高效液相色譜法測定腎炎解熱顆粒中橙皮苷含量

賓 馳

(廣西壯族自治區浦北縣人民醫院，廣西 欽州 535300)

腎炎解熱顆粒由白茅根、連翹、荊芥、杏仁(炒)、陳皮等14味藥材制成，具有疏解風熱、宣肺利水功效，臨床上用于急性腎炎的治療[1]。筆者參考相關文獻[2-3]，用高效液相色譜法測定腎炎解熱顆粒中橙皮苷含量，以控制該制劑的質量，現報道如下。

1 儀器與試藥

LC-10 ATVP型高效液相色譜儀(日本島津);SPD-20AVP型紫外檢測器;KQ-100 DB型數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。橙皮苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為110721-200211);腎炎解熱顆粒(吉林康福藥業有限公司，批號分別為061101，061102，061103);甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱:Hypersil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:甲醇-水-醋酸(40∶56∶4);檢測波長:283 nm;流速:1.0 mL/min;柱溫:(30.0±1)℃;進樣量:20 μL;理論板數按橙皮苷計應不低于2000。在上述色譜條件下，保留時間約12 min，橙皮苷峰與其他組分峰能達到基線分離，陰性對照品溶液在與橙皮苷對照品相應位置上無色譜峰出現，表明陰性對照品對測定結果無影響(圖1)。

2.2 溶液制備

精密稱取橙皮苷對照品適量，置棕色量瓶中，加甲醇制成10 μg/mL的溶液，即得對照品溶液。取裝量差異項下的本品內容物，研細，混勻，精密稱定1.0 g，置50 mL棕色量瓶中，加甲醇約40 mL，超聲處理20 min(功率100 W，頻率40 kHz)，取出，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，靜置，用0.45 μm微孔濾膜過濾，取續濾液，即得供試品溶液。按處方比例及制備工藝，配制不含陳皮的陰性對照品，并按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

線性關系考察:配制質量濃度為16.5 μg/mL的對照品溶液，分別精密吸取 1.0，2.0，4.0，6.0，8.0 mL 至 10 mL 棕色量瓶中，用甲醇定容。分別精密吸取上述溶液各20 μL進樣，以橙皮苷對照品進樣量為橫坐標、峰面積積分值為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程 Y=2.444×106X+451.059，r=0.9999(n=5)。結果表明，橙皮苷對照品進樣量在0.033～0.264 μg范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗:取同一對照品溶液，重復進樣6次，測得橙皮苷平均峰面積為323658，RSD為0.18%(n=6)，表明精密度良好。

重現性試驗:按擬訂的方法取同一批(批號為061101)樣品，平行制備并測定6次供試品溶液。結果橙皮苷平均含量為每袋2.9647 mg，RSD=0.44%(n=6)。

穩定性試驗:取同一批(批號為061101)樣品適量，按供試品溶液制備方法制備溶液，分別放置0，1，3，6，10 h并測定。結果平均峰面積為385412，RSD=0.79%(n=5)，表明供試品溶液在10 h內穩定。

加樣回收試驗:精密稱取已知含量的同一批樣品粉末6份各1.0 g，分別加入質量濃度為0.125 g/L的橙皮苷對照品溶液1.0，1.5，2.0 mL，按供試品溶液制備方法制備供試液，測定含量，計算回收率，結果見表1。

表1 橙皮苷加樣回收試驗結果(n=6)

2.4 樣品含量測定

取3批樣品，按供試品溶液制備方法制備供試液，測定樣品的橙皮苷含量，結果批號為061101，061102，061103的3批樣品中，平均每袋含橙皮苷 2.9647，3.1205，3.0566 mg(n=3)。

3 討論

采用高效液相色譜法測定腎炎解熱顆粒中橙皮苷的含量，方法簡便快捷、專屬性強，可用于該制劑的質量控制。

[1]WS3-013(Z-02)-94(Z)，衛生部藥品標準[S].

[2]龐小雄，梁松慶，鐘兆健，等.HPLC法測定拈痛丸中橙皮苷的含量[J].中藥材，2007，30(6):734-735.