中藥有效成分補骨脂素和異補骨脂素的細胞色素P450（CYP）酶促動力學特征，比較其結構和種屬差異，為體內藥代動力學特征的預測提供科學依據。方法 建立補骨脂素和異補骨脂素的液相色譜串聯質譜（LC-MS/MS）檢測方法，在優化人和大鼠肝微粒體孵育體系和評價體外代謝穩定性的基礎上，進行了代謝穩定性和酶促
中國藥理學與毒理學雜志 2015年6期2015-08-31
- 雷公藤多苷對大鼠與人肝微粒體CYP3A酶活性的體外抑制作用Δ
內酯醇對大鼠肝微粒體體外蛋白表達的研究[2-3]，以及雷公藤活性成分對大鼠體內CYP活性的影響[4]，不足以說明雷公藤多苷對CYP的抑制作用。經國內文獻檢索尚未見有關雷公藤多苷對大鼠和人肝微粒體體外代謝影響的相關報道。因此，本課題組進一步開展了雷公藤多苷對大鼠和人肝微粒體CYP3A代謝活性影響的研究。本課題組分別建立大鼠和人肝微粒體體外代謝模型以及1′-羥基咪達唑侖含量測定的液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）檢測方法，以咪達唑侖作為代謝底物，研究雷公藤
中國藥房 2015年4期2015-03-09
- 大黃5種蒽醌類成分在大鼠肝微粒體中的代謝及酶促反應動力學
類成分在大鼠肝微粒體中的代謝及酶促反應動力學馮素香1，2， 王蒙蒙1， 吳兆宇1， 李 先1， 郝 蕊1， 徐艷華1（1.河南中醫學院，河南鄭州450046；2.呼吸疾病診療與新藥研發河南省協同創新中心，河南鄭州450046）研究大黃5種蒽醌類成分在大鼠肝微粒體中的代謝特征和參與代謝的細胞色素P450亞型.超速離心法制備大鼠肝微粒體，采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）測定孵育液中大黃5種蒽醌類成分的質量濃度，研究大黃蒽醌類成分的酶促動力學，推導藥物米氏
暨南大學學報（自然科學與醫學版） 2015年5期2015-03-01
- 黃連堿在人肝微粒體中的代謝
］黃連堿在人肝微粒體中的代謝劉 倩1， 陳龍龍1， 馬雙成2， 張祖艷1， 李云華1， 錢 勇3， 顧 軍4， 謝天培3*（1.上海滬豐生物科技有限公司，上海200433；2.中國食品藥品檢定研究院，北京100050；3.上海詩丹德生物技術有限公司，上海201203；4.美國紐約州衛生部Wadsworth醫學研究中心，奧爾巴尼，紐約12201）目的研究黃連堿在人肝微粒體中的代謝情況。方法通過酶促動力學實驗計算酶促動力學參數，通過檢測CYP 4 5 0亞酶專
中成藥 2015年4期2015-01-17
- 白皮杉醇苷在大鼠體內外的葡萄糖醛酸結合代謝研究
4.2 大鼠肝微粒體制備與表征大鼠于實驗前禁食12 h，自由飲水。斷頭處死后，迅速取出肝臟，稱重，剪碎，置冰水浴中，加入適量蔗糖溶液(0.25 mol/L)，混勻，4 ℃下離心(11500 rpm)20 min 得肝S9 組分，經進一步的鈣沉淀法制備肝細胞液和肝微粒體［11］，于-80 ℃下分裝保存，備用?？捡R斯亮藍染色法測定所制肝微粒體的蛋白濃度為(12.8 ± 0.16)mg/mL(n=6);肝微粒體UGTs 酶活力以HPLC-UV 法測定4-NP 葡
天然產物研究與開發 2015年5期2015-01-08
- HPLC-QTOF MS 和 MS/MS分析鑒定PF573228肝微粒體體外代謝產物
73228與肝微粒體體外代謝物，通過二級質譜MS/MS鑒定了PF573228的代謝產物的結構并推測了其代謝裂解途徑.1 實驗部分1.1 儀器及試劑高效液相色譜儀(Agilent 1200，美國)，四極桿飛行時間質譜儀(Agilent 6520 Q-TOF MS，美國)，超純水機(Molelement 1815a 摩爾元素型,上海摩勒科學儀器有限公司)，高速冷凍離心機(GL-20M, 上海盧湘儀離心機儀器有限公司)，色譜柱(ZORBAX Eclipse XD
中南民族大學學報（自然科學版） 2014年3期2014-08-06
- 吡非尼酮對大鼠肝細胞色素P450酶活性的影響
度法測定大鼠肝微粒體總酶、二甲基亞硝胺N-脫甲基酶(NDMA)、紅霉素N-脫甲基酶(ERD)的活性。SD大鼠56只,隨機分為溶酶對照組、肝藥酶誘導劑組、肝藥酶抑制劑組,乙醇誘導組、吡非尼酮低劑量組、中劑量組和高劑量組。溶酶對照組給予1%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na),誘導劑組0.5%地塞米松100 mg·kg-1,肝藥酶抑制劑組1%酮康唑40 mg·kg-1,吡非尼酮低、中、高劑量組為PF25,50,100mg·kg-1灌胃給藥,1日1次,連續6和12 d
醫藥導報 2014年6期2014-05-15
- 野百合堿在5 種肝微粒體中的體外代謝研究
經誘導的大鼠肝微粒體中野百合堿基本未發生代謝。Wang 等［7］發現，野百合堿在用地塞米松誘導的F344 雌性大鼠肝微粒體中的代謝產物—DHP、N-氧化野百合堿的形成速率比未經誘導的肝微粒體高兩倍。本實驗對野百合堿在不同肝微粒體體系的代謝進行了研究。圖1 DHP，DHR，DHH，野百合堿的結構1 儀器與試劑1.1 儀器 Agilent 1290 超高效液相-G6460 三重串聯四極桿質譜聯用儀;渦旋振蕩器(Vortex-5，江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司
中成藥 2014年8期2014-01-13
- 轉染及培養條件對外源性鈣離子ATP酶SERCA1a表達的影響
無法提取足夠的微粒體蛋白進行后續實驗。為尋找SERCA1a表達的最適條件，解決這類蛋白質獲取不足問題，本文通過比較COS1表達的外源性SERCA1a表達量及酶活性的檢測結果，對細胞培養溫度、時間、轉染試劑用量以及攜帶兔SERCA1a cDNA的p MT2質粒的轉染用量等可能影響SERCA1a表達的因素進行了評估。材料和方法1.一般材料非洲綠猴腎細胞COS1細胞購自ATCC。DMEM、FBS、Lipofactamine、plus reagent購自Invit
中國組織化學與細胞化學雜志 2014年3期2014-01-04
- 人肝微粒體中CYP2B6對氯胺酮代謝的催化作用
保存備用。肝臟微粒體通過差速離心法制備，所有試劑及器械均需冰盒內預冷。1.2 孵育條件 同參考文獻［1］。1.3 樣品處理 加入10 μl內標布比卡因混勻，加入750 μl乙腈沉淀蛋白，振蕩混勻，10 800×g離心10 min，取上清50 μl進樣。采用高效液相色譜法(HPLC)測定各時點氯胺酮的濃度。與CYP2B6的特異底物丁氨苯丙酮和抑制劑奧芬那君作相關分析。熒光檢測波長為211 nm，流速1 ml·min－1，流動相:乙腈 ∶0.025 mol·L
中國藥理學通報 2013年11期2013-12-08
- 白藜蘆醇在大鼠肝微粒體中的代謝動力學研究
1.3.2 肝微粒體的制備動物末次給藥24h后斷頭處死動物，剖腹，用注射器吸取經冰浴冷卻的生理鹽水，經胸動脈或門靜脈注入肝臟，灌流，除去肝中血液。取出肝臟，采用鈣沉淀法［4］制備肝微粒體。以BCA法［5］測定肝微粒體的蛋白濃度。1.3.3 溫孵條件郭文安：從五院?！督逃龑W》到《教育學》(新編本)(王道俊、王漢瀾主編)再到《教育學》(第六版、第七版)(王道俊、郭文安主編)，我們經歷了一個從蒙昧到啟蒙，再發展到自覺求索的歷程。孵育體系總體積250μl，反應體系
湖北科技學院學報(醫學版) 2013年1期2013-11-09
- 濟泰片對人肝及Beagle犬肝中美沙酮代謝活性的影響
用。方法在人肝微粒體中加入濟泰片1.5～150 mg·L－1，CYP3A4抑制劑酮康唑及CYP2D6抑制劑奎尼丁，再加入美沙酮進行共孵育30 min。用美沙酮的代謝產物2-亞乙基-1，5-二甲基-3，3-二苯基吡咯烷(EDDP)的生成速率反映美沙酮的代謝活性，評價濟泰片對美沙酮的抑制作用。Beagle犬ig給予濟泰片0.1875，0.625和1.875 g·kg－1，每天1次，共36周后制備犬肝微粒體，在制備的犬肝微粒體中加入美沙酮進行共孵育30 min，
中國藥理學與毒理學雜志 2012年6期2012-01-16
- 補骨脂酚的體外肝微粒體代謝及代謝減毒作用的種屬比較
、比格犬和人肝微粒體研究了3個種屬微粒體對補骨脂酚HK-2細胞的減毒作用，以及補骨脂酚的體外肝代謝穩定性及代謝動力學，并比較了種屬間差異。1 材料與方法1.1藥品與試劑補骨脂酚購自南京澤朗醫藥科技有限公司，純度＞99%，批號為090427;丹參酮ⅡA(內標)購自中國藥品生物制品檢定所;♂ SD大鼠和比格犬肝微粒體、及♂人肝微粒體均購自北京慧智泰康醫藥技術有限公司，蛋白含量為20 g·L-1，批號:7MMC002;D/F12(DMEM ∶F12=1 ∶1)培
中國藥理學通報 2011年2期2011-05-29
- 細胞色素酶P450參與了雛雞和鵪鶉體內黃曲霉毒素B1的代謝
即雛雞和鵪鶉肝微粒體代謝物——黃曲霉毒素－8,9－環氧化物（AFBO）的生物活化過程。包括特定細胞色素P450酶抑制劑的使用和AFBO生產的典型基底物質活性間的關系。此外，酶的定性測定采用免疫印記技術。結果表明，雛雞和鵪鶉體內微粒體代謝物酶有CYP1A1、CYP1A2、CYP2A6和CYP3A4。CYP1A1和CYP2A6兩個菌種的活性和AFB1的生物活化過程緊密相關。研究證明了CYP2A6在AFB1的生物活化過程中的作用，免疫印跡結果顯示，CYP2A6和
飼料博覽 2011年2期2011-04-13
- 異育銀鯽各組織器官中細胞色素P450藥酶活性的比較
含量均以肝胰臟微粒體中最高,其次為腎、鰓、腸微粒體,肌肉中最低。以氨基比林N-脫甲基、紅霉素N-脫甲基、苯胺-4-羥化反應分別作為CYP2B、CYP3A和CYP2E的探針反應,測得氨基比林N-脫甲基酶(APD)及紅霉素N-脫甲基酶(ERND)活性在上述組織中分布差異性類似,均表現為肝胰臟微粒體中最高,分別為(1.668±0.104)、(0.941±0.061)nmol/(min·mg),其次為腎、鰓、腸微粒體,肌肉微粒體中最低,分別為(0.245± 0.0
大連海洋大學學報 2011年1期2011-03-17
- 雷公藤甲素單次及多次給藥對大鼠肝藥酶活性的影響Δ
2.2 大鼠肝微粒體的制備SD大鼠禁食不禁水16 h，將大鼠斷頭處死并置冰板上，快速摘除肝臟，自門靜脈注入0～4℃冰浴生理鹽水，沖洗肝臟至土黃色，再用生理鹽水將血水沖洗干凈。將肝組織剪碎，采用差速離心法制備大鼠肝微粒體。具體操作方法為：先將肝勻漿在4 ℃以9000 r·min-1離心30 min，取上層，4 ℃下100000 r·min-1離心60 min，下層粉紅色沉淀即為所需的肝微粒體；將沉淀物懸浮于含30%甘油的KCl-磷酸鹽緩沖液中，置于－80℃冰
中國藥房 2010年11期2010-05-22
- 細胞色素酶P450參與了雛雞和鵪鶉體內黃曲霉毒素B1的代謝
即雛雞和鵪鶉肝微粒體代謝物——黃曲霉毒素－8,9－環氧化物（AFBO）的生物活化過程。包括特定細胞色素P450酶抑制劑的使用和AFBO生產的典型基底物質活性間的關系。此外，酶的定性測定采用免疫印記技術。結果表明，雛雞和鵪鶉體內微粒體代謝物酶有CYP1A1,CYP1A2,CYP2A6,和CYP3A4。CYP1A1和CYP2A6兩個菌種的活性和AFB1的生物活化過程緊密相關。研究證明了CYP2A6在AFB1的生物活化過程中的作用，免疫印跡結果顯示，CYP2A6
飼料博覽 2010年11期2010-04-13