脫氫紫堇堿的研究概況*

李 杏 蔣旭宏 黃小民△

（1.浙江中醫藥大學第一臨床醫學院，浙江 杭州 310006；2.浙江中醫藥大學附屬第一醫院，浙江 杭州 310006）

脫氫紫堇堿（DHC）又名去氫延胡索甲素，是從罌粟科紫堇屬植物延胡索塊莖中提取的一種季胺類生物堿。延胡索味苦、辛，性溫，歸心、肝、脾經，主要功效為活血、行氣、止痛，臨床多用于氣血瘀滯痛證。延胡索中被鑒定的生物堿已達20多種，DHC為其活性成分之一，臨床證實對胃潰瘍、冠心病、急性心肌梗死［1-2］均有較好療效，但在其他方面研究甚少，現就其近年實驗及臨床研究介紹如下。

1 藥理作用

1.1 心血管系統保護作用

1.1.1 抗缺氧及缺氧復氧后損傷 李澎等采用體外培養SD乳鼠心肌細胞，復制心肌細胞缺氧復氧模型，實驗發現低質量濃度DHC抗缺氧作用明顯，質量濃度超過6.3 mg/L則降低心肌細胞活力，12.5～50 mg/L時作用顯著。在缺氧復氧模型中，DHC質量濃度依賴性地抑制缺氧復氧后心肌細胞內LDH的漏出，在5、2.5、1.25 mg/L質量濃度時作用顯著，實驗結果表明DHC是一種高效低毒單體，可安全應用于臨床［3］。孟紅旭研究結果顯示DHC能濃度依賴性抑制L型鈣通道的開放，濃度為 100 μmol/L 時抑制率為（28.6±8.5）%［4］。心肌細胞鈣通道有T、L兩型，而L型通道是主要調控心肌細胞Ca2+內流的調控因子［5］，該實驗提示DHC可能是通過抑制L型鈣通道的開放，減少鈣超載，達到減少心肌缺氧復氧損傷的作用。

1.1.2 保護心肌 近年來研究發現Ca2+與心肌細胞低氧損傷密切相關，應用鈣通道阻滯劑可顯著減輕心肌細胞的損傷，說明心肌細胞

內鈣超載在心肌細胞低氧損傷中起著重要的作用。趙昕運用離體豚鼠心肌Langendorff法灌注，熒光指示劑Fure-2技術監測心肌細胞Ca2+濃度，證實DHC不僅降低正常狀態下心肌細胞內Ca2+濃度，并且顯著減緩缺氧400～500 s時心肌細胞內Ca2+的增加［6］。實驗中與經典的鈣通道阻斷劑維拉帕米相比較，DHC效果略差，但安全性好作用緩和持久。趙昕等進一步從分子水平研究DHC保護心肌細胞的分子機制，實驗觀察到DHC降低正常狀態及缺氧時ryanodine受體的mRNA的轉錄水平及蛋白表達，增加正常狀態及缺氧時集鈣蛋白（CASQ）的轉錄水平及蛋白表達［7］。RYR2是位于心肌肌漿網上的一種鈣釋放通道，是引起細胞內Ca2+釋放從而引起細胞內Ca2+濃度增高的主要機制。CASQ則是一種對Ca2+高容量、低親和力的貯存蛋白，貯存能力強。實驗結果表明DHC通過上述分子機制，從減少心肌細胞內Ca2+釋放及增加胞漿內游離Ca2+的再攝取兩方面，降低細胞內Ca2+濃度，從而保護心肌細胞，提高抗缺血缺氧能力。

1.1.3 擴張冠狀動脈 現代藥理研究表明DHC可顯著擴張冠狀動脈、增加冠脈血流量，從而改善心肌缺血缺氧狀態。中藥制劑可達靈片主要藥理成分是DHC和延胡索乙素，臨床常用于治療冠心病、心絞痛及急性心肌梗死。王五保等應用可達靈片治療不穩定型心絞痛患者42例，臨床發現DHC具有擴張冠狀動脈，增加冠脈血流量，減少心肌耗氧量的作用，是從機制上消除心絞痛的病因，副作用少，安全性高［8］。

1.1.4 抑制血小板聚集作用 基礎研究表明cAMP是一種血小板聚集抑制劑，郭繼東等分別采用0.45、0.9 g/L的DHC體外給藥，觀察對家兔血小板cAMP的影響，發現低劑量組無效，而高劑量組顯著增加血小板cAMP的濃度，認為這可能是DHC抑制血小板聚集的機制之一［9］。丁順等進一步研究發現DHC不僅增加體外兔血小板cAMP含量，還可降低兔血小板cGMP含量，效應具有劑量依賴性［10］?；A研究表明cGMP增加血小板聚集，和cAMP一起是調節機體多種功能的共同體。故作者認為DHC可能是通過提高血小板內cAMP的含量、降低cGMP含量抑制血小板聚集。

1.2 抗炎作用 炎癥反應中活化的巨噬細胞能誘導IL-1、IL-6等促炎癥因子的產生，Ishiguro K等研究發現DHC能有效地減少由脂多糖誘導產生的原始巨噬細胞及巨噬細胞趨化因子RAW264.7細胞，誘導巨噬細胞ATP酶的消耗，并且抑制線粒體細胞膜電位的抬高及IL-1、IL-6的產生。但對非脂多糖誘導的巨噬細胞及膜電位無影響。作者認為DHC可能是通過抑制線粒體膜電位的抬高這一特殊機制來抑制脂多糖誘導的巨噬細胞及促炎癥因子的產生［11］。Kubo M等通過動物實驗亦發現DHC能抑制醋酸所致小鼠血管通透性增加，減輕大鼠急性足腫脹，提示DHC對急慢性炎癥均有較好的治療作用［12］。

1.3 抗過敏作用 Matsuda H建立Ⅰ-Ⅳ型超敏反應大鼠模型，以0.5 mmol/kg DHC口服給藥可以48 h抑制皮膚被動過敏反應，對抗原誘導的組胺釋放有明顯抑制作用，顯著抑制Ⅰ型超敏反應；在Ⅳ型超敏反應模型中，DHC有效抑制硝基氯苯接觸性皮炎的初始階段和效應階段。實驗發現DHC對Ⅱ型超敏反應無作用，較弱抑制Ⅲ型超敏反應［13］。

1.4 抗腫瘤作用 研究人員發現自然植物提供了最有價值的復合物作為抗腫瘤的特異活性物，其機制可能是通過通路或者結構修飾來進行腫瘤治療［14］。Cui X等運用電噴霧電離質譜技術，發現DHC能與原癌基因c-myb的啟動子結構區的G四鏈體（G-quadruplex）高度結合增加G-quadruplex結構的穩定性，競爭性超過（4-N-甲基吡啶基）卟啉。G-quadruplex結構能阻止端粒延長替代機制，從而達到抗癌作用［15］。Zengtao Xu研究發現DHC具有抗腫瘤細胞增殖，誘導人乳腺癌細胞MCF-7的凋亡。實驗中DHC呈劑量依賴性的抑制MCF-7細胞增殖，提示DHC有一定的細胞毒性，使用200 μmol/L的DHC處理MCF-7細胞24 h，發現細胞活力下降40%，確定DHC具有中等細胞毒性，進一步應用增強細胞核染色技術證明該凋亡是由DHC導致的。實驗深入研究發現DHC減少Bcl-2蛋白的表達而增加Bax蛋白的表達，誘導Caspase-7、Caspase-8的活化而不影響Caspase-9，并且誘導DNA修復酶PARP的裂解，表明DHC可能通過上述機制抑制MCF-7細胞增殖［16］。

1.5 其他作用 近年有研究發現DHC是一種有效的乙酰膽堿酯酶抑制劑，其半數抑制濃度為 0.62 μmol/L［17］。Satou研究表明DHC能有效抑制犬弓首線蟲第2期幼蟲的運動，是一潛在的待開發驅蟲藥［18］。付彥君等實驗研究DHC非競爭性地抑制去甲腎上腺素、KCl及CaCl2誘導的大鼠離體胸主動脈平滑肌收縮，且DHC的松弛作用與血管內皮無關，其作用與經典鈣拮抗劑維拉帕米相似［19］。臨床中黃麗萍應用可達靈片聯合硝苯地平治療肢端動脈痙攣病，臨床觀察發現其主要成分DHC選擇性擴張血管，改善循環，緩解血管痙攣，對指端血管痙攣病有良好的治療效果，且無不良反應、毒副作用，安全有效［20］。胡云峰在觀察可達靈片治療緊張型頭痛的臨床療效時亦發現，以DHC為代表的延胡索季胺堿選擇性地擴張腦血管，改善腦血液循環，緩解腦血管痙攣［21］。

2 藥代動力學

林力等［22］采用 LC-MS／MS 法測定大鼠口服延胡索提取物后脫氫紫堇堿的藥代動力學，實驗按延胡索總生物堿125、250、500 mg/kg灌胃給藥，DHC由于中、低劑量組所能定量的數據點太少而無法繪制C-T曲線，因此只得到高劑量組的藥動學曲線，藥代參數顯示在體內達峰較快，體內表觀分布容積較大，但AUC值和Cmax值較低［22］。國外學者應用14C同位素標記法對DHC的體內吸收代謝進行研究，實驗中分別以小鼠、大鼠50 mg/kg口服或者6.8 mg/kg靜脈注射，檢測小鼠中血液質量濃度為0.5 μg/mL，大鼠中為0.06 μg/mL，放射自顯影顯示DHC主要分布消化道、肝臟和腎臟，大部分藥物通過糞便排泄，很少通過尿液和膽汁排泄，提示其具有顯著的肝臟首過消除。Zhiying Dong等研究醋炙和酒炙延胡索中延胡索乙素、DHC及原阿片堿在大鼠組織中的分布情況，結果表明在延胡索中DHC的Cmax及AUC0-24值與炮炙方法無關，在酒炙、醋炙及未炮炙中均無顯著差異，實驗測定DHC在肝臟中峰值濃度最高，其次為心、肺、脾、腎和大腦，其中腦干及大腦中Cmax大于其他腦組織。醋炙及酒炙顯著推遲DHC在心臟、腎臟、大腦、腦干及紋狀體中的達峰時間，醋炙延胡索顯著延長DHC在肝臟和腦干的平均駐留時間，縮短腎臟、肺、大腦及間腦中的時間；與醋炙相比較，酒炙則顯著延長DHC在腦干中的平均駐留時間，縮短在腎臟和紋狀體中的時間［23］。

3 毒副作用

DHC灌胃、腹腔靜注給藥，小白鼠LD50分別為（21.1±1.4）、（8.8±0.4）mg/kg； 大鼠予 DHC 5、10、15 mg/kg 腹腔注射連續20d；予DHC15、30、50mg/kg灌胃給藥連續30d；血常規、肝腎功能和重要臟器未見異常改變［24］。中藥延胡索及其生物堿不同劑型臨床應用中，一般劑量也未發現顯著毒副反應，延胡索粉末較大劑量（10～15 g）服用時，部分患者有嗜睡、頭暈、腹脹癥狀，長期服用個別患者出現谷丙轉氨酶升高，部分有藥物熱發生。

4 結 語

延胡索具有活血利氣之功，臨床應用廣泛，脫氫紫堇堿為其主要生物堿之一，近代臨床多用于心腦血管疾病的治療。藥理研究表明，DHC有明顯的抗心肌缺氧缺血作用，減少心肌細胞鈣超載，有效擴張冠狀動脈，抑制血小板聚集，改善循環、降低耗氧量，對心腦血管系統具有很好的保護作用，隨著研究的深入發現其還有抗過敏、抗炎及抗腫瘤、驅蟲等作用，為DHC更好地全面開發利用提供依據?，F代藥代動力學表明雖然DHC在體內Cmax值較低，但心臟的Cmax值高于其他組織，首過消除是在肝臟中。中醫傳統理論認為酒炙后可增強其行血祛瘀之力，并借酒之辛散通達全身。但實驗表明無論酒炙還是醋炙延胡索中DHC在組織中的Tmax值均比未炮炙高，而Cmax無明顯差異。提示DHC在臨床應用時藥物的炮制是無益的，不必拘泥于傳統中藥的炮制理論，應運用現代藥學知識及技術設備，深入研究藥理及作用機制、劑型選擇、生產工藝和給藥方法，開發安全有效的新產品，推動DHC的臨床應用。

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