穴位注射不同藥物對慢性心力衰竭的效應對比研究

趙興梅，陳華德

（浙江中醫藥大學，浙江杭州310053）

慢性心力衰竭（CHF）是一種復雜的進展性臨床綜合癥，也是多種疾病的最終歸宿。隨著人口老齡化進程的加快及高血壓、冠心病等心血管病發病率的上升，CHF的發病率及死亡率逐年增高，已經對醫學界乃至全社會形成了巨大挑戰。目前，治療CHF主要以減慢心率、強心、利尿、擴血管等手段為主，并取得一定療效，但也僅能延緩病情的進展，在逆轉心肌重構，恢復心臟功能方面仍舉步維艱。穴位注射療法產生于20世紀五六十年代，是根據傳統的中醫藥理論，結合現代醫學的注射技術，按照穴位主治功能和藥物的藥理作用，采用小劑量中西藥注入人體的經絡穴位以治療各種疑難病癥的一種方法［1］。此種注射療法簡便易行，起效快、效果好，且所需藥物的劑量也小，因而很快在全國范圍內推廣使用［2］。本實驗旨在探討穴位注射對CHF的效應及療效與所用藥物之間的關系，為CHF的治療提供更好的方法指導和實驗依據。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 Wistar大鼠45只，雄性，體重為（200±20）g，6 w 齡，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，生產許可證號：SCXK（滬）：2008-0016。

1.1.2 藥物與儀器 普萘洛爾（心得安，江蘇常州康普藥業有限公司生產，批號：1202004）、丹參注射液（正大青春寶藥業有限公司生產，批號：1108091）、肌苷注射液（山東方明藥業集團股份有限公司生產，批號：1107285）、蒸餾水（浙江中醫藥大學第三臨床醫學院實驗室提供）。1 mL注射器（4.5號針頭），購自浙江中醫藥大學附屬第三醫院。

1.2 實驗方法

1.2.1 造模與給藥 實驗前先進行動物游泳適應能力的篩選：雄性Wistar大鼠45只，每天在游泳缸里強迫負重游泳2次，每次游至力竭（翻正反射消失）。連續3 d后淘汰無法適應游泳的大鼠（淘汰率約3%），隨機選出8只大鼠作為正常對照組。其余大鼠繼續造模，實驗20 d后，從剩余大鼠中隨機選出32只，第21天起每日灌服普萘洛爾溶液2.4 mg/100 g體重，連續4 d。造模成功后，隨機分為丹參組、肌苷組、蒸餾水組、模型對照組4組，每組8只。造模成功后各組分別給予如下處理：①丹參組、肌苷組、蒸餾水組：選穴：雙側穴位足三里（穴位定位參考《實驗針灸學》［3］），手法：補法，即順著經絡循行的方向緩慢注射相應藥物1 min后迅速拔針。藥物：分別為丹參注射液、肌苷注射液、蒸餾水。給藥劑量：每穴0.20 mL（通過人與動物的用藥劑量換算公式算出）。②模型對照組：造模后不做任何處理。③正常對照組：常規飼料飼養，自由飲水，不予任何處理。各組按上述處理方案進行，1次/d，連續治療1個療程（10 d）后，抽血及切取大鼠心肌細胞。

1.2.2 指標檢測 通過酶動力學比色法檢測不同藥物組血清乳酸脫氫酶（LDH）含量，采用酶動力學法檢測血清肌酸激酶（CK）含量，通過透射電子顯微鏡檢測不同藥物組的心肌細胞超微結構。

1.3 統計學方法

采用SPSS17.0統計軟件包對相關數據進行處理。所有數據以均數±標準差（±s）表示，各組組間差異采用單因素方差分析（One-Way ANOVA）。

2 結果

2.1 各組大鼠血清LDH和CK的濃度比較

模型對照組血清LDH和CK濃度與正常對照組比較明顯升高（P<0.001），說明造模成功。丹參組、肌苷組血清LDH和CK濃度與模型對照組相比均明顯降低（P<0.01，P<0.001），蒸餾水組血清LDH濃度與模型對照組相比顯著降低（P<0.05），血清CK濃度雖然降低，但差異無統計學意義（P>0.05）。肌苷組血清CK濃度與丹參組相比明顯降低（P<0.01）。說明通過穴位注射不同藥物可不同程度地降低血清LDH和CK濃度，其中肌苷注射液作用最強。結果見表1。

表1 治療后各組大鼠血清LDH和CK濃度對比 （±s）

表1 治療后各組大鼠血清LDH和CK濃度對比 （±s）

注：與正常對照組比較，1）P<0.001；與模型對照組比較，2）P<0.05，3）P<0.01，4）P<0.001；與丹參組比較，5）P<0.01

組別 n LDH濃度（U/L）CK濃度（U/L）丹參組 81852.143±302.423）753.571±69.9783）肌苷組 81594.857±316.4854）688.571±82.4784）5）蒸餾水組 81947.429±325.5152）879.714±72.394模型對照組 82344.143±301.3271）909.000±106.1671）正常對照組 81306.571±354.550602.143±92.526

2.2 各組大鼠心肌細胞超微結構比較

正常對照組肌絲排列整齊有序，線粒體膜清晰完整。模型對照組肌絲排列紊亂、斷裂、溶解，線粒體嵴模糊，線粒體部分溶解，少量線粒體空泡化。肌苷組肌絲排列輕度紊亂，少量線粒體空泡化。丹參組肌絲排列紊亂，線粒體結構紊亂，少量線粒體空泡化。蒸餾水組肌絲斷裂，線粒體嵴模糊，線粒體部分溶解，少量線粒體空泡化。結果見圖1。

3 討 論

心力衰竭是由于心臟負荷過重、血栓形成或炎癥等原因引起的心肌損傷，造成心肌結構和功能的變化，最后導致心室泵血或充盈功能低下。臨床主要表現為呼吸困難、乏力和體液潴留。CHF是指持續存在的心力衰竭狀態，一旦惡化或失代償，嚴重威脅生命。通過本實驗研究，我們發現穴位注射對CHF療效顯著，且療效與所用藥物密切相關，而不只是由單純的穴位刺激決定。

LDH和CK是參與心肌細胞能量代謝的重要酶類，主要分布于心肌細胞內，正常情況下，不易通過細胞膜。當心肌受損、缺血缺氧、代謝異常時，血清LDH和CK的濃度才會升高，而且濃度的高低與損傷的程度密切相關。心肌細胞超微結構的損傷是心功能不全的結構基礎；保護心肌細胞超微結構方可防止和逆轉心肌重塑，恢復心功能。

圖1 各組大鼠心肌細胞超微結構

本實驗結果顯示，和正常對照組相比，模型對照組血清LDH和CK濃度均升高（P<0.001）；心肌細胞超微結構示，模型對照組肌絲排列紊亂、斷裂、溶解，線粒體嵴模糊，線粒體部分溶解，少量線粒體空泡化，說明造模成功。和模型對照組相比，各治療組大鼠血清CK和LDH濃度明顯降低，心肌細胞超微結構損傷明顯減輕，其中蒸餾水組改變最小，肌苷組最接近正常。說明足三里穴位注射丹參注射液、肌苷注射液、蒸餾水都能改善心肌代謝，防止心肌重構。丹參注射液的作用可能與丹參具有強心、擴張冠脈、抗血栓形成、抑制纖維母細胞增生等作用有關［4］。肌苷注射液的作用可能與肌苷能直接通過細胞膜進入心肌細胞活化丙酮酸氧化酶類，從而使處于低能缺氧狀態下的心肌細胞能繼續順利進行代謝，并參與能量代謝和蛋白質的合成有關［5］。蒸餾水的作用可能與它的體積和重量對穴位產生的機械刺激有關。

綜上所述，穴位注射可從改善心肌代謝，保護心肌細胞超微結構，預防心肌重構等不同層面對CHF起到治療作用。同時穴位注射對CHF的效應與所用藥物直接相關，其效應是穴位刺激和藥物作用有機結合的結果。中藥丹參注射液和西藥肌苷注射液均有效，且二者的療效明顯強于蒸餾水，其中肌苷注射液比丹參注射液更擅長于改善心肌代謝，保護心肌細胞。本研究提示若中西藥聯用，可能療效更佳。

［1］林靜瑜，許云祿，倪峰.穴位注射作用機制研究進展［J］.遼寧中醫藥大學學報，2007，9（6）：189.

［2］李鏷.穴位注射療法臨床大全［M］.北京：中國中醫藥出版社，1996：68.

［3］李忠仁.實驗針灸學［M］.北京：中國中醫藥出版社，2007：327-328.

［4］王本祥.現代中藥藥理與臨床［M］.天津：天津科技翻譯出版公司，2004：1367-1369.

［5］龍琨.臨床藥物匯編［M］.北京：金盾出版社，1992：651-652.