血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白在肺癌患者中的表達及意義

肖海勵　王　靜魏海霞　(鄭州大學附屬鄭州中心醫院呼吸內科，河南　鄭州　450000)

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血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白在肺癌患者中的表達及意義

肖海勵王靜1魏海霞(鄭州大學附屬鄭州中心醫院呼吸內科，河南鄭州450000)

〔摘要〕目的探討血清甲基化轉移酶(DNMT)1、DNMT3a、DNMT3b和組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)蛋白在肺癌患者中的表達及意義。方法選取2013年2月至2014年10月于該院呼吸內科收治的肺癌患者104例，按其組織學分型分別為鱗癌35例，腺癌39例，其他類型30例，正常對照組選擇100例健康志愿者。所有入選者均于清晨休息狀態下采集空腹外周靜脈血3 ml，采用酶聯免疫法測定血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的表達。結果實驗組患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達水平均高于對照組(P＜0. 05);各肺癌分型中，患者的DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達水平差異小(P＞0. 05);通過Logistic回歸分析顯示其與肺癌的發生發展關系密切。結論肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白表達升高，并隨著肺癌的發生發展升高，對臨床有指導意義，值得臨床推廣。

〔關鍵詞〕甲基化轉移酶;組蛋白脫乙酰酶;肺癌

1鄭州大學第一附屬醫院呼吸內科

第一作者:肖海勵(1977-)，男，碩士，主治醫師，主要從事呼吸系統疾病及肺癌的研究。

肺癌亦稱支氣管癌，常見有鱗形細胞癌和腺癌兩種〔1，2〕。因至今尚不明確。研究發現，甲基化轉移酶(DNMT)1、DNMT3a、DNMT3b和組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)的活性異常導致了腫瘤的發生，但其在肺癌發展過程中相關的利害因素研究較少。為了選擇合理的治療方案治療肺癌，改善其預后。肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白濃度變化對肺癌的意義。

1　資料與方法

1. 1一般資料選取2013年2月至2014年10月于我院呼吸內科收治的肺癌患者104例，實驗組按其組織學分型分別為鱗癌35例，男19例，女16例，年齡(60. 3±10. 7)歲;腺癌39例，男22例，女17例，年齡(57. 8±8. 21)歲;其他類型30例，男17例，女13例，年齡(62. 29±11. 24)歲;正常對照組選擇100例健康志愿者，男53例，女47例，年齡(57. 14±9. 33)歲。兩組患者的性別組成、年齡、職業等一般資料差異無統計學意義(P＞0. 05)。

1. 2納入標準肺癌患者入選條件滿足《內科學》擬定的肺癌診斷標準，經病理或細胞學證實的初治肺癌，患者均未接受放、化療和免疫治療?；颊咦栽竻⑴c本實驗，并簽署知情同意書。1. 3排除標準排除急慢性感染、肝臟疾病、腎動脈狹窄、心力衰竭、糖尿病、低血容量、多器官功能衰竭及接受過放、化療的患者。排除不愿意接受調查者和交流有障礙者。

1. 4觀察指標及檢測方法采集所有入選者均于清晨休息狀態下空腹外周靜脈血3 ml，分離血清于EP管中，－80℃冰箱凍存。試劑盒北京鼎國生物研究有限公司DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1試劑盒的說明采用酶聯免疫法測定血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的表達。

1. 5統計學方法應用SPSS19. 0軟件進行t檢驗、χ2檢驗及Logistic回歸分析。

2　結果

2. 1兩組DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達水平實驗組患者DNMT1〔(24. 89±4. 91)μg/L〕、DNMT3a 〔(598. 14±89. 73)μg/L〕、DNMT3b〔(257. 82±63. 56)μg/L〕和HDAC1〔(451. 12±102. 26)μg/L〕的蛋白表達水平均高于對照組〔(51. 19±6. 43)μg/L，(411. 16±102. 21)μg/L，(128. 34± 37. 74)μg/L，(275. 38±87. 74)μg/L〕(P＜0. 05)。

2. 2各臨床分型的肺癌患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達水平鱗癌患者、腺癌患者以及其他類型的肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達水平差異小，無統計學意義(P＞0. 05)。見表1。

表1　各臨床分型的肺癌患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達水平(x±s，μg/L)

2. 3相關性分析以血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1作為因變量，結果表明DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1與肺癌發生發展呈密切正相關(r = 0. 231 4、0. 142 5、0. 215 2、0. 182 6，均P＜0. 01)。

3　討論

肺癌是常見的惡性腫瘤。其中鱗形細胞癌約占肺癌的50%，一般發展速度比較緩慢，病程較長，對放射和化學療法較敏感〔3〕。多數腺癌起源于較小的支氣管，發病率比鱗癌低，發病年齡較小，為周圍型肺癌，早期一般沒有明顯的臨床癥狀〔4〕。由于自然環境、醫療費用、工作環境、對疾病的認識不夠等原因，許多患者患病后不能及時就醫，失去了早期診斷、早期治療的最佳時期。近50年來肺癌的發病率顯著增高〔5〕。根據2010年的衛生統計年鑒顯示，2005年肺癌死亡率占我國惡性腫瘤死亡率榜首〔6〕。肺癌病人大多數是男性，男女比例約為4～8∶1，患者年齡大多在40歲以上。鱗癌的5年生存率為15. 3%，腺癌為11. 6%〔7〕。DNMT為DNA甲基化關鍵酶〔8〕。目前發現的DNMT家族，已經發現了3種有活性的DNMT，即DNMT1、DNMT3a和DNMT3b，其在DNA甲基化及其維持過程中發揮了重要作用〔9〕，幾乎可在所有的正常組織中呈共同表達〔10〕。腫瘤患者體內的DNMT1、DNMT3a和DNMT3b蛋白表達均顯著增高，并且DNMT1蛋白的高表達提示患者預后不良〔11〕。HDAC1 是1996年由美國哈佛大學發現的第一個組蛋白去乙?；拿?，具有抑制基因轉錄的作用〔12〕。DNMT1抑制常氧條件下腫瘤細胞的生長〔13〕，在細胞的分化和周期進展過程中也發揮了重要作用，與DNA結合后會使染色質呈阻抑結構，抑制基因的轉錄，導致腫瘤發生。

本研究結果證明肺癌患者血清中的DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1呈高表達，而在其各分型中無差異，并且隨著肺癌的發生發展升高，對臨床有指導意義，值得臨床推廣。

4參考文獻

1 Chung YG，Ratnam S，Chaillet JR，et al．Abnormal regulation of DNA methyltransferase expression in cloned mouse embryos〔J〕．Boil Report，2003; 69(1): 146-53.

2 Issa JP. Epigenetic variation and human disease〔J〕．J Nutr，2002; 132(8): 2388-92.

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7 Robertson KD. DNA methylation and human disease〔J〕．Nat Rev Genet，2005; 6(8): 597-61.

8 Ishihama K，Yamakawa M，Semba S，et al．Expression of HDAC1 and CBP/p300 in human colorectal carcinomas〔J〕．J Clin Pathol，2007; 60(11): 1205-10.

9 Sier CF，Kubben FJ，Ganesh S，et al．Tissue lesels of matrix metalloproteinase MMP-2 and MMP-9 are related to the overall survival of patients with gastric carcinoma〔J〕．Br J Cancer，1996; 74(3): 413-7.

10孫云暉，陳麗，閻紅娥，等. HDAC1和DNMT1在非小細胞肺癌中的表達及臨床意義〔J〕．黑龍江醫藥科學，2010; 33(6): 77-8．

11 Xiong Y，Dowdy SC，Xue A，et al．Opposine alterations DNA methyltransferase gene expression in endometrioid and serous endometrial cancer〔J〕．Gynecol Oncol，2005; 96(3): 601-9．

12 Watanabe N，Hizuta A，Tanaka N，et al．Localization of T cell receptor(TCR)-gemma delta+T cells into human colorectal cancer: flow cytometric analysis of TCR-gamma delta expression in tumor-infiltrating lymphocytes〔J〕．Clin Exp Immunol，1995; 102(1): 167-73.

13 Robertson KD. DNA methylation and human disease〔J〕．Nat Rev Genet，2005; 6(8): 597-61.

〔2015-05-11修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

通訊作者:王靜(1958-)，女，博士，博士生導師，主任醫師，主要從事呼吸內科疾病研究。

〔文章編號〕1005-9202(2015)20-5825-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 068

〔文獻標識碼〕A

〔中圖分類號〕R734. 2