肝細胞癌患者RhoC蛋白、CD44v6與微血管密度的關系

胡禮儀,周業庭,臧家蘭,吳柏華,楊繼武

(江蘇省沭陽縣人民醫院:1.檢驗科;2.普外科;3.腫瘤科 223600)

肝細胞癌患者RhoC蛋白、CD44v6與微血管密度的關系

胡禮儀1,周業庭2,臧家蘭3,吳柏華2,楊繼武2

(江蘇省沭陽縣人民醫院:1.檢驗科;2.普外科;3.腫瘤科 223600)

目的探討肝細胞癌(HCC)患者RhoC蛋白表達、細胞黏附分子CD44v6水平與微血管密度的關系。方法用免疫組織化學法檢測HCC組織及正常肝組織(對照組)的RhoC蛋白、CD44v6與微血管密度(MVD),并進行分析。結果HCC組織中RhoC蛋白、CD44v6陽性表達率及MVD均高于對照組(P＜0.05);RhoC蛋白、CD44v6與HCC的組織分化程度、腫瘤有無侵襲轉移相關(P＜0.05),與腫瘤大小無關(P＞0.05);RhoC蛋白與CD44v6表達呈正相關(P＜0.05),且均與M VD呈正相關(P＜0.05)。結論HCC組織中RhoC蛋白、CD44v6水平均增高,它們可能協同促進血管形成,參與HCC的發生、發展。

癌,肝細胞;細胞黏附分子;微血管密度

據報道RhoC蛋白、細胞黏附分子CD44v6與腫瘤侵襲、轉移相關[1-2]。本研究采用免疫組織化學法檢測 RhoC蛋白、CD44v6在肝細胞癌(HCC)組織中的表達情況及與微血管密度(MVD)的相關性,以探討它們與HCC患者腫瘤復發、轉移的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2006年1月至2009年1月的36例HCC患者,其中男 28例,女 8例,年齡 35～70歲,平均 49歲。均符合原發性肝癌診斷標準,且經病理檢查確診。HCC組術前均未行針對HCC的放、化療和免疫治療。高、中分化癌22例,低分化癌14例;轉移 20例,無轉移 16例;腫瘤直徑大于5cm者19例,≤5cm者17例。另選良性肝病變旁的正常肝組織10例(肝囊腫3例,肝血管瘤7例)為對照組。

1.2 試劑 羊抗人RhoC多克隆抗體購自美國SantaCruz公司,鼠抗人CD44v6單克隆抗體、濃縮型SP法免疫組織化學試劑盒、DAB顯色試劑盒購自北京中杉金橋生物技術公司。

1.3 方法 術中取肝癌組織及正常肝組織,用10%甲醛固定,石蠟包埋、切片,分別行HE和免疫組織化學染色。在切片陽性細胞區隨機挑選5個高倍視野共計數100個細胞,在高倍鏡下對染色作如下評分:(1)染色深淺:無著色0分,淡黃色1分,棕黃色2分,棕褐色3分;(2)染色細胞數多少:≤1%細胞質染色為0分,＞1%～10%為1分,＞10%～33%為2分,＞33%～66%為3分,＞66%為4分。2項結果相加,＜4分為陰性,≥4分為陽性。在400倍光鏡下隨機計數5個視野內微血管數,計算MVD均值。

1.3 統計學處理 用SPSS15.0統計軟件進行統計學處理,率的比較用χ2檢驗,等級資料用Spearman等級相關檢驗,以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 RhoC蛋白、CD44v6表達變化 HCC組織中 RhoC蛋白、CD44v6陽性表達率分別為 69.44%、63.89%;正常肝組織中陽性表達率均為10.00%。兩組間比較差異均有統計學意義(P＜0.05)。

2.2 RhoC蛋白、CD44v6和MVD與 HCC臨床病理特征的關系 RhoC蛋白、CD44v6與HCC的分化程度、腫瘤有無侵襲、轉移相關(P＜0.05),與腫瘤大小無關(P＞0.05),見表1。

表1 肝癌 RhoC蛋白、CD44v6表達與臨床病理學特征的關系[n(%)]

2.3 RhoC蛋白、CD44v6和MVD的相關性 相關分析顯示,RhoC蛋白與CD44v6呈正相關(r=6.01,P＜0.05);RhoC蛋白表達與MVD值呈正相關(r=4.69,P＜0.05);CD44v6表達與MVD值呈正相關(r=4.15,P＜0.05)。

3 討 論

Rho家族屬于小分子G結合蛋白的Ras超家族。RhoC是其成員之一,參與細胞信號傳導、增殖和肌動蛋白骨架的調節,在腫瘤細胞游走過程中起關鍵作用[3-4]。同時RhoC高表達促進細胞在基質中游走,突破基底膜屏障進入血管、淋巴管及膽管是原發性肝癌發生肝內播散、淋巴結轉移及遠處轉移形成微轉移灶的重要原因[5-8]。本組結果顯示,HCC組織中RhoC蛋白陽性表達率明顯高于對照組,且RhoC蛋白表達與有無轉移和組織分化程度相關。

CD44v6是一種高度糖基化的細胞表面跨膜蛋白,作為細胞基質透明質酸受體參與特異性黏附過程,其變異體及過量表達與惡性腫瘤的發生、發展,以及侵襲和轉移密切相關,參與腫瘤浸潤[9-12]。本組織結果顯示,HCC組織中CD44v6陽性表達率明顯高于對照組,且CD44v6表達與腫瘤有無轉移和組織分化程度相關。

腫瘤的生長與轉移依賴于腫瘤血管形成,MVD是衡量腫瘤血管生成的客觀指標,可作為惡性腫瘤診斷、治療及判斷預后的客觀指標[13-14],而且腫瘤新生血管數與MVD值呈正相關,提示腫瘤中微血管數量越多,腫瘤侵襲轉移等惡性潛能及轉移機會越大。本組相關分析結果顯示,RhoC蛋白與CD44v6呈正相關,RhoC蛋白、CD44v6表達與MVD值呈顯著正相關。也證實了這一觀點。

綜上所述,RhoC蛋白、CD44v6在HCC組織中高表達,且與腫瘤分化程度、侵襲轉移能力及MVD密切相關,表明其可能成為判斷肝癌侵襲、轉移能力及預后的重要指標。

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10.3969/j.issn.1671-8348.2011.04.032

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1671-8348(2011)04-0379-03

2010-10-27

2010-11-29)

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