Survivin、PTEN、PCNA在早期宮頸癌中的表達及意義

李英偉

·臨床醫學·

Survivin、PTEN、PCNA在早期宮頸癌中的表達及意義

李英偉

目的 檢測Survivin、PTEN和PCNA在正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變、早期宮頸癌組織中的表達, 進一步探討這些因子表達和細胞增殖及凋亡的關系。方法 應用免疫組織化學方法,檢測正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變和早期宮頸癌組織中Survivin、PTEN和PCNA的表達情況。結果 Survivin在早期宮頸癌中的陽性表達率明顯高于宮頸上皮內瘤變及正常宮頸組織(P＜0.05)；PTEN在早期宮頸癌組織中的高表達率明顯低于宮頸上皮內瘤變及正常宮頸組織(P＜0.05)；PCNA在早期宮頸癌中的陽性表達率明顯高于宮頸上皮內瘤變及正常宮頸組織(P＜0.05)；Survivin和PTEN在早期宮頸癌中的表達呈負相關(P＜0.05)。結論 Survivin、PTEN和PCNA可能在宮頸癌細胞的凋亡和增殖中發揮協同作用。Survivin和PTEN異常表達作為一種潛在的預測宮頸上皮內瘤皮(CIN)轉歸的指標有重要意義。

宮頸癌；Survivin；PTEN；PCNA；免疫組化

宮頸癌是全球婦女中第二個最常見的惡性腫瘤, 僅次于乳腺癌。近年來隨著生殖道病毒性疾病和性傳播疾病的增加,宮頸癌患病年齡呈現年輕化趨勢［1］。目前人們發現了許多與宮頸癌發生相關的危險因素, 包括行為危險因素、生物學因素、遺傳等方面因素。而細胞增殖和凋亡失衡成為腫瘤發生發展的重要機制。本實驗采用免疫組織化學(S-P)方法, 通過對Survivin、PTEN、PCNA的進一步研究, 旨在探討細胞增殖、凋亡與宮頸癌發生、發展的關系。希望能為宮頸癌開辟有效地臨床治療新途徑提供可靠的理論依據。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集內蒙古赤峰學院附屬醫院病理科及內蒙古醫學院第三附屬醫院2007～2009年存檔的活檢或手術切除的宮頸標本, 所有患者術前均未接受過激素治療或放療、化療, 術后均經病理檢查確診。其中宮頸上皮內瘤變60例,包括CIN I 30例, CIN II～III 30例；早期宮頸癌30例。另選用正常宮頸組織(患子宮肌瘤行全子宮切除手術的)蠟塊30例作為對照組。

1. 2 方法 采用免疫組化S-P法測定標本。

1. 3 免疫組化結果判斷標準 光鏡下觀察免疫組織化學染色切片, Survivin以細胞漿表達為主, 偶見于細胞核；PTEN、PCNA以核表達為主。以細胞漿或細胞核出現淡黃色、棕黃色或棕褐色顆粒為陽性信號。無著色或與背景顏色一致為陰性細胞。

在北航圖像中心Cmais真彩色病理圖像分析系統下, 采用Frank等提出的半定量積分法確定其陽性強度。具體分析如下：①陽性細胞的百分率＜5%為0分, 6%～25%為1分, 26%～50%為2分, 51%～75%為3分, ＞75%為4分；②陽性細胞的強度：無著色或著色很弱, 0分；淡棕黃色為1分,棕黃色為2分, 深棕褐色為3分。兩項積分相加:0分為陰性(-), 1～3分為弱陽性(+), 4～7分為強陽性(++～+++)。

1. 4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件對實驗結果進行統計分析, 定性資料用陽性率(%)表示, Survivin、PTEN、PCNA的表達率比較用χ2檢驗；Survivin、PTEN、PCNA在三組中的表達水平比較采用秩和檢驗；Survivin、PTEN、PCNA 三者之間的關系用Spearman等級相關分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 Survivin在各組組織中的表達狀況 Survivin在宮頸上皮內瘤變、宮頸癌組織中均有表達, 但是在正常宮頸組織中的表達為陰性。Survivin由正常宮頸-CIN-宮頸癌組織的陽性表達率逐漸增高:宮頸癌組高于CIN組, CIN組高于正常宮頸組織(P＜0.05)。Suvrvini陽性表達率隨CIN級別的升高而升高：CIN II-III高于CIN I(P＜0.05)。而正常宮頸與CIN I之間及CIN II-III與宮頸癌之間差異均無統計學意義(P＞0.05)。

2. 2 PTEN在各組組織中的表達狀況 本實驗結果顯示, PTEN蛋白在正常宮頸組織中強表達, 由正常宮頸-CIN-早期宮頸癌組織的陽性表達呈進行性下降, 在早期宮頸癌表達中多為陰性。

PTEN陽性表達率逐漸降低：顯示正常宮頸和CIN I組之間無差異, 宮頸癌低于CIN, CIN低于正常宮頸, CIN高于CIN II～III, CIN I組、CIN II～III組與宮頸癌組間差異具有統計學意義(P＜0.05)

2. 3 PCNA在各組組織中的表達狀況 本研究組宮頸上皮內瘤變及早期宮頸癌組織中有較豐富表達, 對照組正常宮頸組織中多為陰性表達。PCNA由正常宮頸-CIN-宮頸癌組織的陽性表達呈逐漸增高的趨勢, 且隨CIN級別的升高, PCNA指數亦升高。各級CIN和宮頸癌的PCNA指數都比正常宮頸有明顯增加, 差異有統計學意義(P＜0.05), 其中從CIN I到CIN II～III, PCNA指數增高最為明顯, 而宮頸癌與CIN II～III之間差異無統計學意義(P＞0.05)。

2. 4 宮頸癌組織中Survivin基因表達與PCNA、PTEN表達之間的關系 Survivin與PTEN、PCNA在早期宮頸癌中的表達經Spearman等級相關檢驗發現：在早期宮頸癌組中Survivin與PTEN的表達為負相關關系, 相關系數r=-0.824, P=0.00, 差異有統計學意義。PTEN與PCNA之間r=-0.740, P＜0.05, 表明兩者之間呈負相關。Survivin與PCNA的表達作相關性分析, Survivin與PCNA之間為正相關關系(r=0.779, P＜0.01), 差異有統計學意義。由此得出, Survivin與PCNA存在正相關, 而與PTEN存在負相關, Survivin與PCNA表達率越高, PTEN表達率越低。

3 討論

目前Survivin被認為在細胞周期調控、抗細胞凋亡、促血管生成、促進細胞轉化及細胞增殖等方面均發揮重要作用。近年來研究表明腫瘤的發生、發展與Survivin密切相關。Ai Z等［2］發現Survivin在正常宮頸組織中表達均為陰性, 隨宮頸病變程度加重, Survivin表達逐漸增強, 且與宮頸癌淋巴結轉移情況呈正相關。在作者的研究中發現, 由正常宮頸-CIN-宮頸癌組織中Survivin的陽性表達率逐漸增高, 且隨CIN級別的升高而升高, 相鄰兩組之間差異有統計學意義, 而CIN I和正常宮頸之間及CIN II-III與宮頸癌之間差異無統計學意義。說明在宮頸癌組織中Survivin基因蛋白呈高表達狀態?？梢奡urvivin在宮頸癌組織中的表達是一個漸進的過程。Survivin與腫瘤細胞生長失控以及腫瘤最終形成關系密切。

PTEN抑癌基因自發現以來就倍受腫瘤研究者的關注。Kurose K等［3］研究顯示鱗狀細胞癌者均有PTEN基因改變,且存在PTEN等位基因的缺失和突變。Depwski PL等［4］對63例宮頸上皮內瘤變, 85例宮頸鱗癌及12例正常宮頸采用免疫組化法檢測, 發現隨病變進展PTEN陽性表達率逐級降低, 認為在宮頸鱗癌的發生發展中PTEN基因有重要作用, 但并非獨立的預后影響因素。馬玉芳等［5］最近對60例宮頸鱗癌的PTEN表達水平進行免疫組化檢測, 表明PTEN與宮頸鱗癌的分化程度有關。在本實驗研究顯示, PTEN突變與宮頸癌的發生有關。在宮頸癌組織中PTEN基因蛋白的表達強度明顯低于CIN和正常宮頸組織, CINI組與宮頸癌組間差異具有統計學意義(P＜0.05), 說明在宮頸癌組織中其呈低表達狀態,在宮頸上皮不典型增生演化過程中PTEN基因扮演了重要角色。PTEN蛋白表達可作為監測宮頸癌發生的輔助手段之一。

PCNA是近年來反應腫瘤生物學行為可靠的標志物。PCNA含量在正常增殖和轉化的細胞中, 有明顯的周期性變化, 是一種細胞周期調節蛋白。Morawski K等［6］在對喉癌術后患者的研究中發現, 原位復發組PCNA增殖指數顯著高于未復發組。本研究結果顯示PCNA的陽性表達率隨著宮頸病變發展有遞增趨勢, 且在宮頸癌中的陽性表達明顯高于CIN組, CIN組高于正常宮頸組。說明PCNA蛋白積累在宮頸癌發生、發展過程中起著重要和關鍵的作用。PCNA蛋白高表達可能促使宮頸鱗狀上皮細胞過度增生并發生惡性轉化。研究還發現宮頸癌組和CIN II～III組之間無顯著性差異, 推測PCNA蛋白積累可能在宮頸癌發生增殖過程的早期起著重要作用, 其高表達與宮頸癌的發生及宮頸癌切除術后早期的復發、增殖密切相關。檢測PCNA能夠較為客觀地反映細胞的增殖活性及生長速度, 是評估患者預后的良好指標。

Survivin在宮頸癌發生的早期或初始已過度表達, 可以作為評判宮頸癌發生或復發的早期診斷指標。在宮頸癌中Survivin與PTEN的表達存在負相關性, 可能在宮頸癌細胞的增殖和凋亡中發揮協同作用, 兩者共同影響和參與了宮頸癌發生、增殖、惡變和復發。Survivin在宮頸癌組織中的高表達與PCNA的高表達具有一致性, 提示Survivin、PCNA在宮頸癌發生、浸潤及轉移過程中起著重要作用。Survivin、PTEN和PCNA異常表達作為一種潛在的預測CIN轉歸的指標起著重要意義。

［1］ 吳愛如. 婦科惡性腫瘤的流行病學.中國腫瘤, 1997, 6(2):3-5.

［2］ Ai Z, Yin L, Zhou X, et al. Inhibition of survivin reduces cell proliferation and induces apoptosis in human endometrial cancer. Cancer, 2006, 107(4):746-756.

［3］ Kurose K, Zhou XP, Araki T, et al. Biallelic inactivating mutations and an occult germline mutation of PTEN in primary cervical carcinoma. Genes Chromosomes Cancer, 2000, 29(2):166.

［4］ Depwski PL, Rosenthal SI, Roes JS. Loss of expression of the PTEN gene protein product is associated with poor outcome in breast cancer. Mod Pathol, 2001, 14(7):672-676.

［5］ 馬玉芳, 劉銘球, 易建華, 等.腫瘤抑癌基因PTNE在宮頸鱗癌中的表達及其與分化程度的關系.鄖陽醫學院學報, 2003, 22(1):12.

［6］ Morawski K, Namyslowski G, Gabriel A, et al. Assessment of usefulness of PCNA and oncoprotein p53 staining in prediction of the recurrences in subjects operated on for laryngeal carcinoma. Otolaryngol Pol, 2000, 54(4):393-399.

2014-03-02］

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