妊娠期高血壓疾病患者瘦素水平的變化及其意義

陜西省婦幼保健院(西安 710003) 賀譯平 劉娟弟 周 欣

妊娠期高血壓疾病患者瘦素水平的變化及其意義

陜西省婦幼保健院(西安 710003) 賀譯平 劉娟弟 周 欣

目的:研究瘦素在妊娠期高血壓疾病患者的表達及其臨床意義。方法:對60例妊娠期高血壓疾病患者,其中妊娠期高血壓組(20例)和子癇前期組(20例重度、20例輕度),正常妊娠組(20例),用 ELISA法分別測定分娩前以及分娩后1周母體靜脈血、臍靜脈血瘦素的濃度;采用免疫組織化學法檢測瘦素在胎盤中的定位和表達。結果:妊娠期子癇前期組的瘦素濃度明顯高于同期正常妊娠組,差異均有顯著意義(P＜0.05);分娩后1周后所有病例母體血漿瘦素水平急劇下降,接近正常未孕水平;子癇前期的臍靜脈血瘦素水平明顯高于妊娠期高血壓和正常組,差異有顯著性(P＜0.05);瘦素在胎盤絨毛合體滋養細胞、細胞滋養細胞、血管內皮細胞胞漿中均有表達;瘦素蛋白表達強度在正常妊娠、妊娠期高血壓、子癇前期依次上升,差異均有顯著意義(P＜0.05)。結論:妊娠期高血壓疾病患者隨著病情加重,瘦素水平逐步增加,可作為預示妊娠期高血壓疾病病情嚴重程度的敏感指標之一。

瘦素是肥胖基因的蛋白產物,主要是由脂肪細胞合成和分泌,參與機體的能量代謝。但近年來研究發現,除脂肪組織外,胎盤組織也可以分泌瘦素[1],瘦素與妊娠和生殖調節存在密切關系[2,3]。妊娠期高血壓疾病是妊娠期特發性疾病,其病因尚未明確。目前關于妊娠期高血壓疾病瘦素水平的研究報道不一[4～6],本研究采用放射免疫法檢測了 60例妊娠期高血壓疾病患者及 20例正常妊娠婦女分娩前后血清及臍血的瘦素水平,并用免疫組化方法檢測胎盤組織的瘦素水平,以探討妊娠期高血壓疾病患者血清瘦素水平的變化及其臨床意義。

對象與方法

1 研究對象 選擇2008年 7月至2009年5月在本院產科住院的妊娠期高血壓疾病患者 60例,其中妊娠期高血壓20例、輕度子癇前期 20例、重度子癇前期20例,診斷及分類標準參考全國統編教材第 6版《婦產科學》,孕周為35～ 41周。以 20例正常住院分娩產婦作為對照,其年齡、孕周、孕前體重指數均與妊娠期高血壓組相匹配。所有孕婦均為非肥胖初產、單胎。既往無糖尿病、心臟病及腎病史,無胎膜早破、早產和感染征象,無吸煙史。

2 方 法 收集產婦的年齡、體重、身高,同時計算體重指數(PI)。所有病例均于分娩前空腹抽取肘靜脈血2m l,產時抽取臍血2m l,分娩后1周空腹抽取肘靜脈血2m l,2400rpm離心10m in,取血清置-80℃冰箱保存待測。胎盤娩出后立即無菌狀態下取胎盤中央母體面 1cm×1 cm× 1cm的胎盤組織,用無菌 PBS緩沖液沖洗標本數次,立即置入10% 甲醛溶液中固定12h后,常規石蠟包埋。

3 結果判定 陽性表達水平以綜合計分法進行半定量分析。隨機選取5個400倍視野計數滋養細胞總數和陽性細胞數,得出陽性細胞百分比并計分。無陽性細胞為0分,陽性細胞占 1%～ 25%為 1分,26%～49%為2分,≥50%為3分。根據多數細胞的著色強度進行強度計分。細胞內無棕黃色顆?；虺示鶆蛞恢碌牡S色,與背景一致為 0分,胞漿內可見淡黃色顆粒明顯高于背景為 1分,胞漿內可見較深棕色顆粒為2分,胞漿內可見大量深棕色顆粒為 3分。2種計分方法相加,0～ 1分為陰性 (-),2為 (+ ),3～ 4分為 （),5～ 6分為 ()。

結 果

1 不同組別瘦素水平比較 見表1。正常孕婦產前體內瘦素水平與各妊娠期高血壓疾病組孕婦產前體內瘦素水平存在顯著性差異(P＜0.05),妊娠期高血壓疾病組明顯高于正常孕婦,且隨妊娠期高血壓疾病的加重,體內瘦素水平亦增加,各組兩兩比較有顯著性差異(P＜0.05)。重度子癇前期、輕度子癇前期的臍靜脈血瘦素水平組間差異有顯著性,且均高于妊娠期高血壓和正常組,差異有顯著性(P＜0.05),后兩組水平無明顯差異(P＞0.05)。產后1周各組間產婦瘦素水平無顯著性差異。

表 1 不同組別瘦素水平比較(±s,μg/L)

表 1 不同組別瘦素水平比較(±s,μg/L)

組 別 分娩前 臍血 分娩后正常組 26.12± 3.55 6.32± 3.35 15.21± 4.56妊娠期高血壓 28.50±5.03 6.45± 3.61 16.35±4.64輕度子癇前期 33.07± 7.82 7.25± 4.02 17.13±5.28重度子癇前期 37.14± 8.35 8.33± 4.33 17.53±5.46

2 不同組別胎盤瘦素表達水平比較 見表2。所有觀察病例胎盤絨毛合體滋養細胞、細胞滋養細胞和血管內皮細胞的胞漿內均有不同程度瘦素蛋白表達,但絨毛血管內皮細胞以及間質細胞中均無陽性染色。瘦素在胎盤中由弱至強的表達順序分別為:正常妊娠、妊娠期高血壓、輕度子癇前期、重度子癇前期。妊娠期高血壓與正常妊娠比較,差異有顯著性(P＜0.05);子癇前期組與正常妊娠組比較,差異有顯著性(P＜0.05);子癇前期組與妊娠期高血壓組比較,差異有顯著性(P ＜0.05)。

表 2 不同組別胎盤瘦素表達水平比較

討 論

瘦素(Lep)是由OB基因編碼,主要由脂肪細胞分泌的蛋白質激素,在體內具有廣泛的生物學效應。除可調節攝食活動,影響脂質及糖類代謝外,還可通過激活交感神經參與血壓的調節與內環境的穩定[7]。最初認為Lep都由白色脂肪組織表達,以后研究發現,Lep在下丘腦、垂體、肺等多種組織都有表達。近年來研究表明胎盤參與 Lep的合成和分泌,是妊娠期 Lep的重要來源之一。動物實驗發現,當給實驗動物注射大劑量瘦素后,實驗動物心率加快,血壓升高;并且發現高血壓患者血清瘦素水平和血漿腎素活性及血漿醛固酮濃度有關[8]。在妊娠期高血壓疾病時,臍血及母血中瘦素含量都明顯升高,并且隨著病情的加重而增長,因此,瘦素分泌的增多與血壓的升高有直接關系。

瘦素介導妊娠期高血壓的發病機制,具體可能包括下列途徑:①交感神經系統(SNS):目前認為 SNS和脂肪組織之間存在一個反饋環路,瘦素就是正反饋環節上的信號之一;②腎素-血管緊張素系統(RAS):瘦素和 RAS通過影響人體 SNS、水電解質代謝以及血管重塑來參與血壓的調控。血清瘦素水平、血管緊張素水平、平均動脈壓三者之間呈正相關,但瘦素如何影響RAS的機制尚不清楚;③瘦素影響胰島素敏感性:高胰島素血癥和胰島素抵抗是引起高血壓病的危險因素,其機制是多方面的。瘦素可能在胰島素抵抗性高血壓的發生、發展過程中扮演了重要的角色;④瘦素促進血管內皮細胞增生:瘦素在 10～ 40 ng/L劑量范圍內可引起人臍靜脈血管內皮細胞增生,且金屬間質蛋白酶(MMPs)MMP-2、MMP-9、金屬蛋白酶的組織抑制因子(TIMPs)TIMP-1及 TIMP-2的表達與瘦素水平呈劑量正相關關系。

本研究結果顯示,子癇前期孕婦血清及臍血瘦素水平明顯高于正常孕婦,據此推測瘦素與妊娠期高血壓的發生發展有關,不同程度的妊高征孕婦血漿瘦素水平有明顯差異,提示瘦素與妊高征的嚴重程度有關;產后 1周各組間產婦瘦素水平無顯著性差異,這說明妊高癥患者的瘦素水平增高主要與胎盤來源的瘦素增加有關,胎盤功能異常是妊高癥發病的主要原因;子癇前期患者胎盤組織瘦素表達與正常孕婦胎盤瘦素表達部位相同,但子癇孕婦胎盤瘦素表達水平顯著高于正常妊娠晚期孕婦,這提示子癇前期血清中升高的瘦素主要來源于胎盤組織,其可能參與了子癇前期的發病。因此,血清瘦素水平可作為監測妊娠期高血壓疾病嚴重程度的臨床指標。

[1] Masuzaki H,Ogawa Y,Sagaw a N,et al.Nonadipose tissue prduction of leptin:leptin as a novel p lacentderivad hormone in humans[J].Nature,1996,380:677-679.

[2] Grosfeld A,Turban S,Andre J,et al.Transcrip tional effect o f h ypoxia on p lacental lep tin[J].FEBS Lett,2001,502(3):122-126.

[3] Linnemann K, Malek A, Schneider H,et al.Physiological and patho logical regulation of feto /p lacenta/maternal lep tin exp ression[J].Biolchem Soc Tran,2002,20(p t2):86-90.

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[5] M ise H,Sagawa N,Matsumoto T,eta l.Augmented p lacental p roduction o f lep tin in p reeclam psia:possible invo lvement o f p lacental hypoxia[J].J Clin Endoc rinol Metab,1998,83:3225-3229.

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[7] Mise H,Sagawa N,Matsunoto T,et al.Augmented p lacental p roduction o f lep tin in p reeclampsia:possible invo lvement of p lacenta lhypoxia[J].JClin Exdoc rinol Metab,1998,83(9):3225-3229.

[8] 胡 坤,嚴亞迎,高英敏,等.妊高征患者血清瘦素水平與血壓的相關性研究 [J].實用醫學雜志,2003,19(2):137.

Change and its signifiance of leptin level in PIH patients

Shaanxi Maternity and Child Care Centers(Xi’an 710003) He Yiping Liu Juandi Zhou Xin

Objective:To investigate the change and its signifiance of leptin level in PIH patients.Methods:The materna l p lasma samples o f 60 PIH p regnant w omen and 20 norma l p regnant w omen w ere obtained before and 7 days after delivery.And the umbilical p lasma samples o f them also w ere obtained a fter delivery.The level o f lep tin w as valued by enzyme-linked immunoradioassay technique.The correlativeanalysis between the levels of serum lep tin w as performed.And the expression and location of leptin in placenta w ere exp lored by immunohistochemistry(SP).Based on pregnancy outcomes,the subjects were divided into healthy norma l pregnant group(20 cases),gestationa l hypertension group(20 cases)and p reeclam ptic group(20 severe and 20mild).Resu lts:The levels o fmaternal plasma lep tin in p reeclampsia were significantly higher than those in healthy normal pregnant group at the same stages(P＜0.05,respectively),but no change existed betw een gestational hypertension and norma l pregnant group(P＞ 0.05,respectively).The levels of maternal p lasma leptin rapid ly dropped into the levels of non-pregnancy on all subjects after delivery.The levels of umbilical blood leptin in p reeclampsia w ere significantly higher than those in hea lthy normal pregnant group.The location of lep tin in placentas was existed in the cy toplasm o f villous syneytiotrophob last,cy totrophoblast and vascu lar endothelial cells.The expressional intensions of leptin protein w ere higherthan in gestationalh ypertension(P＜0.05,respectively),and the intensions in gestational hypertension group w ere higher than those in healthy norma l p regnancy group by turn(P＜0.05,respectively).Conclusion: The lep tin levels in PIH patients are higer than those in normal pregnaney,and related to the severity of PIH.The level of leptin can be a clinica marker of the degree o f preeclampsia.

Hypertension,pregnancy-induced Pre-eclam psia Lep tin

高血壓,妊娠性 先兆子癇 瘦素

R714.24

A

1000-7377(2010)02-0174-03

(收稿:2009-09-25)

·短篇論著·