E838對小鼠骨髓細胞染色體的輻射防護作用

王月英，吳紅英，葉 翔，李德冠，王小春，張 恒，路 璐，孟愛民

(1.中國醫學科學院 北京協和醫學院放射醫學研究所 天津市分子核醫學重點實驗室，天津 300192;2.天津邁達醫學科技有限公司，天津 300384)

E838是我所合成的一種新型輻射防護劑，白色粉末，無味，不溶于水。我們以往的藥效學實驗證明，E838具有放射防護效價高、毒副作用小的特點，能顯著提高受照射小鼠30 d存活率和保護指數［1］。本實驗對輻照前給予E838對小鼠骨髓細胞染色體損傷的防護作用進行探討，為進一步評價E838抗輻射效價提供實驗依據。

1 材料

E838，本所提供;炔雌三醇(EE3)，軍事醫學科學院放射醫學研究所提供;茶油，天津氨基酸公司提供。

615小鼠，雄性，體重24～26 g，中國醫學科學院實驗動物研究所提供，合格證號:SCXK(京)2005-0013。

輻射源，加拿大原子能有限公司。

2 方法

分別將E838和EE3加入茶油配制成濃度為250 μg/mL 的溶液，備用。

將小鼠隨機分為對照組、輻射對照組、E838組和EE3組，每組5只。E838組和EE3組分別腹腔注射E838或EE3茶油溶液0.1 mL，1次/d，連續3 d。對照組和輻射對照組給予等體積的茶油。第3次給藥24 h后進行劑量為1.5 Gy的137Csγ射線全身照射，劑量率為1.18 Gy/min。

照射后3 h小鼠腹腔注入秋水仙堿(4 mg/kg)，4 h后脫頸椎處死。取兩側股骨骨髓制成染色體涂片，Giemsa染色，常規制備染色體片［2］。雙盲法顯微鏡下計數染色體畸變類型和數量［3］。

3 結果

E838對受照射小鼠骨髓細胞染色體畸變的影響結果見表1。從表1可見，E838和EE3組，總畸變細胞數均明顯低于輻射對照組(P＜0.01)，E838組總畸變細胞數低于EE3組(P＜0.05)，三組中畸變類型主要以單體型為主。結果顯示，E838對輻射誘發的骨髓細胞染色體畸變具有明顯的防護作用。

表1 E838對受照射小鼠骨髓細胞染色體畸變的影響Tab.1 The effects of the E838 against chromosomal radiation injury

4 討論

已知電離輻射可直接損傷DNA，也可通過間接作用即自由基等產物引起DNA損傷［4］。

目前已發現了眾多有抗輻射損傷作用的藥物，但是效果不太理想。雌激素的研究已進行了數十年，幾經篩選，認為E838和EE3等藥物不但抗輻射效價高，而且對遺傳物質的損害也較低。前期研究已證明，E838能提高機體的防御能力，使小鼠骨髓造血干細胞G2/M期細胞比例下降，G0～G1期細胞比例相對增高，從而減低干細胞的放射敏感性。從本實驗結果可見，E838和EE3組，其畸變細胞數和總畸變數均明顯低于輻射對照組(P＜0.01)，E838預防組畸變細胞數明顯低于EE3組(P＜0.05)。三組中畸變類型主要以單體型為主，說明E838、EE3均有降低輻射誘發的小鼠骨髓細胞染色體畸變效應，且E838比EE3降低的更明顯。

E838降低輻射誘發小鼠骨髓細胞染色體畸變的機制可能與E838使染色體輻射所致原始損傷減少，對造血組織有明顯的放射防護作用，導致染色體畸變率降低，或與E838能增強DNA的修復能力等有關。前期的實驗表明，E838具有保護和減輕輻射對淋巴細胞的損傷，對小鼠全身1.0 Gy輻照后的DNA損傷有良好的修復作用［5］。

骨髓細胞染色體畸變類型有染色單體型畸變(包括單體斷裂和單體互換)和染色體型畸變(包括斷片、雙著絲粒體、易位、微小體、著絲粒環、無著絲粒環和缺失)。精原細胞中期分裂相的染色體形態與骨髓細胞一樣，其畸變類型也一樣。我們觀察到骨髓細胞染色體各類型畸變中以單體型畸變為主(其中主要是單體斷裂)，這可能與照射后取材時間有關。前期的研究表明E838對小鼠移植性腫瘤肺腺癌、肝癌及淋巴瘤［6］等的生長有一定程度的抑制作用。證明E838具有輻射防護和增敏雙重效應。

［1］ 王月英，王汝勤，趙忠萍.E838對小鼠輻射防護作用的研究［J］.中華放射醫學與防護雜志，2005，25(1):39-40.

［2］ 龔守良.實用基礎醫學實驗技術［M］.長春:吉林科學技術出版社，1991，120-121.

［3］ 陳 強，李 玲，姜 虹，等.黃蘑多糖對小鼠骨髓細胞染色體的輻射防護作用［J］.中華放射醫學與防護雜志，2005，25(2):141-142.

［4］ 劉麗波，孫曉玲，張海英，等.人參三醇組甙對小鼠骨髓細胞染色體輻射的防護作用［J］.吉林大學學報:醫學版，2002，28(2):138-140.

［5］ 王月英，劉 強，吳紅英，等.E838對輻射所致小鼠淋巴細胞DNA雙鏈斷裂防護作用的實驗研究［J］.腫瘤防治研究，2010，37(7):15-18.

［6］ 王月英，李德冠，吳紅英，等.E838及其聯合放化療對IRM-2小鼠自發淋巴瘤的抑制作用［J］.中國生化藥物雜志，2010，31(3):154-157.