鹽酸羅沙替丁醋酸酯脈沖控釋微丸的研制

廖 鵬，陳燕忠，呂竹芬，鐘 龍（廣東藥學院，廣東省藥物新劑型重點實驗室，廣州市 510006）

鹽酸羅沙替丁醋酸酯脈沖控釋微丸的研制

廖 鵬＊，陳燕忠#，呂竹芬，鐘 龍（廣東藥學院，廣東省藥物新劑型重點實驗室，廣州市 510006）

目的：制備鹽酸羅沙替丁脈沖控釋微丸（ROXPCP）。方法：取空白丸芯分別以含藥層、溶脹層（含交聯羧甲基纖維素鈉）和控釋層（含乙基纖維素水分散體）順序包衣制備ROXPCP，通過考察不同類型空白丸芯、溶脹層材料及溶脹層與控釋層的不同包衣增重對藥物釋放的影響來優選工藝，并進行處方驗證試驗。結果：各考察因素均對藥物的釋放影響顯著。優選工藝結果為：空白丸芯采用蔗糖型，溶脹層材料采用交聯羧甲基纖維素鈉，溶脹層和控釋層包衣增重分別為15%、24%。以此制備的微丸時滯時間為4h左右，時滯后4h內累積釋藥百分率達到80%。結論：所制備的ROXPCP具有體外脈沖控釋作用。

鹽酸羅沙替丁醋酸酯；脈沖控釋微丸；制備；包衣；藥物釋放

有關時辰生物學的研究[1]表明，人體內部幾乎所有的機能，都具有以24h為周期的節律性變化，人體機能的時辰節律性，使許多疾病的發作也存在著明顯的周期節律變化，消化性潰瘍就是發病規律呈現明顯時辰性的一種多發病。研究[2]表明，人體胃酸分泌從中午開始緩慢升高，至晚上20點左右急劇升高，22點左右形成高峰，抑制此時胃酸分泌能顯著提高臨床治療胃及十二指腸潰瘍的效果。鹽酸羅沙替丁醋酸酯（Roxatidine aidcetate hydrochlore，ROX）是繼雷尼替丁、法莫替丁等之后開發的又一種H2受體的選擇性拮抗藥，它能阻滯胃黏膜壁細胞組胺H2受體而顯示持續的胃酸分泌抑制作用，同時ROX還具有黏膜保護作用，是目前治療消化性胃潰瘍病較為理想的藥物[3，4]。ROX在國內使用的劑型較少，目前上市的只有普通片和緩釋膠囊，其脈沖制劑的研究國內尚未見文獻報道。本試驗設計制備了鹽酸羅沙替丁醋酸酯脈沖控釋微丸（ROXPCP），其可在早上服用，并在晚上胃潰瘍高發期起效，以達到時辰治療的目的，為ROX新劑型的開發奠定試驗基礎。

1 儀器與試藥

Aeromatic流化床包衣機（德國NIRO公司）；BS224S精密分析天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；Ultimate 3000高效液相色譜儀（美國戴安公司）；KQ-300VDE雙頻數控超聲波清洗器（昆山市舒美超聲儀器有限公司）；ZRS-8G智能溶出儀（天大天發科技有限公司）。

ROX原料（常州龍城藥業有限公司，批號：20081002，純度：99.7%）；ROX工作對照品（自制，批號：090301，純度：99.8%）；空白丸芯（杭州高成生物營養技術有限公司）；ROXPCP（自制，批號：091108、091110、091112，規格：每粒0.4g）；低取代羥丙基纖維素（L-HPC，湖州展望化學藥業有限公司）；羥丙基甲基纖維素（HPMC-E3）、乙基纖維素水分散體（Surelease）均由上海Colorcon輔料有限公司提供；交聯羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）、交聯羧甲基淀粉鈉（CCMS-Na）均由日本旭化成工業株式會社提供；交聯聚維酮（PVPP，美國國際特品公司）；乙腈為色譜純，其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 含量測定方法的建立

2.1.1 色譜條件。色譜柱：DIONEX-Acclaim C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：0.3%磷酸鹽緩沖液（用三乙胺調節pH值至6.2）-乙腈（78∶22）；流速：1.0mL·min－1；檢測波長275nm；進樣量20μL。取ROX工作對照品、樣品溶液和輔料溶液進樣分析，色譜圖詳見圖1。

2.1.2 線性試驗。精密稱取ROX工作對照品適量，用流動相制備成濃度為2.5、10、20、50、100、150μg·mL－1的系列溶液。分別取上述各溶液適量進行液相色譜測定，將ROX峰面積（A）與其濃度C（μg·mL－1）進行線性回歸，得回歸方程為：A＝0.0935C－0.0006（r＝0.9999）。結果表明，ROX檢測濃度線性范圍為2.5～150μg·mL－1。

2.1.3 回收率及精密度試驗。按處方量120%、100%、50%精密稱取ROX，按處方比例加入其它輔料，用流動相定容，超聲20min，靜置至室溫，過濾，制備成高、中、低3種濃度的ROX溶液（每種濃度各制備3份），分別取上述濃度的溶液適量進行色譜測定，每個濃度測定5次，計算。結果，平均回收率分別為（98.97±2.76）%、（99.99±1.05）%、（99.05±1.23）%。將上述測定回收率的3種濃度的溶液同日內重復測定5次，求算日內相對標準偏差；每天測定1次，連續測定5d，求算日間相對標準偏差。結果，日內RSD＜0.12%，日間RSD＜0.92%。

2.2 微丸釋放度試驗

按《中國藥典》2005年版二部附錄ⅩC溶出度測定法第一法轉籃法的裝置，附錄ⅩD釋放度測定法第二法的操作[5]，量取0.1mol·L－1鹽酸溶液750mL注入每個溶出杯中，加熱使溶液溫度保持在（37±0.5）℃，轉速100r·min－1。稱取適量微丸（含ROX 75mg）放入轉籃中，啟動儀器并開始計時。分別于1、2h時用注射器吸取釋放液5mL，用0.45μm微孔濾膜過濾，同時補加同溫鹽酸溶液5mL，第2h取樣完畢并補充完介質后，于杯內加入0.2mol·L－1磷酸鈉溶液250mL，調節pH值為6.8，然后于第3、4、6、8、10、12h各取樣5mL，用0.45μm微孔濾膜過濾，同時都分別補加相同pH值的同溫磷酸鹽緩沖液5mL。取上述樣品續濾液于液相色譜儀中進行測定，計算累積釋藥百分率。

2.3 脈沖控釋微丸的制備

2.3.1 包衣液的制備。（1）含藥層包衣液的制備：將黏合劑HPMC-E3溶于適量水中，磁力攪拌至完全溶解，加入適量乙醇，制備成濃度為12g·L－1的乙醇水溶液，再依次加入藥物和適量微粉硅膠，攪拌至均勻，即得。（2）溶脹層包衣液的制備：將黏合劑HPMC-E3溶于水中，制備成濃度為18g·L－1的溶液，加入CMC-Na或其它溶脹材料，使其質量濃度為30g·L－1，攪拌至均勻，靜置過夜，使其充分溶脹，使用前加入適量檸檬酸三乙酯。（3）控釋層包衣液的制備：取Surelease用水稀釋成濃度為80g·L－1的溶液，攪拌至均勻即得。

2.3.2 包衣微丸的制備。將空白丸芯置于流化床中，從含藥層到控釋層依次包衣，出風溫度為（37.0±2.0）℃，噴液速率為1.0～1.5mL·min－1，噴霧壓力為0.12～0.16MPa，以底噴方式進行包衣。每次包衣后流化干燥10min，包衣完成后置于烘箱中40℃固化12h即得。包衣增重計算公式：包衣增重（%）＝（包衣后重－包衣前重）/包衣前重×100%。

2.4 處方與工藝因素對微丸釋藥的影響

2.4.1 丸芯類型對藥物釋放的影響。選用蔗糖型和微晶纖維素型2種不同丸芯進行包衣，溶脹層材料為CMC-Na，包衣增重15%，控釋層包衣增重24%，制備包衣微丸，并分別進行釋放度測定。2種丸芯對藥物釋放的影響結果見圖2。

圖1 高效液相色譜圖A.ROX工作對照品；B.樣品；C.輔料；1.ROXFig 1HPLC chromatogramsA.ROX control；B.sample；C.excipients；1.ROX

圖2 丸芯類型對藥物釋放的影響Fig 2 Effects of types of core on the drug release

圖2 結果表明，空白丸芯的類型對微丸釋藥行為有明顯的影響。當用蔗糖型丸芯進行包衣，微丸在時滯4h之后藥物快速釋放，達到脈沖釋藥的效果。當用微晶纖維素型丸芯進行包衣時，微丸體外釋放僅呈緩釋效果，而且藥物釋放不完全。故選擇蔗糖型丸芯進行包衣。

2.4.2 溶脹層材料類型對藥物釋放的影響。選用蔗糖型丸芯上藥，保持控釋層包衣增重24%，分別以CMC-Na、CCMSNa、L-HPC、PVPP和混合材料L-HPC∶PVPP（4∶1）作為溶脹層材料，包衣增重均為15%，制備包衣微丸，并分別進行釋放度測定。5種溶脹層材料對藥物的釋放影響結果見圖3。

圖3 溶脹層材料對藥物釋放的影響Fig 3 Effects of the material of the swelling layer on the drug release

圖3 結果表明，5種材料的膨脹效果CMC-Na≥CCMS-Na＞L-HPC＞L-HPC ∶PVPP＞PVPP。CMC-Na和CCMS-Na膨脹效果相當，且明顯高于其它幾種，使用CMC-Na和CCMS-Na作為溶脹層材料微丸可以達到預期的脈沖釋藥效果，其它幾種均無法達到預期效果。但用CCMS-Na進行包衣時易發生粘連，故從包衣工藝上來說，CMC-Na優于CCMS-Na。

2.4.3 溶脹層包衣增重對藥物釋放的影響。選用蔗糖型丸芯上藥，保持控釋層包衣增重24%，以CMC-Na為溶脹層材料，改變溶脹層包衣增重分別為8%、10%、15%、20%、24%，制備包衣微丸，并分別進行釋放度測定。溶脹層不同包衣增重對藥物釋放的影響結果見圖4。

圖4結果表明，溶脹層包衣增重達到一定的厚度時，才能獲得較好的脈沖釋放效果。保持控釋層增重24%，溶脹層增重為8%和10%時，釋藥類似緩釋曲線，且控釋層衣膜始終沒有破裂，釋藥后的空殼很少。這可能是由于溶脹層薄，所產生的膨脹力不足，無法撐破控釋層衣膜形成裂口，導致藥物層被溶解的藥物只能通過已被脹大但未破裂的控釋層衣膜擴散[6]所致，因此藥物釋放量少。當溶脹層包衣增重達15%時，膨脹層已能產生足夠的膨脹力來撐破控釋層衣膜，于4h時滯后開始釋藥，隨后的4h累積釋藥百分率達80%以上。當溶脹層包衣增重至20%及以上時，大約于3h時滯后開始釋藥，隨后的3h累積釋藥百分率達80%以上。由于本微丸要求較長的時滯，當溶脹層包衣增重超過15%時，時滯已經不合適，因此本試驗選用溶脹層包衣增重15%。

2.4.4 控釋層包衣增重對藥物釋放的影響。選用蔗糖型丸芯上藥，以CMC-Na為溶脹層材料，并保持溶脹層包衣增重為15%，改變控釋層包衣增重分別為15%、20%、24%、27%，制備包衣微丸，并分別進行釋放度測定?？蒯寣硬煌略鲋貙λ幬镝尫诺挠绊懸妶D5。

圖4 溶脹層包衣增重對藥物釋放的影響Fig 4 Effects of coating level of swelling layer on drug release

圖5 控釋層不同包衣增重對藥物釋放的影響Fig 5 Effect of coating level of controlled-release layer on drug release

圖5 結果表明，在保持溶脹層包衣增重為15%，控釋層增重15%時，幾乎沒有釋藥時滯；控釋層增重20%時，釋藥時滯僅為3h；控釋層增重24%時，釋藥時滯為4h；控釋層增重為27%時，6h內幾乎沒有釋藥，6h后釋放曲線并沒有呈現出期望的脈沖釋藥效果。表明本試驗以CMC-Na為溶脹層材料，溶脹層包衣增重為15%時，控釋層增重不能超過24%，否則所產生的膨脹力無法撐破控釋層衣膜，藥物釋放無法達到脈沖效果。

2.4.5 工藝結果驗證。根據以上工藝制備3批ROXPCP，選用蔗糖型丸芯上藥，以CMC-Na為溶脹層材料，包衣增重為15%，控釋層包衣增重24%，進行體外釋放度試驗。結果表明，平均時滯約為4h，之后4h累積釋藥百分率均大于80%，結果見圖6。

3 討論

微丸制劑由于具有在胃腸道分布面積大、生物利用度高、大小均勻、易于處理（如包衣、分劑量方面）、適合復方制劑的配伍等顯著優點[7]，正日益受到人們的重視。目前，制備定時脈沖控釋微丸制劑的方法大致有雙層膜時控-崩解脈沖微丸[5]和滲透壓調節型脈沖微丸[8]等幾種。本文采用雙層膜時控-崩解的方法制備控釋微丸，該模型核心為載藥微丸，在載藥丸芯上包一層由溶脹材料組成的溶脹層，外面再包一層由惰性高分子材料組成的控釋層。當包衣微丸口服后，并不立即釋藥，而是胃腸液不斷通過控釋層向內部滲透，溶脹層吸水逐漸溶脹，產生膨脹力，一定時滯后，溶脹層的膨脹力達到一定程度，將外面控釋層脹破，藥物通過裂口迅速完全釋放出來[9]。其中，穩定、可重現的時滯和時滯后藥物的迅速釋放是制備的難點和關鍵。

空白丸芯的成分對微丸的釋藥行為有明顯的影響。目前常用的空白丸芯多為蔗糖型和微晶纖維素型2種。蔗糖型丸芯在衣膜內可形成高滲溶液，有利于藥物的釋放，能達到脈沖釋藥的效果，故選用蔗糖型丸芯。

CMC-Na是優質崩解劑中的一種，其作用機制為溶脹作用[9]，它自身具有很強的吸水膨脹性，崩解作用良好，在水中能吸收數倍于本身重量的水膨脹而不溶解，所產生的膨脹力能較快撐破外層衣膜，使里層的藥物可以迅速釋放。以CMCNa為內層溶脹材料在一定時滯之后藥物的釋放速率較快，能產生脈沖釋藥的效果，故以其作為內層溶脹層材料。

溶脹層材料、厚度（包衣增重）以及控釋層厚度的選擇是能否實現脈沖釋藥的關鍵。當控釋層厚度一定，一定范圍內隨著溶脹層厚度的增加，釋藥時滯縮短，釋藥速率加快。當溶脹層厚度一定時，隨著控釋層厚度的增加，釋藥時滯明顯延長，且時滯后釋藥速率也明顯下降，甚至釋藥不完全。

微丸的平均胃排空時間為2～4h，小腸平均轉運時間一般為3h，口服后平均結腸到達時間為5～7h。由于結腸處物質轉運速度緩慢，藥物能在此滯留20～30h。ROXPCP早晨服藥，4h后開始釋藥（此時微丸運行到小腸中下部），待其逐漸釋藥，血藥濃度逐漸升高，約10h左右達峰（大約為晚間21點左右），此時分泌的大量胃酸可被有效抑制。同時也可見微丸大部分釋藥行為將在結腸內進行，由于結腸吸收面積遠小于小腸，且實際情況時含有大量內容物，水分含量低，故吸收率會有所下降，這一局限性可通過延長藥物在結腸內的釋藥時間加以克服[10]。為使藥物吸收盡量完全，保證制劑的生物利用度，本研究將微丸的時滯定為4h。

本研究選擇蔗糖型空白丸芯制備含藥丸芯，以CMC-Na為溶脹層材料，Surelease作為控釋層，制備ROXPCP，當溶脹層增重15%、控釋層增重24%、微丸體外釋藥時滯為4h、時滯后4h累積釋藥百分率80%以上時，達到預期效果。該制劑的體內釋藥行為還有待于進一步研究。

圖6 3批ROXPCP累積釋藥曲線Fig 6 Drug release curves of 3batches of ROXPCP

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Preparation of Roxatidine Aidcetic Hydrochloride Pulsatile Controlled-release Pellets

LIAO Peng，CHEN Yan-zhong，LV Zhu-fen，ZHONG Long（Guangdong Pharmaceutical University，Guangdong Provincial Key Laboratory of New Dosage Form of Drugs，Guangzhou 510006，China）

OBJECTIVE：To prepare the roxatidine aidcetic hydrochloride pulsatile controlled-release pellets（ROXPCP）.METHODS：Blank core were coated with Roxatidine aidcetic hydrochloride（ROX）as drug-containing layer，swelling agent containing croscarmellose sodium and controlled-release layer containing ethylcellulose aqueous dispersion respectively to prepare ROXPCP.The effects of the materials of blank core and swelling layer，the weight of swelling layer and controlled-release layer on the release of ROX were investigated to optimize process technology and validate formula.RESULTS：The release behavior was influenced strikingly by the types and weight of coating layer.The optimal formula was as follows：ROXPCP were prepared using croscarmellose sodium as inner layer with 15%（weight）coating level and ethylcellulose aqueous dispersion（surelease）as outer controlled-release layer with 24%（weight）coating level.The lag time of prepared pellets was about 4h and accumulative release rate reached 80%within 4h.CONCLUSIONS：The drug release of ROXPCP was shown in pulsatile way in vitro.

Roxatidine aidcetic hydrochlore；Pulsatile controlled-release pellets；Preparation；Coating；Drug release

R943；R975+.6

A

1001-0408（2010）17-1584-04

＊碩士研究生。研究方向：新藥及藥物新劑型。電話：020-39352511。E-mail：dapeng708@126.com

#通訊作者：教授，碩士研究生導師。研究方向：新藥及藥物新劑型。電話：020-39352501。E-mail：doctor.c@163.com

2010-01-13

2010-03-10）