殼聚糖對克氏原螯蝦生長、血清相關免疫因子、肌肉成分和消化酶的影響

任秀芳,周鑫,趙朝陽,水燕,徐增洪,沈懷舜,張萍,柏愛旭

(1.上海海洋大學水產與生命學院,上海201306;2.中國水產科學研究院淡水漁業研究中心,江蘇無錫214081)

殼聚糖對克氏原螯蝦生長、血清相關免疫因子、肌肉成分和消化酶的影響

任秀芳1、2,周鑫2,趙朝陽2,水燕2,徐增洪2,沈懷舜2,張萍1、2,柏愛旭1、2

(1.上海海洋大學水產與生命學院,上海201306;2.中國水產科學研究院淡水漁業研究中心,江蘇無錫214081)

以體質量為 (21.55±1.62)g的克氏原螯蝦Procambarus clarkii為研究對象,投喂殼聚糖添加量分別為0(對照)、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、3.0%的飼料,研究殼聚糖對克氏原螯蝦生長、血清相關免疫因子、肌肉成分和消化酶活性的影響。試驗共進行60 d。結果表明:1.0%殼聚糖添加組試驗蝦的特定生長率顯著高于其他各組 (P＜0.05),1.5%殼聚糖添加組試驗蝦的死亡率和蛻殼死亡率均最高,且顯著高于對照組 (P＜0.05);1.0%和2.0%殼聚糖添加組試驗蝦血清中的酚氧化酶 (PO)活性顯著高于對照組(P＜0.05),各添加組血清中堿性磷酸酶 (ALP)活性均顯著高于對照組 (P＜0.05);除1.0%、2.0%殼聚糖添加組外,其他添加組血清中谷丙轉氨酶 (ALT)活性均低于對照組;各添加組血清中谷草轉氨酶(AST)的活性均顯著低于對照組 (P＜0.05);除2.0%殼聚糖添加組外,其他添加組試驗蝦肌肉粗蛋白質含量較對照組均低;除2.0%殼聚糖添加組外,其他添加組粗脂肪含量較對照組均高,其中1.0%、1.5%和3.0%添加組顯著高于對照組 (P＜0.05);僅1.0%添加組肌肉灰分顯著低于對照組 (P＜0.05);僅2.0%添加組肌肉水分含量顯著高于對照組 (P＜0.05);1.0%添加組試驗蝦肝胰腺中胰蛋白酶和脂肪酶活性以及腸道中的脂肪酶活性顯著高于對照組 (P＜0.05);1.5%添加組試驗蝦肝胰腺和腸道中的淀粉酶活性均顯著高于對照組 (P＜0.05)。研究表明,在本試驗條件下,建議成蝦飼料中殼聚糖的添加量為0.5% ～1.5%,殼聚糖對克氏原螯蝦起到一定的免疫保護作用,并能增強其消化生理機能。

克氏原螯蝦;殼聚糖;酚氧化酶;消化酶;肌肉成分

殼聚糖是由甲殼素脫鈣、去除脂肪和蛋白后脫乙?；玫降囊环N帶正電荷的高分子堿性多糖。通常將脫乙酰度為55%以上的甲殼素稱作殼聚糖,由于殼聚糖成纖成膜性能好,能與動物的器官、組織和細胞有良好的生物相容性,沒有免疫原性,并具有生物可降解性和可被吸收利用性等特點,在醫藥、環保、農業、飼料、水產等領域已被廣泛應用。在水產養殖中,殼聚糖作為促生長劑添加到羅非魚Oreochromis niloticus飼料中,通過提高羅非魚腸道和肝胰腺的蛋白酶、淀粉酶和肝臟極低密度脂蛋白的活性,增強機體對營養物質的消化吸收和脂肪轉化[1],從而達到促生長的作用。同時,殼聚糖作為免疫增強劑,可保護鮭科魚類免遭細菌性疾病的侵染[2-3];增強烏頰魚SparusaurataL.的呼吸暴發和吞噬細胞活性[4-5];可在短期內提高感染了溶藻弧菌的凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei的存活率、血細胞數、呼吸暴發和吞噬細胞活性[6]。目前,殼聚糖用在經濟甲殼動物中的研究報道較少。本研究中,通過在克氏原螯蝦Procambarus clarkii基礎飼料中添加一定量的殼聚糖,并檢測克氏原螯蝦攝食60 d后相關免疫因子的活性、消化酶活性和肌肉營養成分的變化,以探討殼聚糖對促進克氏原螯蝦生長及增強非特異性免疫功能的影響,旨在為殼聚糖在蝦蟹養殖與飼料生產中的應用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用克氏原螯蝦取自江蘇盱眙恒旭科技有限公司,樣品蝦用基礎飼料馴化,暫養10 d后用于試驗。

阿拉丁?殼聚糖購自上海晶純實業有限公司,為白色粉末,其相對分子質量為1 000 000,脫乙酰度≥95%,水分＜8%,灰分＜1%。

試驗用飼料配方及營養成分見表1。

表1 基礎配方的原料配比及營養水平(干物質基礎)Tab.1 Ingredient and nutrition level of basal diet(dry matter) w/%

將試驗原料粉碎,過60目篩,混合均勻,制成基礎飼料。在基礎飼料中分別添加質量分數為0、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、3.0%的殼聚糖,制成6種試驗飼料,飼料配方組分用糊精調平。飼料顆粒直徑為2 mm,自然曬干,置于-15℃下冷凍保存。

1.2 方法

1.2.1 試驗設計 試驗分為6組,每組設3個平行。取體色正常、大小均勻、附肢完好、健康活潑、體質量為 (21.55±1.62)g的克氏原螯蝦,隨機分配到18個水族箱 (100 cm×50 cm×50 cm)中,每箱放蝦15只。水族箱水深15～20 cm,放入樹枝和易拉罐作為隱蔽物。試驗開始前和結束后均饑餓1 d,每日8:00和19:00投喂,投喂量為蝦體質量的2% ～3%,根據攝食情況加以調整。試驗期間,保持溶解氧≥6.0 mg/L,pH為7.5～8.0,水溫為 (22±1)℃。飼養期為60 d,用增氧泵連續充氣,每天換充分曝氣的自來水1/3～1/2,用皮管虹吸出殘餌和排泄物。

1.2.2 樣品的采集與制備

1)生長指標的測定與計算。試驗結束后用電子天平稱量克氏原螯蝦的體質量,試驗過程中記錄各組蝦的死亡數和蛻殼死亡數。生長指標的計算公式如下:

特定生長率(%/d)=100×[ln(末均體質量)-ln(初均體質量)]/飼養天數,

死亡率(%)=100×(死亡蝦總數/蝦總數),

蛻殼死亡率(%)=100×(蛻殼死亡數/蝦總數)。

2)血清的制備。試驗結束后,從各組隨機選取克氏原螯蝦5尾,用濾紙吸干蝦體水分,用1 mL的一次性注射器從蝦的頭胸甲后部刺入心臟,抽取血液,放入離心管內,置于冰箱 (4℃)中過夜,用冷凍離心機以5 000 r/min離心10 min,取上清液放入冰箱 (-20℃)中備用,24 h內測定。用邁瑞全自動生化分析儀BS-400測定血清中堿性磷酸酶、谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶的活性。

3)粗酶液的制備。試驗結束后,從各試驗組隨機選取克氏原螯蝦6尾,用濾紙吸干蝦體水分,取其肝胰腺和全腸,用去離子水清洗腸道內容物。每兩尾蝦的部分肝胰腺或全腸作為一個樣本。將每個樣本稱重,置于玻璃勻漿器中,用移液器移取9倍于組織塊的預冷勻漿介質 (pH 7.4,0.01 mol/L Tris-HCl,0.000 1 mol/L EDTA-2Na,0.01 mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液),充分勻漿后,用低溫低速離心機以2 000 r/min離心10 min,取上清液即為粗酶液,于4℃下保存,24 h內測定。

4)肌肉樣品的采集。將采集完血液和肝腸后的克氏原螯蝦去除頭胸甲和背甲,取蝦肉剪碎,混合均勻,置于冰箱 (-20℃)中保存備用。

1.2.3 酚氧化酶的測定 綜合王建國等[7]和Huang等[8]的方法,以0.1 mol/L的磷酸鉀鹽緩沖液 (將61.9mL 0.1mol/L KH2PO4溶液和38.1mL 0.1 mol/L K2HPO4溶液混合,稀釋至1 L,調pH為6.6)為溶劑,配制濃度為3 mg/mL的L-DOPA (Sigma公司產品)溶液。室溫下將40μL血清和1 960μL L-DOPA溶液混勻,置于1 cm光徑的比色杯中,準確計時6 min時,于490 nm波長下測定吸光值OD,同時取2 mL L-DOPA溶液作為空白測定其吸光值OD0。酚氧化酶活性定義為:每毫升樣品每分鐘吸光度值增加0.001為一個酶活力單位(U)。

1.2.4 消化酶的測定 胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性均采用試劑盒 (南京建成生物工程研究所產品)測定[9]。于37℃水浴鍋中水浴,用紫外分光光度計讀取OD值。

于253 nm波長下讀取胰蛋白酶反應體系中的OD值。胰蛋白酶活性定義為:在37℃條件下,每毫克蛋白中含有的胰蛋白酶每分鐘使吸光度變化0.003即為一個酶活力單位 (U)。

于660 nm波長下讀取淀粉酶反應體系中的OD值。淀粉酶活性定義為:7℃條件下,每毫克組織蛋白與底物作用30 min,水解10 mg淀粉為一個淀粉酶活力單位 (U)。

于420 nm波長下讀取脂肪酶反應體系中的OD值。脂肪酶活性定義為:37℃條件下,每毫克組織蛋白與底物作用1 min,每消耗1μmol底物為一個酶活力單位 (U)。

1.2.5 肌肉常規營養成分的測定 采用常壓干燥法測定水分含量,采用凱氏定氮法測定肌肉粗蛋白質含量,采用索氏抽提法測定粗脂肪含量,采用干灰化法測定灰分含量。

1.3 數據處理

試驗數據均用平均值±標準誤表示,用 SPSS 17.0軟件對試驗數據進行單因素方差分析 (Oneway ANOVA),用Duncan法進行多重比較,顯著性水平設為0.05。

2 結果與分析

2.1 克氏原螯蝦攝食不同含量殼聚糖飼料時的特定生長率和死亡率

從表2可見:試驗結束時,各組克氏原螯蝦平均體質量均無顯著性差異 (P＞0.05);各組試驗蝦的特定生長率、死亡率、蛻殼死亡率隨著殼聚糖添加量的增加均呈先升高后降低的趨勢,其中添加水平為1.0%的組試驗蝦特定生長率最高,顯著高于除0.5%添加組外的其余各組 (P＜0.05);添加水平為0.5%的組試驗蝦死亡率最低,顯著低于其余各組 (P＜0.05);添加水平為1.5%的組試驗蝦蛻殼后死亡率最高,顯著高于其余各組 (P＜0.05)。

表2 殼聚糖對克氏原螯蝦特定生長率和死亡率的影響Tab.2 Effects of dietary chitosan supplemention on specific grow th rate and mortality rate in red swamp crayfish Procambarus clarkii

2.2 克氏原螯蝦攝食不同含量殼聚糖飼料時血清中的相關免疫因子

從表3可見:飼料中殼聚糖添加水平為1.0%和2.0%的組試驗蝦血清中酚氧化酶 (PO)活性均較高,顯著高于對照組 (P＜0.05),而添加水平為0.5%、3.0%的組PO活性顯著低于對照組和其余添加組 (P＜0.05);殼聚糖添加組試驗蝦血清中的堿性磷酸酶 (ALP)活性均顯著高于對照組(P＜0.05),其中添加水平為0.5%、2.0%的組ALP活性均較高;添加水平為2.0%的組血清中谷丙轉氨酶 (ALT)活性最高,顯著高于對照組(P＜0.05),其中添加水平為1.0、1.5、3.0的組ALT活性均顯著低于對照組 (P＜0.05);殼聚糖添加組試驗蝦血清中的谷草轉氨酶 (AST)活性均顯著低于對照組 (P＜0.05)。

表3 殼聚糖對克氏原螯蝦血清中相關非特異性免疫因子的影響Tab.3 Effects of dietary chitosan supplemention on non-specific immune factors in red swamp crayfish Procambarus clarkiiU/mL

2.3 克氏原螯蝦攝食不同含量殼聚糖飼料時的肌肉營養成分

從表4可見:對照組試驗蝦肌肉的粗蛋白質含量最高,除與殼聚糖添加水平為2.0%的組差異不顯著 (P＞0.05)外,與其他添加組均有顯著性差異 (P＜0.05);添加水平為1.0%、1.5%和3.0%的組試驗蝦肌肉粗脂肪含量均較高,且顯著高于對照組 (P＜0.05),分別較對照組提高了7.69%、7.69%和10.26%;添加水平為1.0%的組試驗蝦肌肉灰分含量最低,且顯著低于對照組 (P＜0.05),較對照組降低了3.57%,其余添加組均與對照組無顯著性差異 (P＞0.05);添加水平為0.5%、2.0%的組試驗蝦肌肉水分含量均較高,且顯著高于對照組 (P＜0.05)。

表4 殼聚糖對克氏原螯蝦肌肉營養成分的影響 (濕質量)Tab.4 Effects of dietary chitosan supp lem ention on muscle composition in red swam p crayfish Procambarus clarkii w/%

2.4 克氏原螯蝦攝食不同含量殼聚糖飼料時肝胰腺和腸道中的消化酶活性

從表5可見:殼聚糖添加組試驗蝦肝胰腺中的胰蛋白酶活性均顯著高于對照組 (P＜0.05),其中添加水平為1.0%的組胰蛋白酶活性最高;添加水平為0.5%、1.5%和2.0%的組試驗蝦腸道中的胰蛋白酶活性均顯著高于對照組 (P＜0.05),添加水平為1.0%、3.0%的組胰蛋白酶活性均顯著低于對照組 (P＜0.05);添加水平為1.5%的組試驗蝦肝胰腺和腸道中的淀粉酶活性均最高,且顯著高于對照組 (P＜0.05);添加水平為1.0%的組試驗蝦肝胰腺和腸道中的脂肪酶活性均最高,且顯著高于對照組 (P＜0.05)。

3 討論

3.1 殼聚糖對克氏原螯蝦特定生長率和死亡率的影響

本試驗中,克氏原螯蝦的特定生長率呈先升高后降低的趨勢,以1.0%殼聚糖添加組最高,其次是0.5%添加組。各組特定生長率的變化不明顯,原因是所用試驗蝦均為成蝦 (殼聚糖對克氏原螯蝦的生長是否存在影響,用幼蝦進行試驗才能說明,另文報道)。當殼聚糖添加水平為1.5%時,死亡率顯著高于其他各組 (除2.0%添加組外)。添加水平為0.5% ～2.0%時,都存在蛻殼后軟殼蝦的死亡現象,當添加水平為3.0%時死亡率與對照組相同,均為0。有報道表明,甲殼動物可利用飼料中的甲殼素,使其在蛻殼前期幾丁質酶達到最高[10],從而促成蛻殼生長;而殼聚糖是甲殼素脫乙?；蟮亩嗵穷惍a物,本試驗結果表明,一定量的殼聚糖被克氏原螯蝦吸收利用后可促進其幾丁質酶的分泌,使其順利蛻殼生長。飼料中殼聚糖添加水平為0.5% ～2.0%時,克氏原螯蝦蛻殼后死亡率呈先升高后降低的趨勢,其中添加水平為1.5%時克氏原螯蝦蛻殼率最高,同時死亡率也高于其他各組,這與蛻殼后的軟殼蝦抵抗力弱,易受到其他蝦的干擾和殘食有關。而對照組和3.0%添加組的克氏原螯蝦死亡率為0,這可能與對照組未添加殼聚糖,對克氏原螯蝦的蛻殼促進作用小,蛻殼少,受到環境和其他蝦的干擾少有關;3.0%添加組則可能是由于過量添加的殼聚糖吸附了飼料中的蛋白質,導致克氏原螯蝦消化吸收能力下降[11-12],從而抑制了其蛻殼,使自殘率降低?？紤]到殼聚糖對幾丁質酶分泌有促進作用,建議在克氏原螯蝦成蝦飼料配方中將殼聚糖的添加水平控制在0.5% ～1.5%。

表5 殼聚糖對克氏原螯蝦肝胰腺和腸道中消化酶活性的影響Tab.5 Effects of dietary chitosan supplemention on digestive enzyme activities in hepatopancreas and intestine in red swamp crayfish Procambarus clarkiiU/mg

3.2 殼聚糖對克氏原螯蝦血清中相關免疫因子的影響

本研究中,1.0%～2.0%殼聚糖添加組克氏原螯蝦的PO活性較對照組均有所升高,其中2.0%添加組的PO活性顯著高于其他各組,說明殼聚糖可能會激活克氏原螯蝦的酚氧化酶原 (proPO)系統,proPO被激活后產生一種酶[13],即酚氧化酶。已有研究表明,甲殼動物的PO參與宿主的防御反應,一些多糖類物質能激活proPO活化系統中的絲氨酸蛋白酶,從而活化PO[14-16]。ALP是甲殼動物機體防御能力的重要組成部分,也是吞噬細胞殺菌的物質基礎[17-18],本試驗中,殼聚糖添加組試驗蝦血清中的ALP活性均顯著高于對照組,3.0%添加組的ALP活性顯著低于其他添加組,但仍比對照組高,這與陳國福等[19]用A3α肽聚糖 (PG)拌餌投喂凡納濱對蝦60 d時,飼喂0.05%PG的對蝦血清中的ALP活性最高,而0.10%PG組的ALP活性下降的結論相類似。從本試驗結果看出, 1.0%～2.0%添加組的PO和ALP的活性均比較高,對克氏原螯蝦的免疫增強效果較好,說明殼聚糖可能會提高克氏原螯蝦抵抗外界病原菌的防御能力,降低死亡率。而1.0% ～2.0%添加組克氏原螯蝦的死亡率卻較對照組高,這可能與該添加量具有刺激幾丁質酶的分泌,克氏原螯蝦蛻殼率較高,蛻殼后軟殼蝦被殘食有關。

本試驗飼料中添加殼聚糖對克氏原螯蝦血清中ALT和AST活性的影響顯著,除殼聚糖添加量為2.0%的試驗組ALT顯著高于對照組以及0.5%添加組ALT與對照組無顯著性差異外,其他添加組克氏原螯蝦血清中的ALT和AST均顯著低于對照組。ALT和AST是廣泛存在于動物的細胞膜、細胞質和線粒體中的重要氨基酸轉氨酶,常用來作為脊椎動物以及對蝦肝胰腺功能的評估因子[20]。本試驗結果表明,飼料中添加殼聚糖可能對克氏原螯蝦的肝胰腺等組織起到了一定的保護作用,而2.0%添加組的ALT較高,可能是試驗中操作誤差造成的。

3.3 殼聚糖對克氏原螯蝦肌肉營養成分的影響

一般來說,魚肉水分含量高,則粗蛋白質、粗脂肪含量將會減少,魚肉品質就差;反之,魚肉水分含量低,則粗蛋白質、粗脂肪含量就高,魚肉品質就好[21]。本試驗結果表明,殼聚糖添加組肌肉水分和灰分含量的變化不大,但蛋白質含量略有下降,脂肪含量卻相應升高,這與華雪銘等[22]在暗紋東方鲀飼料中單獨添加殼聚糖、益生菌和混合物的試驗組蛋白質含量普遍升高,脂肪含量普遍降低的結論不相一致。出現上述差異的原因是:殼聚糖的葡聚糖胺鏈中帶有4價銨離子,具有較高的陰離子交換能力,從而使帶正電性的殼聚糖能與帶負電性的膽汁酸結合并排出體外,阻止膽汁酸循環,這樣可使食物中的脂肪不被乳化,減少脂肪的消化吸收,從而減少脂肪的沉淀積累[23]。魚類屬于脊椎動物,食物中的脂肪由膽囊分泌的膽汁酸進行消化,殼聚糖與脊椎動物膽囊分泌的膽汁酸結合阻礙了脂肪的消化,進而降低了魚體脂肪的含量。而克氏原螯蝦為無脊椎動物,食物中的營養物質由肝胰腺及消化道分泌的消化酶進行消化,本試驗中殼聚糖添加組克氏原螯蝦肌肉中的脂肪含量升高,與添加殼聚糖后克氏原螯蝦的脂肪酶升高相符合,說明殼聚糖能降低魚類肌肉脂肪含量的結論可能不適用于無脊椎動物。

3.4 殼聚糖對克氏原螯蝦肝胰腺及腸道中消化酶的影響

本試驗結果表明,各殼聚糖添加組消化酶活性大體上隨著殼聚糖添加量的增加呈現先升高后降低的趨勢,1.0%添加組克氏原螯蝦肝胰腺中的胰蛋白酶活性最高,較對照組提高了161.38%;1.5%和2.0%添加組腸道中的胰蛋白酶活性均較高,分別較對照組提高了33.72%和43.69%;1.0%組試驗蝦肝胰腺和腸道中的脂肪酶活性分別較對照組提高了62.54%和137.99%;1.5%添加組蝦肝胰腺和腸道中的淀粉酶活性均最高,分別較對照組提高了26.92%和2.63%,說明殼聚糖提高了克氏原螯蝦的消化酶活性。這與華雪銘等[22]在暗紋東方鲀幼魚的飼料中添加0.2%的殼聚糖能顯著提高腸道淀粉酶活性的結果相似,原因是殼聚糖被試驗動物攝取后,可能調節了腸道微生態平衡[24],推測殼聚糖被克氏原螯蝦攝入,經口腔、胃等到達腸道后,可以選擇性地增殖某些有益菌,這些有益菌能促進腸道完整性,提高腸道自身分泌消化酶的功能。同時又可以在腸道內合成維生素和氨基酸,達到提高水產動物的營養,從而使殼聚糖起到間接提高消化酶活性的作用。消化酶活性的變化與PO、ALP、轉氨酶的變化相符合,隨著殼聚糖添加量的增加,消化酶活性有所上升,PO、ALP活性也升高,轉氨酶的活性則相應降低?？梢钥闯?消化酶活性升高,提高了克氏原螯蝦對營養物質的利用率,促進了免疫因子的活化,增強了機體抵御外界不利因子的能力。

上述試驗結果表明,在成蝦飼料中添加0.5%～1.5%的殼聚糖,并不會影響蝦肉的品質,而且對克氏原螯蝦具有一定的免疫保護和增強其消化機能的作用。

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Effects of dietary chitosan supplementation on growth,non-specific immune factors,muscle com positions and activities of digestive enzymes in red swamp crayfish Procambarus clarkii

REN Xiu-fang1,2,ZHOU Xin2,ZHAO Chao-yang2,SHUI Yan2,XU Zeng-hong2, SHEN Huai-shun2,ZHANG Ping1,2,BAIAi-xu1,2
(1.College of Fisheriesand Life,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China;2.Freshwater Fisheries Research Center,Chinese Academy of Fishery Sciences,Wuxi214081,China)

Red swamp crayfishProcambarus clarkiiwith initial body weight of(21.55±1.62)g were fed the diets containing 0%(control group),0.5%,1.0%,1.5%,2.0%,and 3.0%chitosan atwater temperature of(22± 1)℃ for 60 days to investigate the effects of dietary chitosan supplementation on growth,non-specific immune factors,muscle compositions,and activity of digestive enzymes in the red swamp crayfish.Results showed that there was significantly higher specific growth rate in the crayfish in 1.0%chitosan group than that in the other groups (P＜0.05).The mortality rate and molting mortality rate were found to be significantly higher in the crayfish in 1.5% chitosan group than those in the control one(P＜0.05).The crayfish fed the diets containing 1.0%and 2.0% chitosan had significantly higher phenoloxidase activity than the crayfish in the control group did(P＜0.05). There were significantly higher alkaline phosphatase(ALP)activity in the chitosan addition groups than those in the control group(P＜0.05).The chitosan addition led to significantly lower glutamic-pyruvic transaminase (ALT),except in 1.0% and 2.0% chitosan groups.The significantly lower glutamic-oxalacetic transaminease (AST)activitieswere observed in chitosan addition groups(P＜0.05),except 2.0% chitosan addition group. Muscle composition analysis indicated that there was lower crude protein level in the chitosan addition groups than that in the control group,while there was significantly higher crude fat level in the 1.0%,1.5%,and 3.0% groups than that in the control one(P＜0.05),except in 2.0% chitosan group.The crayfish fed the diet containing 1.0% chitosan showed significantly lower ash content inmuscle than the crayfish in the control group did.Therewas significantly highermoisture in 2.0% chitosan group than that in the control group(P＜0.05).The significantly higher activities of trypsase and lipase in hepatopancreas and trypsin in intestinal tractwere found in the 1.0% chitosan group(P＜0.05)compared with the control group.The crayfish fed the diet1.5% chitosan had significantly higher amylase activities in hepatopancreas and intestine than the animals fed the control diet did(P＜0.05).In conclusion,it is suggested that chitosan addition of 0.5%-1.5%improve the immune protection and promote digestive function in red swamp crayfish.

Procambarus clarkii;chitosan;phenoloxidase;digestive enzyme;muscle composition

S966.1

A

2095-1388(2013)05-0468-07

2013-02-05

農業部淡水漁業與種質資源利用重點實驗室資助項目;公益性行業 (農業)科研專項 (201003070)

任秀芳 (1987-),女,碩士研究生。E-mail:greatrxf@163.com

周鑫 (1956-),男,研究員。E-mail:zhoux@ffrc.cn