郝玉紅 朱力敏 薛韌婕 / 上海市計量測試技術研究院
高效液相色譜法檢測 (S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的純度
郝玉紅 朱力敏 薛韌婕 / 上海市計量測試技術研究院
用高效液相色譜法定量分析(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的純度。用Agilent 1100型高效液相色譜儀,色譜柱Xterra C18(5 μm,4.6 mm×250 mm),流動相為20%乙腈—80%,緩沖液: 1000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸鈉;檢測波長為210 nm,流量為0.7 mL·min-1,柱溫30 ℃,對(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽純度進行定量測定。相對標準偏差0.15%,標準回收率99.8%~100.2%,方法重復性好,定量準確度高。
高效液相色譜法;(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽
(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽(簡稱ABAH),為白色或類白色固體粉末,主要用于抗癲癇、抗驚厥藥物中間體。本文采用高效液相色譜法測定其含量,方法可靠,操作簡單,靈敏度高,重現性好,為控制(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的質量提供了切實可行的方法。
1.1 材料、儀器和試劑
材料:樣品(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽由杭州瑞旭產品技術有限公司提供;
高效液相色譜儀:美國安捷倫科技有限公司Agilent 1100,配QuatPump (G1311A)四元梯度輸液泵,VWD (G1314A)可變波長紫外檢測器,自動進樣器;
水為二次蒸餾水;乙腈為色譜純;(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽標準品為進口品。
1.2 分析方法
1.2.1 色譜條件
色譜柱:Xterra C18,5 μm,4.6 mm×250 mm;柱溫:30 ℃;流量:0.7 mL·min-1;進樣量:20 μL;檢測波長:210 nm;流動相:A:緩沖液: 1 000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸鈉;B:乙腈。
1.2.2 標準溶液的制備
精密稱取干燥至恒重的(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽標準品50 mg,置50 mL容量瓶中,加流動相配制成質量濃度為1 000 mg·L-1的標準溶液。取適量經針式過濾器過濾后,備用。
1.2.3 試樣溶液的配制
與1.2.2同樣方法配制試樣。
1.2.4 測試步驟
按1.2.1所列色譜條件,待儀器穩定后,注入20 μL經1.2.2處理好的已知純度的標準溶液,根據其已知濃度和測出的色譜峰面積,計算出校正因子,然后再按同樣的方法進行試樣溶液,進行試樣純度測定。
2.1 檢測波長的選擇
使用紫外分光光度計,通過對樣品溶液的波長掃描發現,(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽在波長210 nm處有特征峰,遂選檢測波長為210 nm。
2.2 流動相的選擇與方法優化
(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽具有很好的水溶性和較強的極性。初篩儀器條件時,以10%乙腈-90%緩沖液(1 000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸鈉)的流動相比例進行試驗,發現試樣保留時間僅3.7 min(如圖1所示),在液相柱上基本沒有保留。為了更好地分離試樣和雜質,重新調整流動相初始比例為20%乙腈,保留時間延長至5.7 min(如圖2所示),在保證試樣和雜質、溶劑分離度的前提下,峰型尖銳,對稱性好。因此,確定以20%乙腈-80%緩沖液為流動相比例。
圖1 10%乙腈為流動相的(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的高效液相色譜圖
圖2 20%乙腈為流動相的(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽的高效液相色譜圖
2.3 精密度試驗
使用該分析方法對3個試樣各進行5次測定,RSD在0.12%~0.18%之間,精密度高,重復性好。
2.4 回收率試驗
取相同量的同一批(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽試樣6份,分別加入精密稱量的(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽標準品適量,進行測定,測得(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽回收率在99.8%~100.2%之間。
采用C18柱,以20%乙腈-80%緩沖液(1 000 mL水+5.0 g庚烷磺酸鈉)為流動相的比例,檢測波長210 nm,流速0.7 mL·min-1,柱溫30 ℃的色譜條件下,對(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽純度進行測定。本方法簡便、快速、結果可靠而且重復性好,可作為(S)-2-氨基丁酰胺鹽酸鹽常規檢測方法。
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Purity of (S)-2-Aminobutyramide hydrochloride by high performance liguid chromatograph
Hao Yuhong,Zhu Limin,Xue Renjie
(Shanghai Institute of Measurement and Testing Technology)
Purity analysis of (S)-2-Aminobutyramide hydrochloride was established by high performance liquid chromatography with Agilent 1100, Xterra C18(5 μm, 4.6 mm×250 mm)column, mobile phase was acetonitrile-water, detection wavelength was 210 nm, flow rate was 0.7 mL·min-1, column temperature was 30 ℃. The method showed repeatability and relative standard deviation was 0.15%, and the standard recoveries were 99.8%-100.2%. These quantitative results showed high accuracy.
high performance liguid chromatograph;(S)-2-Aminobutyramide hydrochloride;purity