維吾爾醫常用藥材羅勒子弱極性成分微波提取工藝研究

胡爾西丹·伊麻木 艾克熱木·艾合買提 熱娜·卡斯木 阿吉艾克拜爾·艾薩

1．中國科學院新疆理化技術研究所，新疆 烏魯木齊 830011;2．中國科學院研究生院，北京 100039;3．新疆醫科大學藥學院，新疆 烏魯木齊 830054

羅勒 (Ocimum basilicum L)，也被稱為九層塔、金不換、圣約瑟夫草和甜羅勒，是一種矮小、幼嫩的唇形科(Lamiaceae)羅勒屬 (Ocimum)香草植物。羅勒子(FRUIT OF SWEET BASIL)為羅勒的干燥成熟果實。據《本草綱目》記載，羅勒子俗稱芒勒子、羅叻子，富含多種礦物元素、維生素、胡蘿卜素、氨基酸等 ，具有明目、護腎、消除便秘、健身之功能［1］。羅勒子具有生干性寒、燥濕止瀉、涼血止血、清熱爽心等功能，主治濕熱性或血液質性疾病，如濕熱性痢疾、腹痛、腹瀉、便血、痔瘡出血及熱性心臟疾病等［2］?，F代研究表明，羅勒子具有利尿、抗氧化、防腐、消炎、抗癌、抑菌、治療心血管疾病等作用［3－6］。目前，在相關報道中表示油類在種子中的含量高于植物的其他部位，羅勒屬植物為主要芳香油植物之一［9］，前期研究結果表明羅勒子的揮發油進行了提取，并對其化學成分及其抗氧化活性和抗菌活性進行了分析［10－11］，且目前未發現對羅勒子的種子中的弱極性成分的研究鮮有報道。

本實驗采用微波協助對羅勒子中的弱極性成分最佳提取工藝研究，并用氣相色譜－質譜法 (GC－MS)對羅勒子揮發油進行分析，確定其主要成分含量，以期為進一步研究羅勒子揮發油的藥理活性，以及充分利用羅勒植物這一植物資源在維吾爾藥物研究中提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象 羅勒子，購于新疆和田，經中科院生態與地理研究所沈冠冕研究員鑒定為菊科羅勒屬植物羅勒(Ocimum basilicum L.)的干燥成熟果實，標本存放于中科院新疆生態與地理研究所標本館。

1.1.2 主要儀器 GCMS－QP2010氣相色譜－質譜聯用儀，購自日本島津公司;BP211D型電子天平，購自德國Sartorius有限公司;RE－5298A旋轉蒸發儀，購自上海亞榮生化儀器廠;SHB－ⅢS循環水式多用真空泵，購自鄭州長城科工貿有限公司;XH－100A型微波提取儀，購自上海市翔皓儀器廠。

1.1.3 主要試劑 正己烷，氯仿 (西安化學試劑廠)，無水硫酸鈉 (天津市紅巖化學試劑廠)。

1.2 方法

1.2.1 材料準備 將羅勒子用蒸餾水洗凈，放置在陰涼處晾干，粉碎，過20目篩后稱取300.0g，分別稱取10g，分為12組待用。

1.2.2 溶劑篩選 擬選用正己烷，氯仿，石油醚，乙酸乙酯四種溶劑進行溶劑篩選。所得圖如圖。

結論:最好提取溶劑是正己烷。

1.2.3 確定料液比及溫度 前期經過實驗得到該實驗最佳的料液比為固體:液體=1:10，最佳溫度為40℃

1.2.4 單因素試驗 取事先稱量好的羅勒子10g放入三口瓶中加入100ml正己烷放入微波提取儀中進行反應。時間調整為 2，4，6，8分鐘;功率設為 200w，400w，600w，800w，提取結果如表1－及圖2。

表1 提取時間和微波功率篩選 (g)

結論:最好提取條件為400w，6分鐘。

1.2.5 樣品甲酯化 取樣品0.2g于玻璃試管中，加正己烷2ml溶解，加入0.2mol/L NAOH甲醇溶液，40°C水浴反應30分鐘。取出冷卻至室溫加入飽和NaCl溶液靜置10分鐘，取上清液。

2 羅勒子弱極性成分分析

2.1 對羅勒子弱極性成分進行GC/MS分析 GC－MS條件如下:

儀器型號:Agilent7890A－5975C GC－MS。

色譜柱:HP－5MS毛細管柱 (30m×0.25mm×0.25μm)。

進樣量:1μl。

升溫程序:起始溫度為60℃;以10℃/min的速率程序升溫至180℃，保持2min;以2℃/min升溫至260℃，保持10 min;以10℃/min的速率程序升溫至280℃，保持2min。

電離方式:EI。

電離能量:70eV。離子源發生器溫度:230℃。質量掃描范圍:30～350amu。

2.2 GC－MS結果 經分析所得總離子流圖如圖3及表2所示。經計算機質譜數據庫檢索，鑒定出四種脂肪酸。主要為:棕櫚酸 (6.850%);亞油酸 (18.677%);亞麻酸(69.734%);硬酯酸C18(4.738%)。

表2 GC－MS分析結果

3 討論

3.1 實驗前期對于提取所用試劑以及物料比進行了預實驗，在實驗過程中得到結論如下:通過使用氯仿，正己烷，石油醚，乙酸乙酯等四個溶劑后發現對于羅勒子中不飽和脂肪酸的提取最有效的是正己烷。

3.2 通過實驗發現物料比對于提取率影響不大，在預實驗中考慮到提取溶液的后因素，處理確定使用固液比以1:10的比例進行。

3.3 由圖1以及圖2可知對于微波提取羅勒子中的弱極性成分最主要因素是功率，在功率超過400w以后在600w以及800w提取率成直線趨勢。其次對于提取率的影響條件為時間，在相同的功率條件下，通過單因素實驗發現在6分鐘以后提取率成下降趨勢。綜上所述得到最佳提取條件是在40℃，400w功率提取6分鐘。通過實驗發現，微波提取在對于植物內的有效成分的提取有著時間短，用料少，提取率高，提取方法簡單等優點，適合進行實驗提取，大大縮短時間時間，節省實驗精力。

3.4 從以上研究結果可知:新疆羅勒子 (Ocimum basilicum L)弱極性成分提取率為25.8%，其中不飽和脂肪酸含量達到88.41%。通過GC－MS檢測總共測出4個組分，根據Nist147譜庫及Wiley7譜庫進行檢索共鑒定出4個化合物，鑒定出的化合物含量占總弱極性成分的97.54%。鑒定出的4個化合物當中主要成分為，亞麻油酸含量為69.734%，亞油酸含量為18.677%，棕櫚酸含量為6.85%，硬酯酸含量為4.738%。其中生物體可將亞麻油酸轉換成多元不飽和脂肪酸，這些脂肪酸有助減少包括血糖、腦血管堵塞、關節、消化系統、部份頑疾與腦力衰退等問題。而且亞麻油酸還可以抑制發炎細胞，防止管道堵塞，降低膽固醇和甘油三酸脂水平。［23］通過實驗結果確定了微波提取對于種子中的不飽和脂肪酸的提取有著非常顯著的效果，對于以后維吾爾特有藥材中此類物質的提取工藝提供了切實可用的方法。

4 致謝

感謝中國科學院新疆理化技術研究所植物化學重點實驗室提供的實驗設備及條件。感謝理化技術研究所的領導及指導老師以及各位重點實驗室老師的幫助與指導。

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