梅毒患者氧化應激反應的研究

魏 娟， 程 江， 馬雅靜， 曹文疆， 張麗翠

(新疆石河子大學第一附屬醫院檢驗科，新疆石河子832008)

梅毒是一種由蒼白密螺旋體引起的浸潤多組織和慢性感染的性傳播疾病。目前已成為我國發病率最高的性傳播疾病，是我國重點防治的性傳播疾病之一。近年來越來越多的研究表明人體疾病的發生、發展與機體的氧化應激狀態密切相關［1-2］。梅毒是一個多階段累及各系統的疾病，所有的臨床表現都是長期慢性炎癥反應的一個過程，處于慢性氧化應激狀態［3］。氧化應激對梅毒患者造成的病理損害可能有多方面的影響，包括免疫功能喪失、氧化應激破壞各種生物分子誘導細胞凋亡等。目前科學家在病毒性感染疾病的控制上已有嘗試應用抗氧化劑作為治療手段［2］。因此，通過氧化應激指標反映梅毒感染患者體內的疾病發展過程，對梅毒的診斷和治療有著十分重要的價值。為深入了解梅毒患者氧化應激狀態，我們檢測了血漿超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、隱性氧化蛋白產物(AOPP)、硫氧還原蛋白(TRX)水平，探討氧化應激指標在梅毒病程中的變化情況，為梅毒的診斷和治療提供更加有力的證據。

材料和方法

一、研究對象

選取2011年8月至2012年9月期間來新疆石河子大學第一附屬醫院就診的經過相關實驗室檢查結合臨床表現診斷［4-5］為梅毒的住院患者100例，男56例，女44例，年齡(37±12)歲，排除人類免疫缺陷病毒(HIV)、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒感染和各種慢性病(如糖尿病、高血壓等)。選擇同期來新疆石河子大學第一附屬醫院以皮膚和黏膜病變為癥狀就診但梅毒血清學檢測均為陰性反應的50例患者作為非梅毒組，男26例，女24例，年齡(37±15)歲。選取同期來新疆石河子大學第一附屬醫院進行健康體檢的正常人100名作為正常對照組，男47名，女53名，年齡(40±11)歲。

二、標本采集與處理

所有研究對象均空腹采靜脈血3 mL，肝素鈉抗凝，離心后收集血漿500μL，－80℃冰箱保存直至檢測。所有梅毒患者的血漿經酶聯免疫吸附試驗(ELISA)初步篩選后，采用美國疾病預防控制中心2002年推薦的梅毒確證試驗——明膠顆粒凝集試驗(TPPA，日本富士公司)進一步確診。

三、檢測指標

采用分光光度法測定SOD，采用硫代巴比妥酸比色法檢測MDA，試劑盒的各項質量指標及質控參數均在允許范圍內，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。TRX、AOPP采用ELISA試劑盒由上海西唐生物科技有限公司和上海索萊寶生物科技有限公司提供，嚴格按照說明書進行操作。

四、統計學方法

結 果

一、梅毒組、正常對照組、非梅毒組一般資料比較

梅毒組、正常對照組、非梅毒組經過嚴格篩選后進行均衡性比較，其中年齡、性別構成比經統計學分析，各組之間差異均無統計學意義(P＞0.05)。

二、梅毒組、正常對照組、非梅毒組血漿氧化應激水平比較

梅毒組SOD活性及AOPP、TRX水平與非梅毒組、正常對照組比較差異均有統計學意義(P＜0.01);梅毒組MDA水平明顯高于正常對照組(P＜0.05);梅毒不同病程的各項氧化應激指標之間差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 梅毒組、正常對照組、非梅毒組血漿氧化應激指標比較(±s)

表1 梅毒組、正常對照組、非梅毒組血漿氧化應激指標比較(±s)

注:與梅毒組比較，*P＜0.05、＊＊P＜0.01

隱性梅毒 14 76.86±7.39 37.93±8.61 4.46±0.90 74.36±11.63非梅毒組 50 39.30±11.00* 21.74±3.71＊＊ 4.13±0.73 131.30±30.98＊＊正常對照組 100 29.74±7.79＊＊ 19.93±4.79＊＊ 4.03±0.79* 142.13±48.50＊＊

討 論

正常的細胞結構和功能需要通過重要的氧化還原途徑來維持調節，氧化應激是由自由基在體內產生的一種負面作用，持續的氧化應激破壞了細胞結構和功能。近年來研究發現，氧化應激對細胞和組織的破壞與多種疾病的病理密切相關［6］。此外，馮新青等［7］發現二期梅毒患者的細胞免疫功能存在缺陷，這與氧化應激是否有關?隨著梅毒患者體內的氧化應激反應逐步為人們所揭示，本研究即從氧化應激方面來探討梅毒螺旋體對機體可能的損傷作用。

梅毒引起的臨床癥狀是由于梅毒螺旋體誘導產生的持久的慢性炎癥反應。本研究發現不同病程的梅毒患者檢測氧化應激的水平并無差異。梅毒螺旋體雖然缺乏典型的外膜脂多糖結構，但其擁有豐富的脂蛋白類物質。這些脂蛋白通過單核細胞吞噬溶酶體的釋放從而介導炎癥反應，產生大量的活性氧自由基(reactive oxygen species，ROS)。通過ROS的連鎖反應，可使其產生部位及遠離產生部位的其他部位攻擊包括DNA、蛋白質等在內的幾乎所有的生物分子，這種破壞可引起機體死亡。此外，梅毒螺旋體缺乏大部分的鐵結合蛋白［8］，梅毒螺旋體還是一種微需氧微生物，這些特點使得其必須具有氧化結構來抗氧化和炎癥增值反應［3］。

AOPP是氧化應激的標志物，可激發中性粒細胞和單核細胞的呼吸爆發［9-10］，刺激合成及其釋放大量促炎性細胞因子，引起全身微炎癥反應，作為氧化應激蛋白質氧化的產物，可進一步促進氧化應激的發生，引起脂質過氧化。MDA則是脂質過氧化反應主要代謝產物。TRX則是測定抗氧化能力的標志，是體內抗氧化系統最重要的成員之一，對氧化應激起關鍵作用。TRX通過其特有的二硫化物活性中心，可逆的催化多種氧化還原反應，是近年來新興發展的檢測梅毒螺旋體的方法［11-12］。本研究發現梅毒螺旋體感染后機體TRX表達增強。氧化應激產生大量的ROS，進一步促進脂質過氧化。本研究發現梅毒組AOPP、TRX均高于正常對照組和非梅毒組(P＜0.01)，而SOD水平明顯低于正常對照組和非梅毒組(P＜0.01)。但對于MDA來說，二期梅毒組和正常對照組有差異(P＜0.05)，可能是機體短期的氧化反應造成的。SOD是氧自由基的自然天敵，是機體內氧自由基的頭號殺手，正常人體內含有足量的SOD等抗氧化物質，以對抗體內不斷產生的MDA等自由基產物。當梅毒患者體內脂質過氧化作用增強的同時抗氧化酶SOD作用也增強，從而使脂質過氧化產物MDA減少以維護機體氧化和抗氧化系統的平衡。

綜上所述，不同病程的梅毒患者體內均存在明顯的氧化應激反應，對氧化應激指標的檢測對其疾病的診斷和治療有著十分重要的價值和參考意義。在梅毒診斷、治療及定期隨訪中應用氧化應激指標的監測，有利于患者病情的控制和觀察，有待于進一步研究。

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