電針曲池、神門、足三里穴對壓力負荷性心肌肥厚模型家兔干預作用

王 紅 王威龍 趙偉麗 趙 楠 孫世曉

（黑龍江中醫藥大學·哈爾濱 150040）

研究表明，左室肥厚是獨立于高血壓之外的心血管病危險因子[1]，是主要的高血壓靶器官損害，高血壓患者約有1/3伴有左室肥厚[2]。目前臨床研究和基礎實驗已證實針刺療法有一定心血管保護作用[3]，但對心肌肥厚的相關研究較少報道。故本實驗以腹主動脈縮窄法復制壓力負荷性心肌肥厚家兔模型，觀察同步電針曲池、神門、足三里穴對模型家兔心電圖、心肌肥厚參數及心肌形態學變化的影響，為臨床合理使用電針治療積累實驗數據。

1 材料和方法

1.1 材料

實驗動物：從黑龍江中醫藥大學實驗動物中心購入健康成年家兔60只，體重1.5～2.5kg，雌雄各半，動物合格證號：SCXK黑2008-004。實驗儀器：PL202-S電子天平、狗兔兩用解剖臺、G6805-Ⅱ電針儀、BL-420F生物機能實驗系統。

1.2 方法

將家兔隨機分為正常組、假手術組、模型組、電針高頻組（頻率100Hz，電壓3V，連續波）、電針中頻組（頻率50Hz，電壓3V，連續波）、電針低頻組（頻率2Hz，電壓3V，連續波），每組10只。參照Anversea方法[4]，20%的氨基甲酸乙酯5ml/kg經耳緣靜脈注射麻醉，仰臥固定并行腹部無菌手術，分離腹主動脈鞘，剝離并縮窄腹主動脈，然后關腹。術后三天每天皮下注射青霉素5萬u/只預防感染。假手術組手術過程如上，但不縮窄腹主動脈。參照《實驗針灸學》動物標準穴位圖譜，家兔曲池穴位于肘橫紋外側端，屈肘，當尺澤穴與肱骨外上髁連線中點。神門穴位于腕部，腕掌橫紋尺側端，尺側腕屈肌腱的橈側凹陷處。足三里穴位于外膝眼下四橫指、脛骨邊緣。術后即開始電針治療，治療組用G6805-Ⅱ電針儀分別給予高、中、低頻率電針刺激，每次持續45min，每日一次，連續電針12周。假手術組和模型組僅給予相同時間的捆綁。

1.3 心電圖、心重指數（HW/BW）、左心室重量指數（LVMI=LVW/BW）檢測

末次電針后，家兔稱重（BW），用20%的氨基甲酸乙酯5ml/kg經耳緣靜脈注射麻醉，通過BL-420F生物機能實驗系統記錄II導聯心電圖，然后處死家兔并開胸取心，用預冷生理鹽水充分灌洗心臟，剔除心臟周圍血管、脂肪等組織，用濾紙吸干心臟表面及室腔液體，稱全心重量（HW），計算HW/BW，再沿房室交界剪去心房和右心室游離壁，保留左心室及室間隔，濾紙吸干后稱取左心室重量（LVW），計算LVMI。心電圖主要分析HR、P-R間期和ST段電位值。

1.4 HE染色

在心尖部橫向截取約0.5cm×0.5cm×0.2cm大小組織塊，放入4%多聚甲醛固定行HE染色以觀察心肌組織形態學變化。

1.5 統計分析

實驗數據以均數±標準差表示，統計分析采用SPSS11.5軟件做t檢驗。

2 結果

各組家兔II導聯心電圖的HR、P-R間期和ST段電位值統計結果見表1；HW/BW和LVMI統計結果見表2。

表1 各組HR、P-R間期和ST段變化的統計結果（，n=10）

表1 各組HR、P-R間期和ST段變化的統計結果（，n=10）

注：與正常組比較：*P＜0.01；與模型組比較△P＜0.05。

組別 HR（次/min） ST段振幅（mV） P-R間期（mS）正常組 322±12.12 0.06±0.008 59±1.32假手術組 346±18.09 0.04±0.007 60±3.09模型組 203±14.31* 0.12±0.021* 101±9.43*低頻組 208±23.45 0.11±0.027 100±10.04中頻組 251±10.91△ 0.10±0.012 86±8.62△高頻組 290±14.37△ 0.07±0.022△ 73±9.11△

表2 各組HW/BW和LVMI變化的統計結果（，n=10）

表2 各組HW/BW和LVMI變化的統計結果（，n=10）

注：與正常組比較：*P＜0.01；與模型組比較△P＜0.05。

組別 HW/BW（mg/g） LVMI（mg/g）正常組 2.36±0.28 1.52±0.11假手術組 2.41±0.32 1.47±0.18模型組 3.33±0.21* 2.53±0.14*低頻組 3.23±0.35 2.38±0.22中頻組 3.05±0.12△ 2.26±0.41△高頻組 2.87±0.22△ 1.82±0.28△

3 討論

本實驗觀察了壓力負荷性心肌肥厚模型家兔心電圖、心肌肥厚參數及心肌組織學變化。心電圖HR、P-R間期和ST段統計結果表明，模型組家兔HR減慢，ST段抬高，P-R間期延長，與正常組比較經統計學處理存在顯著性差異，高頻電針組HR、P-R間期和ST段均有明顯改善，與模型組比較存在顯著性差異；中頻電針組HR、P-R間期與模型組比較有顯著性差異。HW/BW和LVMI的統計結果表明，模型組家兔HW/BW、LVMI升高，與正常組比較經統計學處理存在顯著性差異，高頻電針組、中頻電針組家兔HW/BW、LVMI與模型組比較經統計學處理存在顯著性差異。HE染色結果表明，正常組心肌細胞排列整齊，橫紋清楚，觀察細胞核大小均一，細胞中的胞漿染色均勻，總體心肌纖維排列整齊，間質中無明顯膠原纖維增生；模型組家兔可見心肌細胞變肥大，細胞核形態不規則，胞漿染色加深，心肌纖維增粗增大、紊亂、斷裂，血管周圍有膠原纖維增生，間質中有不同程度膠原纖維增生并伴有炎癥細胞浸潤等改變等病理改變；低頻電針組可見心肌纖維增粗增大，核仁濃染，間質中伴有炎癥細胞浸潤等改變；中頻電針組心肌細胞肥大、細胞核增大、形態不規則、核仁濃染、胞漿染色加深、心肌膠原纖維增生有不同程度改善，間質伴隨炎癥浸潤現象消失；高頻電針組心肌細胞排列紊亂、血管周圍膠原纖維增生、炎癥細胞浸潤等病理改變有明顯改善。以上結果表明高頻、中頻電針神門、曲池、足三里穴對腹主動脈縮窄造成的負荷性家兔心肌肥厚有一定的干預作用。

[1] Hunter JJ,Chien KR.Signaling pathways for cardiac hypertrophy and failure[J].N Engl J Med,1999,314（17）：1276-1283.

[2] 葛志明，季曉平，郝恩魁，等.氯沙坦逆轉高血壓患者左室肥厚的臨床研究[J].山東醫科大學學報，2007，38（2）：172.

[3] 易春濤，程曉曙，俞建華，等.辛伐他汀對一氧化氮缺乏性高血壓大鼠心肌纖維化的作用[J].中國臨床藥理學與治療學，2006，7（4）：306-310.

[4] Anversea P,Hagopian M,Alder V.Quantitative radioautographic local-izstiorl of protein synthesis in experimental cardiac hypertrophy[J].LabInvest,1973,29（3）：282.