自體培養黑素細胞移植聯合窄譜中波紫外線治療白癜風療效觀察

徐偉愛 ，吳辛剛 ，洪為松 ，傅麗芳 ，尉曉冬 ，許愛娥

（1.杭州市余杭區第五人民醫院，余杭 311100；2.杭州市第三人民醫院，杭州 310009）

白癜風是一種常見的色素減退性疾病，目前該病的發病機制尚不明確，治療困難，嚴重影響身心健康[1-3]。對于常規治療失?。ㄈ缇植刻瞧べ|激素、免疫調制劑、補骨脂類藥物等）的穩定期白癜風患者，應用外科手段治療是很有必要的。自體純培養黑素細胞移植是治療穩定期白癜風的有效手段，近年來國內外已有大量的文獻報道，體外擴增培養的細胞能夠為移植提供更多的黑素細胞[6-10]。NB-UVB是治療白癜風的一種有效且具有較好耐受性的方法[11-13]。體外研究證實NB-UVB能夠直接刺激培養黑素細胞的遷移和增殖，為NB-UVB治療白癜風的療效提供理論基礎[14]。為此在本研究中我們采用開放性對照研究來評估自體純黑素細胞移植聯合NB-UVB治療白癜風的療效，結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 44例患者（男25例，女19例），年齡 16～48歲[平均（24.64±10.09）歲]，病程 6 個月～25 年。納入標準：VIDA（白癜風活動程度評分）>+1；皮損穩定至少1年，無同形反應，對常規局部和系統的治療無反應，無瘢痕體質以及無嚴重的自身免疫性疾病[15]。所有患者移植療效觀察至少6個月。治療前以及每次隨訪均拍下皮損照片，對比前后照片來評估移植療效。

1.2 治療方法

1.2.1 供皮部位處理 生理鹽水常規消毒供皮部位，將皮膚分離儀器在正常腹部上進行負壓吸引起皰，壓力為-300mmHg，每 5～10min觀察 1次，時間約為1～2h，直至出現大皰，停止吸引。剪下皰壁，置于Hanks’液中，立即送入細胞實驗室分離細胞。

1.2.2 細胞培養 分離和培養細胞的方法如文獻所述[6]。

1.2.3 受皮部位處理 移植前2～4h在受皮部位涂抹利多卡因乳膏。用70%的乙醇消毒受皮部位，超脈沖CO2激光（能量225mJ/s，速度 30～50Hz/s）磨削皮損表面。有4例對疼痛敏感的患者，應用1%利多卡因局部注射。

1.2.4 移植 將黑素細胞種植在激光磨削的部位上。然后用凡士林紗布包扎，同時鋪上浸有F12溶液的紗布，最后用滅菌紗布和膠帶包扎。囑咐患者術后回家避免過度活動、摩擦，以免影響療效。術后10 d祛除包扎。所有移植患者均在杭州市第三人民醫院白癜風治療中心完成黑素細胞移植。

1.2.5 照光（NB-UVB） 移植后2周，囑所有患者在余杭區第五人民醫院進行NB-UVB治療，1周2次，連續3個月。起始劑量0.40 J/cm2，每個療程根據患者的反應和耐受能力增加0.10 J/cm2，但不超過3 J/cm2。

1.3 療效評估 NB-UVB治療后10 d、1個月、2個月、3個月、六個月各評估1次移植療效，評估復色面積。治療效果分為優秀>90%；良好50%～89%；一般20%～49%以及無效<20%[6]。

1.4 統計學分析 采用SPSS13.0軟件進行統計分析。

2 結果

見圖1和圖2。我們發現所有患者的復色模式均為彌散型，這與常規NB-UVB治療的點狀型復色模式有所不同，說明NB-UVB直接刺激了接種的黑素細胞的增殖和遷移。兩組獲得良好以上的復色效果的患者分別為86.9%、76.2%,兩組之間具有明顯的統計學差異（P<0.05）；兩組之間的平均復色率分別為78.9%、70.0%，兩組間的Mann-Whitney U檢驗具有明顯的統計學差異（P<0.05），見表1。兩組之間的治療部位的療效比較，皮損位于面頸部獲得良好以上復色率的患者分別為92.3%、90.9%，兩組間對比無明顯統計學意義（P>0.05）；皮損位于軀干部獲得良好以上復色率的患者分別為80.0%、60.0%，兩組間對比有顯著的統計學差異（P<0.05），見表2。

圖1 治療前白斑約60cm2

圖2 治療后復色基本痊愈

表1 兩組治療白癜風的療效情況 例（%）

表2 兩組治療不同部位白癜風的療效情況 例（%）

在治療過程中所有患者均未出現嚴重的并發癥，僅出現皮膚灼熱感（1例）、紅斑（3例）、色素沉著（4例）等。治療部位色素沉著在隨訪6個月中逐漸減輕，且與周圍正常皮膚相接近。

3 討論

白癜風的治療仍是一個醫學難題，雖然現今有各種各樣的方法在治療白癜風上是有效，但仍有大量的患者復色失敗。對于常用療法治療失敗的穩定期患者，外科治療是有必要的，尤其是暴露部位皮損。純黑素細胞培養移植通過在體外擴增黑素細胞，進而獲得更多的黑素細胞，為白癜風的復色提供新的色素來源。體外黑素細胞的擴增能夠為移植提供更多的黑素細胞，小面積（2cm2）的正常吸皰表皮所培養出的細胞能夠治療較大面積的白癜風皮損（達500 cm2）[7-10]。以往的研究表明NB-UVB是治療白癜風的一種有效且能很好耐受的方法[7-9]，NBUVB能夠刺激培養黑素細胞的增殖和遷移，為NBUVB有效治療白癜風提供理論基礎[10]。

本研究中我們首次觀察自體純培養黑素細胞移植治療后聯用NB-UVB治療白癜風的療效比較。在治療期間，我們發現所有患者的復色模式均為彌散型，這與NB-UVB治療的復色模式（點狀型）有所不同——這是由于NB-UVB刺激毛囊周圍黑素細胞的遷移和增殖所致，因此我們認為NB-UVB能夠直接刺激移植部位黑素細胞的遷移和增殖[16]

本研究發現自體純培養黑素細胞移植聯合NB-UVB治療組復色率（50%以上復色率86.9%）比單用黑素細胞移植治療組（50%以上復色率76.2%）的復色率明顯增高，兩組間對比有統計學意義（P<0.05）。我們同時觀察到兩組之間面頸部獲得良好以上（>50%）復色率的患者分別為92.3%、90.9%，兩組間對比無統計學差異。兩組之間軀干部獲得良好以上（>50%）復色率的患者分別為80.0%、60.0%，兩組間對比有明顯的統計學差異（P=0.039）。我們認為面頸部位于光暴露部位，對光不敏感，容易形成光耐受性，因此兩組之間面頸部的療效沒有明顯的差異；而軀干對光敏感，因此聯合NB-UVB的效果優于不聯用組。

總之，我們的研究表明自體純培養黑素細胞移植聯合NB-UVB治療白癜風是一種有效的方法，聯合NB-UVB能夠提高黑素細胞移植的療效，尤其是對于位于軀干部皮損。

［1］ Hautmann G,Panconesi E.Vitiligo:a psychologically influenced and influencingdisease[J].Clin Dermatol,1997,15:879-890.

［2］ Firooz A,Bouzari N,Fallah N,et al.What patients with vitiligobelieveabout their condition[J].Int JDermatol,2004,43:811-814.

［3］ Ongenae K,Van Geel N,De Schepper S,et al.Effect of vitiligo on self-reported health-related quality of life[J].Br JDermatol,2005,152:1165-1172.

［4］ LeGuay JL.How you canhelp thevitiligopatient[J].Med Today,2000,12:36-45.

［5］ Schallreuter KU.Successful treatment of oxidative stress in vitiligo[J].Skin Pharmacol ApplSkin Physiol,1999,2:132-138.

［6］ Gambichler T,Breuckmann F,Boms S,et al.Narrowband UVB phototherapyinskinconditionsbeyondpsoriasis[J].JAmAcadDermatol,2005,52:660-670

［7］ Olsson MJ,Juhlin L.Long-term follow-up of leucoderma patients treated with transplants of autologous cultured melanocytes,ultrathin epidermalsheetsand basal cell layer suspension[J].Br J Dermatol,2002,147:893-904.

［8］ Olsson MJ,Juhlin L.Repigmentation ofvitiligoby transplantation of cultured autologousmelanocytes[J].Acta Derm Venereol,1993,73:49-51.

［9］ Olsson MJ,Juhlin L.Transplantation ofmelanocytes in vitiligo[J].Br JDermatol,1995,132:587-591.

［10］ Lerner AB,Halaban R,Klaus SN,et al.Tansplantation of human melanocytes[J].JInvestDermatol,1987,89:219-224.

［11］ Brazzelli V,AntoninettiM,Palazzini S,et al.Critical evaluation of the variants influencing the clinical response of vitiligo:study of 60 cases treated with ultraviolet B narrow-band phototherapy[J].J Eur Acad DermatolVenereol,2007,21:1369-1374.

［12］ Kanwar AJ,Dogra S.Narrow-band UVB for the treatment of generalized vitiligo in children[J].Clin Exp Dermatol,2005,30:332-336.

［13］ Chen GY,Hsu MM,Tai HK,et al.Narrow-band UVB treatment of vitiligo in Chinese[J].JDermatol,2005,32:793-800.

［14］ Wu CS,Yu CL,Wu CS,etal.Narrow-band ultraviolet-B stimulates proliferation andmigration ofculturedmelanocytes[J].Exp Dermatol,2004,13:755-763.

［15］ Njoo MD,Das PK,Bos JD,et al.Association of the K觟bner phenomenonwith disease activity and therapeutic responsiveness in vitiligo vulgaris[J].Arch Dermatol,1999,135:407-413.

［16］ Parsad D,Pandhi R,Dogra S,et al.Clinical study of repigmentation patterns with different treatment modalities and their correlation with speed and stability of repigmentation in 352 vitiliginous patches[J].JAm Acad Dermatol,2004,50:63-67.