復發性生殖器皰疹患者血清白細胞介素2水平及外周血T淋巴細胞亞群變化規律研究

陳 宏，王越海，朱萍芳，丁 娟，蔡 薇

（浙江省紹興市人民醫院皮膚科，浙江紹興312000）

·論 著·

復發性生殖器皰疹患者血清白細胞介素2水平及外周血T淋巴細胞亞群變化規律研究

陳 宏，王越海，朱萍芳，丁 娟，蔡 薇

（浙江省紹興市人民醫院皮膚科，浙江紹興312000）

目的觀察復發性生殖器皰疹（recurrent genital herpes，RGH）患者血清白細胞介素2（interleukin-2，IL-2）水平及外周血T淋巴細胞亞群的變化規律，探討RGH患者反復發作的免疫學機制。方法選擇100例RGH患者，采用酶聯免疫吸附測定方法檢測IL-2，采用流式細胞儀檢測T淋巴細胞亞群。對照組100例來自無感染性疾病的健康志愿者。結果RGH組血清IL-2水平明顯低于正常對照組（P＜0.01）。RGH組外周血清中的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T細胞表達較對照組明顯降低（P＜0.05）；而CD8+T細胞表達則明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。RGH組老年患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T細胞明顯低于青年患者（P＜0.05），而CD8+T細胞明顯高于青年患者（P＜0.05）。結論RGH患者血清中IL-2水平及外周血T淋巴細胞亞群水平異常，患者體內存在細胞免疫功能失調及免疫抑制現象。

皰疹，生殖器；白細胞介素2；T淋巴細胞亞群

引起生殖器和肛周部位發生潰瘍、水皰及紅斑等病變刺激［1］。若宿主出現內分泌紊亂、精神創傷或疲勞等，HSV-2可再激活并復制、繁殖，從而引起病情的反復發作。HSV-2感染患者的發病及復發機制可能與患者的免疫功能低下有關，為了解細胞免疫功能在RGH發病中的作用，本研究對100例RGH患者的血清白細胞介素2（interleukin-2，IL-2）水平及其外周血T淋巴細胞亞群表達水平進行了檢測比較，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2011年1月—2012年6月于我院皮膚性病科門診就診的復發性生殖器皰疹患者100例，均符合復發性生殖器皰疹的診斷標準［2］。入選標準包括HSV-DNA定性陽性及血清IgG抗體陽性；有非婚性接觸史或配偶感染史；1年內未使用過任何免疫調節劑。排除標準包括糖尿病、嚴重心肝腎疾病、高血壓、妊娠及哺乳期婦女、肺結核、器官移植、自身免疫缺陷者、腫瘤和有其他微生物感染病史者。RGH組100例，男性63例，女性37例，年齡19～71歲，平均（52.7±2.9）歲，其中年齡≤40歲（A組）25例，＞40～60歲（B組）36例，＞61歲（C組）39例。病程5個月～7年，平均（2.6±0.9）年。對照組100例來自無感染性疾病的健康志愿者，男性67例，女性33例，年齡20～70歲，平均（51.3±3.1）歲。2組性別、年齡差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 檢測方法

1.2.1 IL-2檢測：患者空腹，抽取靜脈血5mL，離心，取上層血清，-70℃下存于冰箱。采用常規酶聯免疫吸附測定法，按照Quantikine人IL-2免疫檢測試劑盒（美國RD公司）說明書操作。待反應終止后，即刻在波長405 nm處（Bio-RedBech-mark酶標儀）測定樣品中IL-2的吸光度A值，以標準品的濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，做相應的標準曲線，計算各樣品中的IL-2含量（ng/L）。

1.2.2 T淋巴細胞亞群檢測：患者空腹情況下，抽取靜脈血2mL，加入抗凝劑肝素鈉。精密取l00μL樣品，加入20μL相應抗體，上下充分混勻，25℃下，暗處孵育20min，吸取500μL紅細胞裂解液，加入充分振蕩混勻，室溫靜置20min（不可移動），再加入500μL PBS緩沖液，充分搖勻，再次靜置20min，最后上流式細胞儀檢測。

1.3 統計學方法：應用SPSS12.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以±s表示，分別采用t檢驗、F檢驗和q檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 IL-2水平比較：檢測結果顯示，RGH組血清IL-2為（416.3±149.9）ng/L，對照組為（1 186±183.4）ng/L，RGH組明顯低于正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。同時發現，發作期患者血清中IL-2為（418.3±151.2）ng/L，略高于緩解期患者的（386.0±191.3）ng/L，但差異無統計學意義（P＞0.05）。

2.2 T淋巴細胞亞群比較：通過T淋巴細胞亞群檢測顯示，RGH組外周血的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T細胞表達較對照組明顯降低，而CD8+T細胞的表達則明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。RGH組老年患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T細胞明顯低于青年患者（P＜0.05），而CD8+T細胞明顯高于青年患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1，2。

表1 RGH組與對照組的T淋巴細胞亞群檢測結果比較Table 1 Detection of T lymphocyte subsets in RGH group and control gorup （n=100，±s）

表1 RGH組與對照組的T淋巴細胞亞群檢測結果比較Table 1 Detection of T lymphocyte subsets in RGH group and control gorup （n=100，±s）

*P＜0.05 vs control group by t test

Groups CD3+（％）CD4+（％）CD8+（％）CD4+/CD8+RGH 53.06±12.31*30.98±7.16*32.72±2.73*0.96±0.18*39±0.19 Control 66.25±5.97 35.27±2.06 24.89±6.39 1.

表2 RGH組不同年齡患者T淋巴細胞亞群檢測結果比較Table 2 Detection of T lym phocytes subsetsin patientsw ith different age group of RGH （n=100，±s）

表2 RGH組不同年齡患者T淋巴細胞亞群檢測結果比較Table 2 Detection of T lym phocytes subsetsin patientsw ith different age group of RGH （n=100，±s）

*P＜0.05 vs A group by q test

Groups n CD3+（％）CD4+（％）CD8+（％）CD4+/CD8+A 25 56.13±13.01 32.38±8.04 30.81±2.32 1.16±0.25 B 36 54.05±11.84 30.99±8.06 32.06±2.86 0.98±0.19 C 39 52.25±10.97*29.27±7.06*33.89±2.39*0.93±0.16*

3 討 論

由HSV-2感染引起的生殖器皰疹發生率每年都在增長，特別是發達國家。美國疾病預防控制中心的最新統計顯示，目前美國總人口中有23％攜帶HSV-2病毒，10年內增加了1/3，其中女性患者比例為40％～50％，男性為30％～40％。在日本，婦女性傳播疾?。╯exually transmitted diseases，STD）患者中至少有一半為生殖器皰疹患者。據世界衛生組織不完全估計，全球每年新發生殖器皰疹病例為2 000萬，位居STD的第4位；同時，該病也已在我國存在并在STD中占有一定的比例［3］。機體對生殖器皰

疹的特異性免疫主要是細胞免疫，因此推測，RGH患者可能存在細胞免疫缺陷［4］。

IL-2主要由活化的T淋巴細胞分泌，并刺激T細胞表面表達IL-2的受體，而IL-2結合該受體，活化T淋巴細胞，最終發揮抗病毒作用［5］。同時，IL-2還是機體免疫應答過程中重要的免疫增強因子，可直接促使自然殺傷細胞、巨噬細胞及LAK等細胞的增殖，活化的自然殺傷細胞進一步分泌功能細胞因子腫瘤壞死因子-γ，其可殺傷靶細胞，達到免疫調節的功效［4］。另一靶細胞LAK細胞為淋巴細胞激活的殺傷細胞，它來源于NK細胞，在高劑量IL-2誘導下，能夠殺傷對NK細胞不敏感的靶細胞，增強了該類細胞溶解和破壞病毒感染細胞能力［6］。本研究顯示，RGH組血清IL-2水平明顯低于正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）；同時，發作期患者的IL-2水平略高。提示RGH患者體內IL-2表達水平降低，可能通過上述幾個途徑誘導Thl型細胞免疫反應減弱，并抑制HSV-2的復制能力，降低機體的清除病毒能力。推測這可能是生殖器皰疹病情反復發作的原因之一。

T淋巴細胞亞群在機體免疫調節系統中占據著重要的位置，正常情況下，T淋巴細胞亞群之間相互調節影響，在數量和功能上，維持一定的平衡狀態，保證機體發揮正常的免疫功能［7-8］。但是，當T淋巴細胞亞群的數量或者功能發生異常、機體受到病毒抗原刺激時，機體免疫功能的平衡狀態被打破，對外界病原微生物入侵的防御能力便大大降低［9］。本研究RGH組外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T細胞的表達較正常對照組顯著降低，而CD8+T細胞表達則明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。提示RGH患者受到皰疹病毒感染后，活化并產生了細胞毒性T細胞，機體的免疫系統平衡狀態被打破，最終可能導致生殖器皰疹病情反復發作［10］。本研究RGH組不同年齡患者之間T細胞亞群數量也存在一定差別，RGH組老年患者的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T細胞明顯低于青年患者（P＜0.05），而CD8+T細胞明顯高于青年患者（P＜0.05）。說明老年人機體免疫力下降，更易患復發性生殖器皰疹，而青年人機體免疫能力相對較強，復發性生殖器皰疹的幾率相對較小。

［1］莫翔，韋又銘.復發性生殖器皰疹患者免疫細胞功能研究進展［J］.醫學綜述，2012，18（15）：132-133.

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（本文編輯：劉斯靜）

EXPRESSION OF INTERLEUKIN-2 AND T LYMPHOCYTE SUBSETS IN PERIPHERAL BLOOD OF PATIENTSW ITH RECURRENT GENITAL HERPES

CHEN Hong，WANG Yuehai，ZHU Pingfang，DING Juan，CAIWei

（Department of Dermatology，Shaoxing People's Hospital，Zhejiang Province，Shaoxing 312000，China）

Objective To detect the expression of interleukin-2（IL-2）and T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with recurrent genital herpes（RGH），and to discuss the immunologicalmechanism of repeated recurrent genital herpes.MethodsOne hundred cases of RGH patientswere selected as research objects.IL-2 levels were detected by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA），and the T lymphocyte subsets were detected by flow cytometry.Another 100 healthy volunteerswithout infectious diseases served in control group.ResultsThe serum IL-2 level of RGH group was significantly lower than that of normal control group（P＜0.01）；Peripheral serum CD3+，CD4+，CD4+/CD8+T expression in RGH group were significantly lower than those of the control group（P＜0.05）；while the CD8+T cell expression was significantly higher than thatof the control group（P＜0.05）；peripheral blood CD3+，CD4+，CD4+/CD8+T cells of elderly patients in RGH group was significantly lower than thatof young patient（sP＜0.05），and CD8+T cellswas significantly higher than that of young patients（P＜0.05）.ConclusionThe IL-2 and T lymphocyte subsets of patients with RGH were abnorma1.There are cellular immune dysfunction and immune suppression in the patientswith RGH.

herpes，genital；interleukin-2；T lymphocytes

R752.1

A

1007-3205（2013）06-0664-03

2012-11-19；

2013-01-09

陳宏（1968-），男，浙江紹興人，浙江省紹興市人民醫院副主任醫師，醫學學士，從事皮膚疾病診治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.06.016

復發性生殖器皰疹（recurrent genital herpes， RGH）是一種主要由單純皰疹病毒（herpesvirus 2，HSV-2）感染所致的疾病，發病率逐年上升。HSV-2病毒侵入人體后，潛伏在骶神經根區，通過與皰疹病毒感染患者性接觸傳染，生殖器皮膚黏膜發生感染，