單味中藥抗肝纖維化作用研究進展*

孔維涵

(天津市天津醫院，天津 300211)

肝纖維化(hepatic fibrosis, HF)是一切慢性肝病的共同病理學基礎，也是肝硬變的早期的必經階段，其中25%～40%最終發展為肝硬化甚至肝癌。20世紀80年代后期以來，隨著肝臟細胞分離培養與生化分子生物學技術的發展應用，發現肝纖維化是一種結締組織的主動性增生過程，是肝細胞發生壞死和炎性刺激時，肝臟內以膠原纖維為主的細胞外基質彌漫性過度增生和沉積發展成肝硬化的病理過程。目前認為，肝纖維化的發生是一個動態的過程，是肝臟對損傷的一種創傷愈合反應，并且是可以逆轉的。由于肝纖維化發病的廣泛性及其結局(肝硬化、肝癌)的嚴重性，故國內外生物學和醫學等領域都在致力于研究肝纖維化的發生發展機制及其防治措施。

目前認為抗肝纖維化的策略主要包括：①去除病因；②抑制肝星狀細胞(HSC)的激活；③促進肝星狀細胞的凋亡；④抑制細胞外基質(ECM)的合成；⑤促進ECM的降解；⑥抑制肝臟炎癥反應；⑦保護肝細胞；⑧基因調控。

1 中醫學對肝纖維化的認識

中醫學認為本病通常由濕熱、疫毒等外邪侵襲，留著不去，日久致濕熱蘊結、瘀毒內積而形成。濕熱邪毒侵犯人體，病邪稽留，難以驟去，遷延日久，濕熱蘊結而成瘀為本病重要的病機。中醫中藥通過抑制膠原纖維生成及促進已形成的膠原纖維的降解和吸收等途徑起著抗肝纖維化的作用，具有多成分、多環節、多層次、多靶點的藥理作用，且毒副作用少，在抗肝纖維化中日顯優勢。

2 單味中藥抗肝纖維化的作用

2.1銀杏葉 銀杏葉是從銀杏科植物銀杏的葉中分離純化的提取物，其主要成分為黃酮苷和銀杏內酯，其中黃酮苷母核中含有還原性羥基功能基團，而銀杏內酯是天然的血小板活化因子的拮抗劑。因此，銀杏葉具有清除氧自由基、抑制脂質過氧化、改善微循環等藥理作用。高曉倩等[1]對CCl4造肝纖維化模型大鼠采用銀杏葉提取物治療結果表明，銀杏葉提取物能明顯降低模型組大鼠血清谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)和血清纖維化指標層粘連蛋白(LN)、透明質酸(HA)的水平，使肝組織變性壞死及纖維組織增生明顯減少，改善肝臟組織病理變化，有明顯的抗肝細胞損傷和抗肝纖維化的作用。

2.2丹參 丹參為唇形科植物丹參的根。其有效成分有水溶性和脂溶性兩大類 , 脂溶性部分主要為二萜醌類化合物 (包括丹參酮、隱丹參酮等)；水溶性部分主要為酚性酸類化合物 (包括丹參素、原兒茶醛、丹酚酸等)[2]。李東等[3]通過對丹參素的研究發現，丹參素可能通過抑制核轉錄因子(NF-κB)活性而抑制白細胞介素-1β(IL-1β)誘導的肝星狀細胞的增殖，促其凋亡，減少膠原的生成。因此，丹參素在保護肝細胞，促進損傷肝細胞自我修復的同時，還能減少肝星狀細胞的增殖，促其凋亡和炎性因子及膠原生成及減少肝纖維化的促發因素，從兩方面發揮持久的抗肝纖維化作用。張杰等[4]研究發現，丹參酚酸B鹽可通過降低肝星狀細胞內的鈣離子濃度，顯著抑制內皮素1誘導的肝星狀細胞的收縮，且抑制作用與其濃度，同時使縮小的肝竇直徑有所恢復，減少了肝內血流阻力，從而在增加肝內微循環血流量的同時，降低了門脈壓力。近期，覃筱燕等[5]通過使用丹參酮ⅡA治療CCl4所致肝纖維化大鼠的實驗中發現，大鼠血清中的總蛋白、白蛋白(Alb)和羥脯氨酸(Hyp)含量顯著下降，提示丹參酮ⅡA可以降低肝纖維化大鼠肝組織中膠原蛋白的含量，恢復肝臟對蛋白質的正常合成與貯存能力，達到抗肝纖維化的作用。

2.3甘草 甘草的有效成分之一是甘草酸，甘草酸是葡萄糖醛酸和甘草次酸結合的皂苷。周朝暉等[6]使用甘草酸治療CCl4誘導的肝纖維化大鼠的免疫組化實驗中發現，甘草酸增加了Smad 7的表達作用，阻止了Smad 2/3向下游傳導，從而阻止了轉化生長因子-β(TGF-β)信號傳導，產生抗肝纖維化的作用。楊松海等[7]通過體內和體外實驗發現，甘草酸可以有效抑制血小板衍生因子(PDGF)受體PDGFRβ的轉錄水平的上調，因此可以有效抑制PDGF介導的促HSC增殖作用。

2.4苦參 為豆科槐屬植物苦參的干燥根，主要藥理成分為苦參堿和氧化苦參堿[8]。在動物實驗以及臨床觀察中，多位學者均發現，苦參堿以及氧化苦參堿對TGF-β1、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平有明顯的降低作用，從而抑制肝星狀細胞活化，減少釋放ECM，而發揮抗肝纖維化的作用。而苦參對于具有抑制Ⅰ型膠原表達、促進膠原酶合成、影響ECM沉積、延緩肝纖維化進程作用的IL-10則有明顯的增高作用?？鄥⑦€通過減少丙二醛(MDA)的生成，減輕肝損傷，抑制肝內羥脯氨酸的生成，產生抗肝纖維化的作用[9-11]。錢文杰[12]還發現，對于肝炎后肝硬化患者，苦參堿能通過調節外周血T細胞亞群紊亂，提高細胞免疫反應，有效抑制乙肝病毒基因(HBV-DNA)病毒的復制，降低患者血清中肝纖維化指標水平，進而達到清除細胞內病毒、防治肝纖維化的目的。

2.5黃芪 黃芪是豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根。丁向東等[13]通過采用黃芪總苷治療日本血吸蟲病肝纖維化小鼠時發現，10周時，黃芪總苷高、低劑量組與模型組之間的Ⅰ、Ⅲ型膠原含量、蟲卵結節大小及肝纖維化程度均具有顯著差異，在14周時，黃芪總苷高、低劑量組與模型組之間，Ⅰ、Ⅲ型膠原含量和蟲卵結節大小均明顯降低，肝臟纖維化程度顯著減輕，表明黃芪總苷抑制了Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的合成，使膠原蛋白處于相對穩定的低水平表達，從而抑制了血吸蟲病肝纖維化的進程，表現為蟲卵結節縮小，肝纖維化減輕。同時通過積極的大劑量黃芪總苷的干預，可能使膠原蛋白的合成較早穩定在較低的表達水平。閆曉風等[14]采用黃芪湯治療二甲基亞硝胺誘導的大鼠肝纖維化模型研究中發現，黃芪湯可以明顯減少模型大鼠TNF受體家族Fas、天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白水解酶caspase-8、caspase-3蛋白以及α平滑肌肌動蛋白(α-SMA) mRNA表達量，表明黃芪湯可以通過抑制HSC激活與增殖達到抗肝纖維化的作用。在對基質金屬蛋白酶(MMPs)及基質金屬蛋白酶抑制劑(TIMPs)的研究中發現，黃芪湯可下調MMP-2的表達來改善HSC等多種細胞生存的內環境，使HSC活化減少，從而使肝纖維化程度減輕。黃芪湯還能顯著提高MMP-9活性，促進MMP-9而抑制TIMP-1、2表達，降解過度沉積的ECM，維持MMPs/TIMPs調控的動態平衡。

2.6冬蟲夏草 冬蟲夏草為麥角菌科真菌冬蟲夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆蟲蝙蝠蛾幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復合體，是一種免疫調節劑。張愛華等[15]外用蟲草頭孢菌絲治療晚期血吸蟲病發現，實驗組蟲卵結節平均面積、單位面積內蟲卵結節數與對照組相比具有顯著性差異。證實蟲草頭孢菌絲具有保護受損肝細胞，抗肝纖維化，改善肌體異常免疫狀態的作用。孫保木等[16]在研究蟲草菌絲提取物對大鼠脂肪性肝炎與肝纖維化的作用時發現，蟲草菌絲可明顯降低模型組升高的 ALT和AST活性，升高模型組降低的Alb含量，改善脂肪性肝炎模型大鼠的肝功能，減輕肝組織脂肪變性與炎癥；并且對于持續損傷引起的脂肪性肝纖維化模型，可顯著抑制肝組織膠原生成與沉積，說明蟲草菌絲有良好的抗脂肪性肝炎與肝纖維化作用。實驗還發現，蟲草菌絲可顯著降低MDA含量與谷氨?；D移酶(γ-GT)水平，提高超氧化物歧化酶(SOD)活性水平和谷胱甘肽(GSH)含量，說明蟲草菌絲其抗肝纖維化作用與其抗脂質過氧化與抑制HSC活化有關。對二甲基亞硝胺誘發的肝纖維化實驗研究中發現，蟲草菌絲能降低TIMP-2的含量，從而減弱對MMP-2的抑制作用，提高MMP-2的活性，促進肝纖維化時Ⅳ型膠原的降解，促進肝臟特別是肝竇結構的快速修復。在血清指標中表現為，HA、Hyp、MDA含量及ALT、AST活性均顯著降低。提示蟲草菌絲具有抑制脂質過氧化反應，減輕膠原沉積，具有保護肝細胞，抗肝纖維化的作用[17,18]。

2.7姜黃 姜黃素是從植物姜黃根莖中提取的一種天然色素，具有抗氧化、 抗腫瘤、抗炎及抗病毒等生物學活性[19]。近年研究發現姜黃素具有良好的保肝和抗肝纖維化作用。采用姜黃素治療四氯化碳造模大鼠的實驗表明，姜黃素治療組的血清肝纖維化指標 HA、LN、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)及Ⅳ.C以及MMP-2蛋白表達與模型對照組比較均呈劑量依賴性降低，且差異有統計學意義，表明姜黃素對肝纖維化具有抑制作用[20，21]。趙珍東[22]研究發現，姜黃素可以下調二甲亞砜造模大鼠PDGF-BB、PDGFRβ的表達，從而削弱了PDGF與其受體結合，抑制了PDGF的促增殖效應。同時，姜黃素能抑制PDGF下游信號的傳遞蛋白ERK1的表達，阻斷了PDGF的信號轉導通路，進而抑制了HSC的增殖。

2.8粉防己 植物基源為防己科植物粉防己的干燥根[23]。粉防己含多種生物堿，主要有粉防己堿(漢防己甲素)、防己諾靈堿(漢防己乙素)、輪環藤酚堿、氧防己堿和防己斯任堿等[24]。其研究較多的成分主要為粉防己堿，即漢防己甲素。其被證實具有降壓、抗風濕、抗氧化、抗菌、抗癌、解熱、鎮痛、肌肉松弛等多種作用[25,26]。在實驗中發現，粉防己堿能抑制HSC形態向肌成纖維細胞樣轉化和活化標志物α-SMA表達，同時抑制LN和PCⅢ的分泌，TGF-β1表達下調。這表明粉防己堿直接抑制了靜止期HSC活化和向肌成纖維細胞轉化。同時還發現，無論TGF-β1存在與否，粉防己堿均可上調Smad 7的表達。Smad 7是HSC TGF-β1信號通路的主要負反饋調節信號分子，因此，上調 Smad 7的表達可以抑制TGF-β1基因轉錄和靜止期HSC培養活化和TGF-β1促活化作用[27,28]。

綜上所述，理想的肝纖維化治療藥物應當是耐受性好、肝臟特異性、對其他組織無不良反應[29,30]。近年來，我國乃至世界對肝纖維化的治療重視程度日益加強，中醫藥學者在研究抗肝纖維化方面取得了顯著成績，已從整體到達細胞分子水平，我們相信，隨著研究手段的不斷發展，研究技術的不斷改良，必將開發出更多理想的、高效且副作用低的抗肝纖維化中草藥，取得中醫藥抗肝纖維化治療的突破性進展。

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