不同組織源性干細胞向神經細胞分化的研究進展*

陳龍　李坤正　肖宗宇

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不同組織源性干細胞向神經細胞分化的研究進展*

陳龍①李坤正②肖宗宇②

【摘要】隨著神經干細胞（NeuralStemCells，NSCs）理論的提出，神經系統疾病的替代治療有了廣闊的應用前景。目前已經證實，許多組織中均存在干細胞，但是根據干細胞的組織來源不同，其向神經細胞分化的能力也有差異。本文就近幾年來不同組織來源的干細胞向神經細胞分化的研究進展作一綜述。

【關鍵詞】神經干細胞；分化；干細胞；研究進展

①青海大學青海西寧810000

②青海大學附屬醫院

干細胞（StemCells，SCs）是指具有無限的自我更新能力和多向分化潛能的一類細胞，具有廣泛的臨床治療應用價值。隨著干細胞理論的提出，為腦梗死、亨廷頓病、阿爾茨海默病等神經系統疾病的細胞移植治療帶來了新的希望。對于干細胞的替代治療，最早提出的是利用神經干細胞（Neural StemCells，NSCs）進行替代，但NSCs取材困難，且存在著較多的倫理學問題，于是不少學者將目光轉向了其他干細胞。目前，研究發現大多數組織中均存在干細胞，根據其部位不同可分別命名為胚胎干細胞（EmbryonicStemCells，ESCs）、骨髓間充質干細胞（BoneMarrowMensenchmalStem Cells，BMSCs）、臍帶血間充質干細胞（Umbilical MensenchmalStemCells，UMSCs）、 脂 肪 干 細 胞（AdiposeTissueStemCells，ATSCs）以及外周血干細胞（PeripheralBloodStemCells，PBSCs）。本文就近些年來不同組織源性干細胞向神經細胞分化情況作一綜述。

1　神經干細胞

神經干細胞（NSCs）是指分布于神經系統的、具有自我更新、無限增殖和多向分化潛能的一類細胞。其在神經系統中主要作為一種儲備細胞，即當神經系統受到損傷時，如急性缺血性腦梗死、神經退行性疾病等，這些干細胞便開始增殖、遷移及分化為相應的組織細胞，以便實現結構和功能的代償。NSCs不僅存在于哺乳動物的胚胎時期，同時也存在于成年動物的腦組織內。其進一步分化可形成神經祖細胞（progenitor）、膠質前體細胞（precursor）及相應的神經元（Neuron），但是物理或化學環境的不同，其向神經細胞分化的能力也不同。Zhao等［1］將小鼠神經前體細胞（NeuralPrecursorCells，NPCs）置于含20ng/mLEGF、10ng/mLbFGF、0.73U/mL肝素的無血清培養基（SFMC）中培養，第9天時發現NPCs分化為星形膠質細胞（astrocyte）、少突膠質細胞（oligodendrocyte）及神經元（Neuron）的比例分別為（59.4±3.6）%、（8.7±0.6）%及（8.2±2.2）%；隨后在該分化條件下施加一直流電場（115v/m），實驗組為施加連續2d的電場，持續2h/d，對照組未施加電場，培養第9天時發現實驗組與對照組Nestin陽性比例分別為（13.6±2.0）%、（30.8±5.2）%，Nestin陽性比例下降提示施加一直流電場后顯著提高了NSCs的分化效率，比較差異有統計學意義（P＜0.05）。此外，在分化所得的神經細胞中，實驗組與對照組中β-tubulinⅢ的表達分別為（16.9±5.3）%和（8.2±2.2）%，比較差異有統計學意義（P＜0.01）；而GFAP及Olig2方面比較差異則無統計學意義（P＞0.05），提示該直流電場可以促進NSCs向神經元方向分化，而對于星形膠質細胞和少突膠質細胞則無明顯影響。此外，物理性因素對干細胞分化也有一定程度的影響［2］。Arulmoli等［3］在誘導成年大鼠NSCs分化時，通過硅酮彈性體薄膜向NSCs施加適當的牽引力，結果發現，NSCs向神經元和星形膠質細胞方向的分化并未受到明顯的影響，而向少突膠質細胞方向的分化明顯減少，比較差異有統計學意義（P=0.001），提示機械牽引可以降低NSCs向少突膠質細胞的分化。盡管對于NSCs的研究已取得很大的成果，但就目前而言，干細胞移植仍然存在著諸多的問題亟待解決，主要包括：（1）如何讓干細胞在體外完整的保存，以及如何控制其進一步分化的機制尚不完善；（2）干細胞移植尚無標準的方法及植入后相應的評價體系仍缺乏；（3）尚無有效的方法針對植入宿主后發生的免疫反應進行干預；（4）如何選擇運載體并使目的基因按預期表達尚無定論。

2　胚胎干細胞

胚胎干細胞（ESCs）是指來源于著床前囊胚期的內細胞團（InnerCellMass，ICM）或早期胚胎原始生殖嵴的原始生殖細胞（PrimordialGermCell，PGC）中的一種多潛能細胞，在體外具有無限增殖和自我更新兩大特征。有研究表明，在一定的誘導環境下，ESCs可定向分化為星形膠質細胞、少突膠質細胞及神經元［4-5］。Noisa等［6］成功將hESCs轉化得到人胚胎干細胞-神經前體細胞（hES-NPS），將所得hES-NPS置于含1%FCS的N2、B27培養基中培養，2周后發現β-tubulinⅢ和GFAP均呈陽性。若在N2培養基中改加弗斯可林（Forskolin）、血小板源性生長因子（PDGF）、三碘甲狀腺氨酸（T3）及維生素C，則少突膠質細胞標志物Olig4呈陽性。此外，研究者將實驗組hES-NPS置于含SHH、FGF8培養基中進行培養，并加入20ng/mLBDNF、20ng/mLGDNF、160μmol/L維生素C及0.5μg/mL層粘蛋白，免疫熒光下可見MAP2/TH陽性成熟神經元樣結構，實驗組與對照組（未加任何生長因子）MAP2/TH雙陽性細胞分別占（10.6±1.2）%及（3.8±1.2）%，同時還證實所得多巴胺神經元表達NURR1，PITX3及EN1，推測其為中腦DA神經元，為hESCs用于臨床提供了理論依據。Lee等［7］抑制了hESCs表面的一種糖蛋白PrPC（Prion Protein），然后將其置于DMEM中培養40d后發現，所得細胞TH、Olig1、GFAP的表達較對照組明顯降低，比較差異有統計學意義（P＜0.05），結果說明抑制PrPC表達時，hESCs向神經元、星形膠質細胞及少突膠質細胞的分化會明顯減少。此外，實驗還觀察了hESCs的分化與具體抑制PrPC時間點的關系，通過觀察Syn、Olig1、GFAP的表達發現，hESCs的分化程度與PrPC被抑制的具體時間點無關，而與抑制持續的時間長短有關，當PrPC被全程抑制時，其Syn、Olig1、GFAP表達均呈陰性。由此說明，hESCs不僅可以分化為神經元、星形膠質細胞及少突膠質細胞，而且在分化過程中PrPC的表達起著重要的作用。此外，Stacpoole等［8］對不同氧濃度環境下hESCs向神經細胞分化的效率作了研究。實驗發現，hESCs誘導形成Hb9陽性運動神經元時，3%氧氣環境下所得細胞的Olig2表達是20%氧氣環境下的2倍。同樣，當誘導其形成中腦多巴胺能神經元時，其表達情況為3%氧環境下所得細胞EN1表達是20%氧環境下的5倍。說明hESCs在誘導分化時，3%氧氣環境下比20%氧氣環境下分化為神經細胞的效率更高。這一結論對ESCs用于臨床有極大的使用價值。但目前將ESCs應用于臨床替代治療仍然存在著一些問題，如ESC的致癌性及是否形成畸胎瘤等。此外，臨床應用ESCs替代治療時，一定會涉及到細胞克隆技術及利用到人類早期胚胎等倫理學問題。諸多問題的限制，使ESC目前僅用于科研，難以臨床推廣。

3　骨髓間充質干細胞

間 充 質 干 細 胞（MensenchmalStemCells，MSCs）是一種具有多向分化潛能的成體干細胞，MSCs來源于中胚層間充質，主要存在于結締組織及間質中，以骨髓組織中含量最高。目前，BMSCs跨胚層分化的具體機制仍然不太清楚，但有研究表明，BMSCs可以向神經細胞分化［9-10］。Hermann等［11］發現人BMSCs不僅可以分化為神經前體細胞，并且能夠高水平表達原神經基因NeuroD1、Neurog2、MSl1、otx1及Nestin，并且前體細胞可繼續分化為星形膠質細胞、少突膠質細胞和神經元。Qiu等［12］將TrkC、NT-3基因分別導入大鼠BMSCs體內，將轉基因BMSCs置于含5%FBS的DMEM中培養14d，結果發現NT-3-MSCs和TrkC-MSCs共培養組Tju-1為（88.25±4.31）%明顯高于其他組，比較差異有統計學意義（P＜0.05），此外，還觀察到突觸結構，推測轉基因BMSCs已向神經元分化。Bonaventura等［13］將人BMSCs置于DMEM中進行懸浮培養，并添加0.5mM異丁甲基黃嘌呤（IBMX）、1mM雙丁酰環磷腺苷（dbcAMP）、20ng/mL人表皮生長因子（hEGF）、40ng/mL堿性成纖維生長因子（bFGF）、10ng/mL神經營養因子（NGF）以及10ng/mL腦源性神經營養因子（BDNF），10d后免疫熒光檢測發現GFAP和Nestin呈陽性，推測有神經細胞形成。Nandy等［14］在誘導hBMSCs向多巴胺能神經元分化時發現，向培養基中加入10ng/mLFGF2所得多巴胺濃度為（69.1±3.9）pg/mL明顯高于加入0.1μmol/L的ATRA所得多巴胺濃度時。此外，兩種培養基中GFAP陽性率分別為5.5% 和8.3%，提示培養基中有星形膠質細胞形成。說明BMSCs在分化為神經細胞的過程中，加入的生長因子不同，其進一步向神經細胞分化的能力也有差異。雖然以上實驗均證明BMSCs可以向神經細胞分化，但BMSCs在誘導分化過程中仍有不足之處，比如其特異性標記物目前尚缺乏、沒有標準化的分離、培養及鑒定的方法等，此外，其分化效率也不太理想，以及分化所得的神經樣細胞，是否具有神經電生理功能等尚處于未知，這些問題仍有待解決。

4　臍帶血間充質干細胞

臍帶血間充質干細胞（UMSCs）是指來源于圍生期組織的一類不同于造血干細胞的、處于未分化狀態的多潛能干細胞，在不同的誘導環境下，UMSCs可以分化為任何組織細胞。盡管UMSCs在形態學上及分化性能上與BMSCs有較多的相似之處，但是由于BMSCs的分化能力受到供者年齡的影響，所以相比之下UMSCs比BMSCs更優越。有研究表明，UMSCs在一定環境下可以分化為神經元、星形膠質細胞及少突膠質細胞［15］。Bonaventura等［13］將hUMSC進行懸浮培養，并向培養基中加入1mol/LdbcAMP、0.5mol/L IBMX、20ng/mLhEGF、40ng/mLbFGF、10ng/mL NGF及10ng/mLBDNF，培養第6天時發現，培養基中呈現出兩類細胞群：一類為膠質細胞，包括星形膠質細胞和少突膠質細胞；另一類在免疫熒光染色證實為神經樣結構，細胞數量較少，體積較小、呈圓形，推測為雙極神經元樣細胞。第10天時，大約70%的細胞表現為GFAP、Nestin陽性。有研究將NTN基因和Lmx1a基因導入hUMSC中，并將其先后置于神經元前體細胞培養基和神經元誘導培養基中進行培養，第7天時發現，神經元前體細胞特異性蛋白（Nestin）表達呈陽性，第21天時，成熟神經元相關的特異性蛋白（NSE、MAP-2、β-tubulinⅢ）及多巴胺能神經元特異性抗原均呈陽性，而且此時Nestin表達明顯降低［16］。提示hUMSC可以分化為神經細胞，而且在分化的過程中，先是形成神經前體細胞，然后再分化為神經元。此外，實驗還將所得多巴胺神經元移植入PD猴模型體內，移植后猴PD癥狀明顯緩解，推測移植的多巴胺神經元分泌了多巴胺。UMSCs在干細胞領域已經占據越來越重要的地位，由于其來源相對簡便，免疫排斥反應相對較弱，無論是在科研領域還是用于臨床，均有著廣闊的應用前景。尤其是對于神經退行性疾病，目前臨床仍無有效的治療方案，UMSCs可以作為臨床治療的種子細胞之一，但治療后的遠期效果尚需觀察，其安全性還有待進一步臨床考證。

5　脂肪源性干細胞

脂肪源性干細胞（ADSCs）是存在于脂肪組織中的、具有無限增殖、多向分化潛能的一類干細胞。ADSCs來源于中胚層，在特定的環境下，可以分化為骨組織、軟骨組織、肌肉組織和脂肪組織及包括神經組織在內的多種組織細胞。ADSCs體外培養相對簡單，增殖周期短、來源較為豐富，且無倫理學及法律方面的限制，是一種理想的備選細胞。自2001年Zuk等［17］發現并命名脂肪干細胞以來，ADSCs因為其眾多優點而成為了繼骨髓源干細胞以后的又一大熱門研究。近年來，大量的實驗證明ADSCs可以向神經細胞分化［18］。Wrage等［19］將小鼠ADSCs首先置于含10%FBS的DMEM培養基中培養3d，3d后更換為10%FBS的NDM培養基，并向培養基中加入120μmol/L吲哚美辛、3mg/L胰島素、300μmol/LIBMX，結果發現可檢測到Nestin、GFAP、NSE及Tuj1，提示得到了神經樣細胞。隨后，應誠誠等［20］在Wrage實驗的基礎上進行了改善，向培養基中加入EGF、bFGF 及BDNF培養后發現，GFAP、β-tubulin表達陽性率分別為（74.0±3.3）%和（65.3±2.1）%。此外，Han等［21］將hADSCs和hBMSCs向神經元分化的能力進行了比較。實驗將hADSCs和hBMSCs先置 于含1%FCS、10ng/mLbFGF和10ng/mLEGF的H-DMEM培養基中培養24h，然后在含20ng/mL BFGF、20g/mLEGF、20ng/mL睫狀神經營養因子（CiliaryNeurotrophicFactor，CNTF）和6mg/mLRA 的H-DMEM中培養30d后觀察發現：在0～7d，hADSCs與hBMSCs的MSCs形態特征開始逐漸消失，Nestin呈高表達狀態，兩者尼氏體含量分別是（2.1±2.5）%、（16.4±2.1）%；7d后，Nestin表達逐漸減少，hADSCs與hBMSCs中β-tubulinⅢ表達最高水平分別是（61.7±1.9）%和（63.9±0.8）%，說明hADSCs已經向神經細胞分化，而且與hBMSCs相比，其分化為成熟神經元的速度相對較慢。雖然目前關于ADSCs的分化研究較多，但是對于ADSCs用于臨床替代治療仍然存在許多問題，比如脂肪干細胞分化的機制仍不明確、如何持續保留ADSCs分化特性及移植的細胞是否有致瘤性等問題。然而，雖然存在眾多問題，但其有著來源豐富、無倫理學及法律方面的限制等優勢，這些研究必將被深入細化，隨著細胞分子生物學的迅速發展，ADSCs在干細胞領域的移植治療必定有著廣闊的前景，無可替代。

6　外周血干細胞

外周血干細胞（PBSCs）是指釋放到血液中的造血干細胞，通常僅占干細胞0.06%。外周血中造血干細胞即外周血干細胞同樣具有干細胞的特點，具有分離獲取較為簡單、免疫源性相對較弱、無倫理學爭議等一系列優點。目前已有研究的PBSCs主要為：CD34+造血干細胞（hematopoieticstemcells，HSCs）、外周血間充質干細胞（PBMSCs）和單核細胞（peripheralbloodmononuclearcells，PBMCs）。文獻［22］報道，PBSCs在適當的微環境下可以分化為神經細胞。Wang等［23］將人外周血CD34+細胞通過病毒轉染技術及培養后得到NSC，將所得NSC置于適宜的培養基中培養一段時間后分別得到了神經元（β-tubulinⅢ+）、星形膠質細胞（GFAP+）和少突膠質細胞（O4+），并證實β-tubulinⅢ（+）神經元為谷氨酸能神經元、GABA能神經元及多巴胺能神經元。Nichols等［24］從人外周血中分離出CD133+、ABCG2+、CXCR4+MSCs， 將 其 置 于DMEM-LG中培養，并向培養基中添加10%人血清、10-3M β-ME、5×10-7MRA，第7天時發現，實驗組較對照組MSCs體積明顯延長，并伴有較多的細胞突起，TH（45.2±9.7）%、Tuj1（35.23±7.9）% 和NEUN（28.2±11.1）%均明顯高于對照組，GFAP （4.88±2.4）%稍高于對照組的（3.49±0.7）%，說明hPBMSCs在適宜的誘導環境下可向神經元、星形膠質細胞及少突膠質細胞方向分化。目前對于PBSCs的研究相對較少，仍有眾多問題亟待解決，比如如何提高PBSCs在體內存活率，如何有效的控制其定向分化，分化所得的神經樣細胞是否具備電生理功能及PBSCs的安全性如何等。盡管如此，隨著PBSCs研究的逐步深入，以及其操作相對簡單、易獲取且無倫理學限制等一系列優點，必將為基礎及臨床研究所青睞，成為神經系統疾病治療中的另一個核心。

7　其他

除以上所述的干細胞外，近些年來造血干細胞（Hematopoieticstemcells）、表皮干細胞（Epidermal stemcells）、羊水源性干細胞（Humanamnioticfluid stemcells）和子宮內膜干細胞（Humanendometrium stemcells）等向神經細胞分化也有報道［13］。

綜上所述，盡管ESCs為干細胞中最為典型的代表，但由于其取材于胚胎早期階段，及倫理學和法律上的一些限制，致其科研及臨床應用并不廣泛。BMSCs由于其體外可擴增，加之取材相對容易，目前被眾多學者所接受。但是對于BMSCs目前主要存在兩大問題：一是骨髓中可獲取的BMSCs數量太少，二是BMSCs的分化能力隨著供者的年齡增長會逐漸降低［25］。UMSCs是介于ESCs與BMSCs之間的一類干細胞，其來源相對豐富，獲取相對容易，且獲取過程中無侵襲性及副作用。此外，較其他干細胞而言，UMSCs分化潛能較高，是目前干細胞科研及臨床治療的最佳選擇。

參考文獻

［1］ZhaoH，SteigerA，NohnerM，etal.Specificintensitydirect current（DC）electricfieldimprovesneuralstemcellmigrationand enhancesdifferentiationtowardsβⅢ-Tubulin+Neurons［J］.PLOS One，2015，10（6）：e129625.

［2］TylerWJ.Themechanobiologyofbrainfunction［J］.NatureReviews Neuroscience，2012，13（12）：867-878.

［3］ArulmoliJ，PathakMM，McdonnellLP，etal.Staticstretch affectsneuralstemcelldifferentiationinanextracellularmatrixdependentmanner［J］.ScientificReports，2015，17（5）：8499.

［4］HesterME，MurthaMJ，SongS，etal.Rapidandefficient generationoffunctionalmotorneuronsfromhumanpluripotent stemcellsusinggenedeliveredtranscriptionfactorcodes［J］. MolecularTherapy，2011，19（10）：1905-1912.

［5］AmorosoMW，CroftGF，WilliamsDJ，etal.Acceleratedhighyieldgenerationoflimb-innervatingmotorneuronsfromhuman stemcells［J］.JournalofNeuroscience，2013，33（2）：574-586.

［6］NoisaP，RaivioT，CuiW.Neuralprogenitorcellsderivedfrom humanembryonicstemcellsasanoriginofdopaminergic neurons［J］.StemCellsInternational，2015，2015（153）：647437.

［7］LeeYJ，BaskakovIV.Thecellularformoftheprionprotein guidesthedifferentiationofhumanembryonicstemcellsinto neuron-，oligodendrocyte-，andastrocyte-committedlineages［J］. Prion，2014，8（3）：266-275.

［8］StacpooleSR，BilicanB，WebberDJ，etal.Efficientderivation ofNPCs，spinalmotorneuronsandmidbraindopaminergic neuronsfromhESCsat3%oxygen［J］.NatureProtocols，2011，6 （8）：1229-1240.

［9］TsaiHL，DengWP，LaiWF，etal.Wntsenhanceneurotrophininducedneuronaldifferentiationinadultbone-marrow-derived mesenchymalstemcellsviacanonicalandnoncanonicalsignaling pathways［J］.PLoSOne，2014，9（8）：e104937.

［10］NeirinckxV，AgirmanG，CosteC，etal.Adultbonemarrow mesenchymalandneuralcreststemcellsarechemoattractive andacceleratemotorrecoveryinamousemodelofspinalcord injury［J］.StemCellResearch&Therapy，2015，6（1）：211.

［11］HermannA.Efficientgenerationofneuralstemcell-likecells fromadulthumanbonemarrowstromalcells［J］.JournalofCell Science，2004，117（19）：4411-4422.

［12］QiuX，JinH，ZhangR，etal.Donormesenchymalstem cell-derivedneural-likecellstransdifferentiateintomyelinformingcellsandpromoteaxonregenerationinratspinalcord transection［J］.StemCellResearch&Therapy，2015，6（1）：105.

［13］BonaventuraG，ChamayouS，LiprinoA，etal.Different tissue-derivedstemcells：acomparisonofneuraldifferentiation capability［J］.PLOSOne，2015，10（10）：e140790.

［14］NandySB，MohantyS，SinghM，etal.Fibroblastgrowth factor-2aloneasanefficientinducerfordifferentiationof humanbonemarrowmesenchymalstemcellsintodopaminergic neurons［J］.JournalofBiomedicalScience，2014，21（1）：83.

［15］LimJ，JeongC，JunJ，etal.Therapeuticeffectsofhuman umbilicalcordblood-derivedmesenchymalstemcellsafter intrathecaladministrationbylumbarpunctureinaratmodelof cerebralischemia［J］.StemCellResearch&Therapy，2011，2 （5）：38.

［16］YanM，SunM，ZhouY，etal.Conversionofhumanumbilical cordmesenchymalstemcellsinWharton’sJellytodopamine neuronsmediatedbythelmx1aandneurturinInvitro：potential therapeuticapplicationforparkinson’sdiseaseinarhesus monkeymodel［J］.PLoSOne，2013，8（5）：e64000.

［17］ZukPA，ZhuM，MizunoH，etal.Multilineagecellsfrom humanadiposetissue：implicationsforcell-basedtherapies［J］. TissueEngineering，2001，7（2）：211-228.

［18］ZhouF，GaoS，WangL，etal.Humanadipose-derivedstem cellspartiallyrescuethestrokesyndromesbypromotingspatial learningandmemoryinmousemiddlecerebralarteryocclusion model［J］.StemCellResearch&Therapy，2015，6（1）：92.

［19］WragePC，TranT，ToK，etal.Theneuro-glialpropertiesof adipose-derivedadultstromal（ADAS）cellsarenotregulated bynotch1andarenotderivedfromNeuralcrestlineage［J］.PLoS One，2008，3（1）：e1453.

［20］應誠誠，胡萬里.脂肪干細胞向神經細胞誘導分化研究進展［J］.武漢大學學報（醫學版），2012，33（2）：293-296.

［21］HanC，ZhangL，SongL，etal.Humanadipose-derived mesenchymalstemcells：abettercellsourcefornervoussystem regeneration［J］.ChinMedJ（Engl），2014，127（2）：329-337.

［22］ShyuWC.Intracerebralperipheralbloodstemcell（CD34+）implantationinducesneuroplasticitybyenhancingbeta1integrinmediatedangiogenesisinchronicstrokerats［J］.Journalof Neuroscience，2006，26（13）：3444-3453.

［23］WangT，ChoiE，MonacoMC，etal.Derivationofneuralstem cellsfromhumanadultperipheralCD34+cellsforanautologous modelofneuroinflammation［J］.PLoSOne，2013，8（11）：e81 720.

［24］NicholsJE，NilesJA，DewittD，etal.NeurogenicandneuroprotectivepotentialofanovelsubpopulationofperipheralbloodderivedCD133+ABCG2+CXCR4+mesenchymalstemcells：developmentofautologouscell-basedtherapeuticsfortraumatic braininjury［J］.StemCellResearch&Therapy，2013，4（1）：3.

［25］HermannA，ListC，HabischHJ，etal.Age-dependent neuroectodermaldifferentiationcapacityofhumanmesenchymal stromalcells：limitationsforautologouscellreplacement strategies［J］.Cytotherapy，2010，12（1）：17-30.

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.13.040

*基金項目：青海省科技創新能力促進計劃項目（2015-ZJ-943Q）

通信作者：李坤正

收稿日期：（2016-01-18）（本文編輯：李穎）