枇杷根際土壤真菌對生防木霉菌株P3.9的影響

沈云玫等

摘要：采用對峙培養法，測定105株枇杷根際土壤真菌對生防木霉菌株P3.9的抑菌作用。結果表明，抑制率 300%～39.9% 的菌株共5個，占供試菌株的4.8%；抑制率200%～29.9%的菌株共13個，占供試菌株的124%；抑制率100%～19.9%的菌株共45個，占供試菌株的42.9%；抑制率0%～9.9%的菌株共42個，占供試菌株的400%。結果表明，所有供試枇杷根際土壤真菌菌株對P3.9生防木霉菌株的抑制率均在40%以下，829%的供試菌株抑制率在0%～19.9%之間。枇杷根際土壤真菌菌株不影響P3.9生防木霉菌株在枇杷根際土壤中的定殖能力。

關鍵詞：枇杷；根際土壤真菌；抑菌作用；生防菌；定殖能力

中圖分類號： S482.2+92 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0106-02

收稿日期：2013-08-14

基金項目：國家科技基礎工作專項（編號：2006FY120100）；紅河學院博碩項目（編號：XJ1B0912）；云南省高校重點實驗室建設項目；紅河學院碩士點植物保護一級學科建設項目。

作者簡介：沈云玫（1980—），女，云南彌勒人，碩士研究生，講師，主要從事微生物及生態研究。E-mail：sym_biology2@126.com。

通信作者：魯海菊，博士研究生，副教授，主要從事亞熱帶植物真菌分類和真菌病害研究。E-mail：luhaiju2011@126.com。木霉（Trichoderma spp.）是真菌類中最有潛力的生防菌株[1]，至少對18個屬29種病原真菌表現出一定的拮抗作用[2]，先后成功防治水稻紋枯病[3]、人參銹腐病[4]、番茄灰霉病[5]等植物病害，特別是在土傳病害防治，如番茄枯萎病[6]防治方面，發揮出比化學農藥更好優勢。盡管如此，我國生物農藥的應用發展緩慢甚至停滯不前[7]，主要原因是防治效果不穩定，讓生防菌株在植物根際成功定殖是解決這一難題的方向之一。植物根際中存在大量微生物，真菌是根際微生物的成員之一，與木霉同類，在空間、營養及小生境等生存環境方面，兩者極其相似。根際土壤真菌自然與外來木霉菌株發生各種競爭關系，木霉在競爭中是否獲勝，關系到木霉是否能在植物根際定殖成功。本試驗研究1株分離自枇杷韌皮部組織中的木霉菌株P3.9是否會受到枇杷根際土壤真菌的強烈抑制，從而影響在枇杷根中的成功定殖。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1供試菌株枇杷根際土壤真菌：從蒙自枇杷園區采集枇杷根際土壤，常規分離[8]獲得。生防木霉菌株P3.9：從蒙自枇杷園區采集枇杷根腐病植株韌皮部，常規組織分離獲得[8]，經對峙培養發現對石榴干腐病病菌及枇杷根腐病病菌有極強的抑制效果。

1.1.2供試培養基PDA培養基：馬鈴薯200 g、葡萄糖 16 g、瓊脂粉 20 g、蒸餾水1 000 mL。

1.2試驗方法

1.2.1對峙培養將已分離純化的枇杷根際土壤真菌和生防木霉菌株P3.9在PDA平板培養基中28 ℃恒溫擴大培養 5 d，采用對峙培養法[9]，將各供試菌株在培養基同一半徑周圍用打孔器取直徑為5 mm的菌絲塊，同時接種于無菌PDA平板（直徑90 mm）中，兩接種點相距40 mm，以不接種枇杷根際土壤真菌菌株作為對照，設3次重復，在28 ℃條件下恒溫培養，3 d后測定生防木霉菌株P3.9菌落直徑，計算其生長抑制率。

2結果與分析

3討論

存在的真菌屬種對木霉生防菌株P3.9幾乎無影響。此結論與燕嗣皇[10]等研究結果一致。云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性較豐富，共報道11個屬24個種[11]，其中，Absidia[12]、Acremonium[13]、Aspergillus[12]、Cladosporium[14]、Fusarium[15]、Penicillium[12]、Pythium[12]和Verticillium[16] 8個屬是植物病原真菌，其屬種對菌株P3.9的抑制率均在40%以下，反過來，菌株P3.9對其是否有抑制作用，有待進一步研究。據文獻報道[10]，較多的根際細菌對木霉生防菌產孢有較強的促進作用，木霉在根際主要受放線菌的抑制。生防木霉菌株P3.9是否能在枇杷根際土壤中成功定殖，有待于研究枇杷根際土壤中的細菌、放線菌等微生物是否對其有較強的抑制作用。

參考文獻：

[1]潘瑋，穆常青，蔣細良，等. 木霉的孢子與土壤抑菌作用[J]. 中國生物防治，2006，22（2）：87-91.

[2]楊合同，唐文華，Ryder M. 木霉菌與植物病害的生物防治[J]. 山東科學，1999，4（4）：7-15，20.

[3]王國平，魯書玲，鄭必強，等. 內生真菌紫杉木霉ZJUF0986菌株及其活性代謝產物防治水稻紋枯病的效果[J]. 中國生物防治，2009，25（1）：30-34.

[4]周淑香，李小宇，張連學，等. 6株木霉菌對人參銹腐病的防治效果[J]. 中國生物防治，2010，26（增刊）：69-72.

[5]朱廷恒，邢小平，孫順娣.木霉T97菌株對幾種植物病原真菌的拮抗作用機制和溫室防治試驗[J]. 植物保護學報，2004，31（2）：139-144.

[6]田連生，王偉華，石萬龍，等. 木霉對尖鐮孢菌的拮抗機制及生防效果研究[J]. 植物保護，2001，27（4）：47-48.

[7]郭榮. 我國生物農藥的推廣應用現狀及發展策略[J]. 中國生物防治學報，2011，27（1）：124-127.

[8]方中達. 植病研究方法[M]. 3版.北京：中國農業出版社，1998：124-125.

[9]劉治剛. 玉米苗期根腐病生防木霉菌的篩選[J]. 貴州農業科學，2010，38（9）：114-115.

[10]燕嗣皇，吳石平，陸德清，等. 木霉生防菌對根際微生物的影響與互作[J]. 西南農業學報，2005，18（1）：40-46.

[11]楊若鵬，鄭肖蘭，田學軍，等. 云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性研究[J]. 2012，32（12）：70-74.

[12]張中義，冷懷瓊，張志銘，等. 植物病原真菌學[M]. 成都：四川科學技術出版社，1988：69-517.

[13]郭云忠，孫廣宇，高保衛，等. 套袋蘋果黑點病病原菌鑒定及其生物學特性研究[J]. 西北農業學報，2005，13（3）：23-26.

[14]張中義. 中國真菌志枝孢屬黑星孢屬梨孢屬[M]. 北京：科學出版社，2003，14：1-186.

[15]黃仲生，黃習軍，楊玉茹，等. 京郊黃瓜枯萎病病原菌鑒定初報[J]. 植物病理學報，1984，14（4）：249-251.

[16]張錦秀，于彥一，袁振五. 茄子黃萎?。╒erticillium dahliae）人工免疫研究初報[J]. 內蒙古農業大學學報：自然科學版，1990，12（2）：128-132.

摘要：采用對峙培養法，測定105株枇杷根際土壤真菌對生防木霉菌株P3.9的抑菌作用。結果表明，抑制率 300%～39.9% 的菌株共5個，占供試菌株的4.8%；抑制率200%～29.9%的菌株共13個，占供試菌株的124%；抑制率100%～19.9%的菌株共45個，占供試菌株的42.9%；抑制率0%～9.9%的菌株共42個，占供試菌株的400%。結果表明，所有供試枇杷根際土壤真菌菌株對P3.9生防木霉菌株的抑制率均在40%以下，829%的供試菌株抑制率在0%～19.9%之間。枇杷根際土壤真菌菌株不影響P3.9生防木霉菌株在枇杷根際土壤中的定殖能力。

關鍵詞：枇杷；根際土壤真菌；抑菌作用；生防菌；定殖能力

中圖分類號： S482.2+92 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0106-02

收稿日期：2013-08-14

基金項目：國家科技基礎工作專項（編號：2006FY120100）；紅河學院博碩項目（編號：XJ1B0912）；云南省高校重點實驗室建設項目；紅河學院碩士點植物保護一級學科建設項目。

作者簡介：沈云玫（1980—），女，云南彌勒人，碩士研究生，講師，主要從事微生物及生態研究。E-mail：sym_biology2@126.com。

通信作者：魯海菊，博士研究生，副教授，主要從事亞熱帶植物真菌分類和真菌病害研究。E-mail：luhaiju2011@126.com。木霉（Trichoderma spp.）是真菌類中最有潛力的生防菌株[1]，至少對18個屬29種病原真菌表現出一定的拮抗作用[2]，先后成功防治水稻紋枯病[3]、人參銹腐病[4]、番茄灰霉病[5]等植物病害，特別是在土傳病害防治，如番茄枯萎病[6]防治方面，發揮出比化學農藥更好優勢。盡管如此，我國生物農藥的應用發展緩慢甚至停滯不前[7]，主要原因是防治效果不穩定，讓生防菌株在植物根際成功定殖是解決這一難題的方向之一。植物根際中存在大量微生物，真菌是根際微生物的成員之一，與木霉同類，在空間、營養及小生境等生存環境方面，兩者極其相似。根際土壤真菌自然與外來木霉菌株發生各種競爭關系，木霉在競爭中是否獲勝，關系到木霉是否能在植物根際定殖成功。本試驗研究1株分離自枇杷韌皮部組織中的木霉菌株P3.9是否會受到枇杷根際土壤真菌的強烈抑制，從而影響在枇杷根中的成功定殖。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1供試菌株枇杷根際土壤真菌：從蒙自枇杷園區采集枇杷根際土壤，常規分離[8]獲得。生防木霉菌株P3.9：從蒙自枇杷園區采集枇杷根腐病植株韌皮部，常規組織分離獲得[8]，經對峙培養發現對石榴干腐病病菌及枇杷根腐病病菌有極強的抑制效果。

1.1.2供試培養基PDA培養基：馬鈴薯200 g、葡萄糖 16 g、瓊脂粉 20 g、蒸餾水1 000 mL。

1.2試驗方法

1.2.1對峙培養將已分離純化的枇杷根際土壤真菌和生防木霉菌株P3.9在PDA平板培養基中28 ℃恒溫擴大培養 5 d，采用對峙培養法[9]，將各供試菌株在培養基同一半徑周圍用打孔器取直徑為5 mm的菌絲塊，同時接種于無菌PDA平板（直徑90 mm）中，兩接種點相距40 mm，以不接種枇杷根際土壤真菌菌株作為對照，設3次重復，在28 ℃條件下恒溫培養，3 d后測定生防木霉菌株P3.9菌落直徑，計算其生長抑制率。

2結果與分析

3討論

存在的真菌屬種對木霉生防菌株P3.9幾乎無影響。此結論與燕嗣皇[10]等研究結果一致。云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性較豐富，共報道11個屬24個種[11]，其中，Absidia[12]、Acremonium[13]、Aspergillus[12]、Cladosporium[14]、Fusarium[15]、Penicillium[12]、Pythium[12]和Verticillium[16] 8個屬是植物病原真菌，其屬種對菌株P3.9的抑制率均在40%以下，反過來，菌株P3.9對其是否有抑制作用，有待進一步研究。據文獻報道[10]，較多的根際細菌對木霉生防菌產孢有較強的促進作用，木霉在根際主要受放線菌的抑制。生防木霉菌株P3.9是否能在枇杷根際土壤中成功定殖，有待于研究枇杷根際土壤中的細菌、放線菌等微生物是否對其有較強的抑制作用。

參考文獻：

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[7]郭榮. 我國生物農藥的推廣應用現狀及發展策略[J]. 中國生物防治學報，2011，27（1）：124-127.

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[10]燕嗣皇，吳石平，陸德清，等. 木霉生防菌對根際微生物的影響與互作[J]. 西南農業學報，2005，18（1）：40-46.

[11]楊若鵬，鄭肖蘭，田學軍，等. 云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性研究[J]. 2012，32（12）：70-74.

[12]張中義，冷懷瓊，張志銘，等. 植物病原真菌學[M]. 成都：四川科學技術出版社，1988：69-517.

[13]郭云忠，孫廣宇，高保衛，等. 套袋蘋果黑點病病原菌鑒定及其生物學特性研究[J]. 西北農業學報，2005，13（3）：23-26.

[14]張中義. 中國真菌志枝孢屬黑星孢屬梨孢屬[M]. 北京：科學出版社，2003，14：1-186.

[15]黃仲生，黃習軍，楊玉茹，等. 京郊黃瓜枯萎病病原菌鑒定初報[J]. 植物病理學報，1984，14（4）：249-251.

[16]張錦秀，于彥一，袁振五. 茄子黃萎?。╒erticillium dahliae）人工免疫研究初報[J]. 內蒙古農業大學學報：自然科學版，1990，12（2）：128-132.

摘要：采用對峙培養法，測定105株枇杷根際土壤真菌對生防木霉菌株P3.9的抑菌作用。結果表明，抑制率 300%～39.9% 的菌株共5個，占供試菌株的4.8%；抑制率200%～29.9%的菌株共13個，占供試菌株的124%；抑制率100%～19.9%的菌株共45個，占供試菌株的42.9%；抑制率0%～9.9%的菌株共42個，占供試菌株的400%。結果表明，所有供試枇杷根際土壤真菌菌株對P3.9生防木霉菌株的抑制率均在40%以下，829%的供試菌株抑制率在0%～19.9%之間。枇杷根際土壤真菌菌株不影響P3.9生防木霉菌株在枇杷根際土壤中的定殖能力。

關鍵詞：枇杷；根際土壤真菌；抑菌作用；生防菌；定殖能力

中圖分類號： S482.2+92 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0106-02

收稿日期：2013-08-14

基金項目：國家科技基礎工作專項（編號：2006FY120100）；紅河學院博碩項目（編號：XJ1B0912）；云南省高校重點實驗室建設項目；紅河學院碩士點植物保護一級學科建設項目。

作者簡介：沈云玫（1980—），女，云南彌勒人，碩士研究生，講師，主要從事微生物及生態研究。E-mail：sym_biology2@126.com。

通信作者：魯海菊，博士研究生，副教授，主要從事亞熱帶植物真菌分類和真菌病害研究。E-mail：luhaiju2011@126.com。木霉（Trichoderma spp.）是真菌類中最有潛力的生防菌株[1]，至少對18個屬29種病原真菌表現出一定的拮抗作用[2]，先后成功防治水稻紋枯病[3]、人參銹腐病[4]、番茄灰霉病[5]等植物病害，特別是在土傳病害防治，如番茄枯萎病[6]防治方面，發揮出比化學農藥更好優勢。盡管如此，我國生物農藥的應用發展緩慢甚至停滯不前[7]，主要原因是防治效果不穩定，讓生防菌株在植物根際成功定殖是解決這一難題的方向之一。植物根際中存在大量微生物，真菌是根際微生物的成員之一，與木霉同類，在空間、營養及小生境等生存環境方面，兩者極其相似。根際土壤真菌自然與外來木霉菌株發生各種競爭關系，木霉在競爭中是否獲勝，關系到木霉是否能在植物根際定殖成功。本試驗研究1株分離自枇杷韌皮部組織中的木霉菌株P3.9是否會受到枇杷根際土壤真菌的強烈抑制，從而影響在枇杷根中的成功定殖。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1供試菌株枇杷根際土壤真菌：從蒙自枇杷園區采集枇杷根際土壤，常規分離[8]獲得。生防木霉菌株P3.9：從蒙自枇杷園區采集枇杷根腐病植株韌皮部，常規組織分離獲得[8]，經對峙培養發現對石榴干腐病病菌及枇杷根腐病病菌有極強的抑制效果。

1.1.2供試培養基PDA培養基：馬鈴薯200 g、葡萄糖 16 g、瓊脂粉 20 g、蒸餾水1 000 mL。

1.2試驗方法

1.2.1對峙培養將已分離純化的枇杷根際土壤真菌和生防木霉菌株P3.9在PDA平板培養基中28 ℃恒溫擴大培養 5 d，采用對峙培養法[9]，將各供試菌株在培養基同一半徑周圍用打孔器取直徑為5 mm的菌絲塊，同時接種于無菌PDA平板（直徑90 mm）中，兩接種點相距40 mm，以不接種枇杷根際土壤真菌菌株作為對照，設3次重復，在28 ℃條件下恒溫培養，3 d后測定生防木霉菌株P3.9菌落直徑，計算其生長抑制率。

2結果與分析

3討論

存在的真菌屬種對木霉生防菌株P3.9幾乎無影響。此結論與燕嗣皇[10]等研究結果一致。云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性較豐富，共報道11個屬24個種[11]，其中，Absidia[12]、Acremonium[13]、Aspergillus[12]、Cladosporium[14]、Fusarium[15]、Penicillium[12]、Pythium[12]和Verticillium[16] 8個屬是植物病原真菌，其屬種對菌株P3.9的抑制率均在40%以下，反過來，菌株P3.9對其是否有抑制作用，有待進一步研究。據文獻報道[10]，較多的根際細菌對木霉生防菌產孢有較強的促進作用，木霉在根際主要受放線菌的抑制。生防木霉菌株P3.9是否能在枇杷根際土壤中成功定殖，有待于研究枇杷根際土壤中的細菌、放線菌等微生物是否對其有較強的抑制作用。

參考文獻：

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[10]燕嗣皇，吳石平，陸德清，等. 木霉生防菌對根際微生物的影響與互作[J]. 西南農業學報，2005，18（1）：40-46.

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[12]張中義，冷懷瓊，張志銘，等. 植物病原真菌學[M]. 成都：四川科學技術出版社，1988：69-517.

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[14]張中義. 中國真菌志枝孢屬黑星孢屬梨孢屬[M]. 北京：科學出版社，2003，14：1-186.

[15]黃仲生，黃習軍，楊玉茹，等. 京郊黃瓜枯萎病病原菌鑒定初報[J]. 植物病理學報，1984，14（4）：249-251.

[16]張錦秀，于彥一，袁振五. 茄子黃萎?。╒erticillium dahliae）人工免疫研究初報[J]. 內蒙古農業大學學報：自然科學版，1990，12（2）：128-132.