血必凈對燒傷合并急性腎損傷中的臨療效及部分機制探析

黃玉平 陳志忠 陳 紅

(南京軍區福州總醫院第地一附屬醫院<九五醫院>，福州，351100)

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血必凈對燒傷合并急性腎損傷中的臨療效及部分機制探析

黃玉平 陳志忠 陳 紅

(南京軍區福州總醫院第地一附屬醫院<九五醫院>，福州，351100)

目的:觀察血必凈對燒傷合并急性腎損傷的臨床作用,并探析相關作用機制。方法:對本院2012年9月至2015年9月85例不同程度燒傷患者資料進行回顧性分析,根據不同是否使用血必凈將85例患者分為治療組(使用血必凈)39例,余下46例設為常規組(未使用血必凈),同時將25例健康體檢者設為對照組,分別采集3組尿液和血液,檢測尿KIM-1及NAG水平及血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平。結果:1)與健康對照組相比,燒傷合并腎損傷患者BUN及Cr明顯升高,具有統計學意義(P<0.05)。治療組和常規組,治療前BUN及Cr比較無統計學意義(P>0.05),經過治療后治療組BUN及Cr下降的趨勢較常規組明顯,差異具有統計學意義(P<0.05)。2)治療前相比，治療后治療組和常規治療組患者尿KIM-1及NAG水平均有明顯下降(P<0.01)，其中治療組上述指標均顯著低于常規治療組(P<0.05)。3)尿KIM-1與BUN、Cr均呈正相關關系;尿NAG與BUN、Cr亦呈正相關關系,尿KIM-1與尿NAG也具有正相關性,結論:血必凈對燒傷患者合并急性腎損傷具有理想療效,其機制可能與降低尿KIM-1和NAG的表達有關。

燒傷;急性腎損傷;腎損傷因子-1;N-乙酰-β-葡萄糖苷酶；血必凈注射液

急性腎衰竭是嚴重燒傷的并發癥并導致死亡率增加的重要因素之一[1],根據急性腎損傷國際組織(AKIN)診斷標準對AKI的診斷標準:48 h內Cr水平升高≥0.3mg/dl(≥26.5 μmol/L)或超過基礎值的1.5倍及以上,且明確或經推斷上述情況發生在7 d之內或持續6 h尿量<0.5 mL/(kg·h)[2]。由于影響Cr結果因素較多,為了緩解燒傷患者的癥狀,早期發現及早干預以延緩甚至逆轉腎功能損害尤為重要。KIM-1是近年來發現的一種新的跨膜糖蛋白,在正常肝、腎、脾微量表達,而在缺血及腎毒性損傷后的腎去分化近曲小管上皮細胞中表達顯著增強[3-4]。NAG是腎小管損害的指標,也是小管功能改變的指標,研究發現尿NAG比其他指標有更高的特異性及敏感性[5-6]。

血必凈由赤芍、川芎、丹參、紅花及當歸五種中藥組合而成,具有活血化瘀、疏通經絡、潰散毒邪,據目前研究可知血必凈具有明顯抗內毒素作用,臨床中我們發現血必凈對燒傷合并腎損傷患者具有明顯的腎功能保護作用,可明顯降低患者的Cr水平,有文獻認為血必凈作用途徑與多種細胞因子相關,因此我們提出設想:血必凈發揮腎保護療效是否通過KIM-1及NAG進行橋接？本文將檢測不同程度燒傷患者尿中KIM-1和NAG水平,進一步研究血必凈治療AKI的療效及部分機制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2012年10月至2014年9月在我院就診的85例燒傷合并AKI的患者的資料進行回顧性分析,根據不同是否使用血必凈將85例患者分為治療組(使用血必凈)39例,余下46例設為常規組(未使用血必凈),其中男46例,女39例,平均年齡(35.8±6.7)歲。同時將25例健康體檢者設為對照組,其中男15例,女10例,平均年齡(36.3±6.4)歲,均無肝、腎、心血管、血液及內分泌系統病史。2組患者在性別、年齡等一般情況方面差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 納入標準及排除標準 納入標準:1)燙傷原因均為熱水燙傷火焰燒傷;2)燒傷后至入院時間不超過6 h;3)年齡在12～60歲。排除標準:1)化學試劑等燒傷;2)燒傷后入院時間超過6 h;3)年齡小于12歲或大于60歲;4)既往有心臟病、肝腎功能不全者;5)入院前接受血必凈治療者。

1.3 治療方法 2組治療組患者均接受常規抗感染、清創、營養支持、補液等處理,治療組患者在常規處理方案基礎上加用血必凈注射液(天津紅日藥業股份有限公司,批號為06072101)50 mL+0.9%氯化鈉注射液100 mL,靜脈滴注,3次/d,連續使用7 d。

1.4 方法

1.4.1 標本采集 患者入院收集尿液(中間段)10 mL,以1 500 r/min離心10 min,取上清2 mL置于EP管中,保存于-20 ℃,集中測定KIM-1和NAG。同時采集血液做血常規檢查,主要檢查指標為血BUN、SCr、WBC、ALT、AST等。

1.4.2 檢測方法 收集健康對照組,治療組及常規組患者治療前及治療后連續24 h尿液,在4 ℃ 14 000 prn條件下離心5 min,用高壓槍頭吸取離心后的上清液,使用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)進行檢測,人腎損傷分子-1酶聯免疫分析試劑盒(上海聯碩生物科技有限公司,貨號BS-1140),N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒(上海酶聯實業有限公司,貨號ELISA-05271),操作步驟嚴格按照說明書進行,試劑盒由廣州達安基因股份有限公司提供,顯色后采用492 nm波長,TMB反應產物檢測需要450 nm波長。檢測時一定要首先進行空白孔系統調零,用測定標本孔的吸收值與一組陰性標本測定孔平均值的比值(P/N)表示。以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

2 結果

2.1 血生化指標 治療組患者、對照組的BUN值分別為(4.94±1.96)mmoI/L和(4.24±0.78)mmoI/L,Cr值分別為(105.88±21.93)μmoI/L及(18.73±5.62)μmoI/L,結果顯示,與健康對照組相比,燒傷合并腎損傷患者BUN及Cr明顯升高,具有統計學意義(P<0.05)。治療組和常規組,治療前BUN及Cr比較無統計學意義(P>0.05),經過治療后治療組BUN及Cr下降的趨勢較常規組明顯,差異具有統計學意義(P<0.05)。結果見表1。

表1 各組BUN、Cr測定結果

注:*表示與健康對照組比較P<0.05;△表示與常規組治療后比較P<0.05。

2.2 尿KIM-1和NAG水平 對不同治療組患者24 h尿液中KIM-1和NAG進行ELISA檢測結果顯示:2組治療組患者治療前尿液中中KIM-1和NAG表達無明顯差異,但與健康對照組相比,治療組患者治療前的KIM-1(43.20±8.89)pg/mL vs(16.81±3.01)pg/mL,|t|=5.24,P=0.002 4<0.05)、NAG(102.99±20.39)pg/mL vs(42.91±6.49) pg/mL,|t|=4.67,p=0.001 1<0.05),表達均明顯增加;經過血必凈注射液治療后治療組的KIM-1(25.59±4.79)pg/mL vs(43.20±8.89)pg/mL,|t|=8.92,P=0.000 9<0.001)、NAG(49.33±9.67)pg/mL vs(102.99±20.39)pg/mL,|t|=6.67,P=0.000 8<0.001),表達顯著低于治療前,也低于常規組治療后(P<0.05)見圖1及圖2。

圖1 不同治療組患者24 h尿液中KIM-1對比

圖2 不同治療組患者24 h尿液中NAG對比

2.3 燒傷合并腎損傷患者尿KIM-1和NAG與BUN、Cr相關性分析 尿KIM-1與BUN、Cr均呈正相關關系;尿NAG與BUN、Cr亦呈正相關關系,尿KIM-1與尿NAG也具有正相關性,結果見表2及圖1。

3 討論

隨著血必凈在90年代的問世,更為凸顯活血化瘀法在治療燒傷及其合并癥的優勢,血必凈是經典方血府逐瘀湯的現代合成,其主要成分是赤芍、川芎、丹參、紅花及當歸,均具有顯著的活血化瘀之功。腎臟是嚴重燒傷后并發的多器官衰竭的主要受損靶器官之一,病理學認為燒傷后由于微血管的血流變學發生變化、舒縮功能減弱、血管通透性增高,以及炎性反應、燒傷引起的休克所致的重要器官的缺血等原因,均可引起AKI。Colpaert K[7-10]等認為由于燒傷后自身產生的毒素如肌紅蛋白等、腎毒性物質以及機體急性代謝障礙、感染和氧自由基損傷等引起腎臟損傷,導致急性腎衰竭?，F代藥理學發現[11-13]:活血化瘀的中藥能夠通過減弱血小板的黏附聚集功能,抑制成纖維細胞合成膠原而明顯改善微循環,可以通過改變通過改變毛細血管的通透性,減少促炎遞質的分泌,促進炎性物質的吸收,于此同時,活血化瘀類中藥可通過增強網狀內皮細胞吞噬和吸附炎性反應因子的能力而發揮修復受損組織的功能。因此血必凈可以通過改善微循環、清除燒傷后產生的毒害物質,降低燒傷所致的病理性損傷,從而對機體的腎臟發揮保護作用。

表2 燒傷合并腎損傷患者KIM-1和NAG與BUN、Cr相關性分析

注：*在0.05水平(雙側)上顯著相關;**在0.01水平(雙側)上顯著相關。

圖3 尿KIM-1與NAG相關性分析

一般情況下,腎功能檢查基本以Cr、BUN以及尿液為主,但由于腎臟具有強大的貯備功能,這些常用的指標升高的較晚,不能充分診斷患者的腎功能損傷情況。近幾年研究發現[14-15],在病理組織學發現腎毒性改變之前尿KIM-1即表現出高表達,順鉑、葉酸造影劑等引起急性腎小管壞死發現均能使KIM-1的表達升高,這些研究表明,KIM作為腎小管近曲小管上皮細胞的一種跨膜蛋白,可能更早的參與到腎臟損傷與修復中,更有利于早期診斷AKI,其應用價值優于BUN和Cr。NAG作為近年來研究比較多的一個檢測腎臟病變的酶,是一種細胞內溶酶體酶,以腎近曲小管含量最高,正常情況下一般不易被腎小管濾過,當近曲小管上皮細胞受損時,溶酶體破裂釋放NAG,是反映腎小管損害的特異性敏感指標[15-16]。本研究表明,在燒傷合并腎損傷患者中,NAG水平明顯上升。因此我們認為尿液中KIM-1及NAG對于腎功能的評估具有較強的敏感性,我們在實驗中發現燒傷合并腎損傷患者尿液中KIM-1及NAG均明顯高于健康對照組,經過治療干預后患者KIM-1及NAG在尿液中的濃度均有所下降,其中使用血必凈的治療組下降的趨勢較常規組明顯。因此我們認為血必凈可明顯抑制燒傷導致的瀑布樣效應,抑制炎性反應遞質的產生,抑制異常增加的血管通透性,修復受損的組織細胞及器官。

研究中我們對KIM-1和NAG與BUN、Cr進行了相關性分析,結果表明,KIM-1和NAG與BUN、Cr呈正相關,對KIM-1和NAG也做了相關性分析,二者之間的相關性系數達0.796,P<0.01,提示兩者可以聯合使用作為急性腎損傷早期的評估指標,且血必凈對燒傷患者合并急性腎損傷具有理想療效,其機制可能與降低尿KIM-1和NAG的表達有關。

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(2015-08-16收稿 責任編輯：王明)

Curative Effect and Mechanism of Xuebijing Injection on Burn Injury Complicated with Acute Kidney Injury

Huang Yuping, Chen Zhizhong, Chen Hong

(FirstAffiliatedHospitaltoFuzhouGeneralHospitalofNanjingMilitaryCommand,Nanjing351100,China)

Objective:To observe the curative effect and mechanism of Xuebijing injection in burn injury complicated with acute kidney injury.Methods:A total of 85 patients(enrolled during September 2012 to September 2015) with different degrees of burning were retrospectively analyzed, and were divided into observation group(used Xuebijing injection, 39 cases) and conventional group (unused Xuebijing injection, 49 cases). Also, 25 healthy people were set as control group. To collect urine and blood, detect urine KIM-1, NAG levels and blood urea nitrogen (BUN), and creatinine (Cr) levels in the three groups.Results:1) compared with healthy group, BUN and Cr increased significantly in patients with burning injury complicated with renal injury, (P<0.05). Before treatment, BUN and Cr were of no statistical difference in the observation group and conventional group, (P>0.05). After treatment, the downward trend of BUN and Cr in the observation group were more obvious than than of the healthy group, and the differences were with statistically significance (P<0.05). 2) after treatment, urinary KIM-1 and NAG levels were significantly decreased in the observation group and conventional group(P<0.01), and the indexes of observation group were significantly lower than that of the conventional treatment group (P<0.05); 3) urine KIM-1 were both positive correlated with BUN and Cr, and also, urine NAG had positive correlation with BUN and Cr, and urine NAG also had positive correlation with urine KIM-1.Conclusion:Xuebijing injection has an ideal curative effect for patients with burns and acute kidney injury. This might be related to its inhibition on the expression of urine NAG and KIM-1.

Burns; Acute kidney injury; Kidney injury molecule-1; N-acetyl-beta-glycosidase; Xuebijing injection

國家自然科學基金項目(編號:30973690)

黃玉平(1984.1—),女,大學本科,醫師,研究方向:常見腎臟疾病的治療,E-mail:124343112@qq.com

R278;R259

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2015.12.015