INF-γ、ADA和ESAT-6在結核性腦膜炎診斷中的應用價值

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INF-γ、ADA和ESAT-6在結核性腦膜炎診斷中的應用價值

劉霞1，覃玫2，唐麗坤2

(1.桂林市人民醫院 檢驗科；2.神經內科,廣西 桂林541002)

結核性腦膜炎(結腦)是由結核桿菌引起的腦膜非化膿性炎癥，其臨床癥狀不典型，但病情進展迅速，死亡率高，及時診斷和治療是減輕后遺癥和降低死亡率的關鍵所在。INF-γ、ADA和ESAT-6在結腦患者腦脊液中的異常表達對其診斷有輔助診斷價值，現報道如下。

1資料與方法

1.1研究對象所選研究對象均為桂林市人民醫院2010年1月-2013年12月間住院的患者，結腦組65例，男34例，女31例；年齡14-76歲，平均(36+18.5)歲，其診斷符合文獻[1]的標準。對照組30例為本院同期住院的患者，排除中樞神經系統感染和腫瘤，男16例，女14例，年齡14-70歲，平均(33.5+14.5)歲。

1.2研究方法

1.2.1標本采集和處理患者于入院后24 h內無菌條件下腰椎穿刺留取腦脊液2 ml，3 000 r/min離心10分鐘，取上清液貯存于-20℃冰箱保存，結腦組恢復期再次取樣備檢。

1.2.2檢測方法INF-γ和ESAT-6檢測用ELISA方法，ADA檢測用酶動力學終點法。

2結果

2.1結腦組急性期、恢復期和對照組INF-γ、ADA和ESAT-6檢測結果分析結腦組急性期INF-γ、ADA和ESAT-6表達水平顯著高于其恢復期表達水平，也顯著高于對照組表達水平(P<0.05)，見表1。

表1　結腦組急性期、恢復期和對照組INF-γ、ADA和ESAT-6檢測結果

注:結腦組急性期與恢復期和對照組比較,*P<0.05

2.2結腦患者重癥組、輕癥組和對照組INF-γ、ADA和ESAT-6檢測結果分析結腦組中重癥組INF-γ、ADA和ESAT-6表達水平顯著高于輕癥組，輕癥組INF-γ、ADA和ESAT-6表達水平顯著高于對照組(P<0.05)，見表2。

表2　結腦組中輕癥組、重癥組與對照組INF-γ、ADA

注:重癥組與輕癥組比較,*P<0.05；輕癥組與對照組比較,ΔP<0.05

2.3INF-γ、ADA和ESAT-6三個指標單個檢測、二聯檢測和三聯檢測的靈敏性分析單個指標檢測靈敏性較低，二聯檢測和三聯檢測能提高其靈敏性，見表3。

表3　三項指標單獨和聯合檢測結果

3討論

結腦的診斷主要依據典型的臨床表現，腦脊液涂片找結核桿菌和結核菌培養，頭顱CT輔助檢查等，但許多病例癥狀不典型，涂片找結核桿菌陽性率低，培養時間長等缺點導致漏診和誤診。近年來，免疫學的發展發現一些細胞因子和蛋白在結腦疾病發生和發展中發揮重要作用。

干擾素-γ(INF-γ)是由T淋巴細胞和大顆粒淋巴細胞在結核抗原刺激后產生的一種細胞因子，是免疫調節蛋白，其參與機體對結核桿菌細胞免疫，活化巨噬細胞及其溶酶體活性，促進結核桿菌抗原遞呈[2]。INF-γ的免疫功能具有雙重效應，高濃度的INF-γ加強免疫反應，導致中樞神經系統損傷；另一方面，免疫效應有利于機體對抗原的清除,起保護機體的作用[3]。趙日光等[4]研究表明，結腦組腦脊液中INF-γ濃度顯著高于病毒性腦膜炎組，敏感性為86.5%,特異性為94.2%。

腺苷脫氨酶(ADA)是人體嘌呤類核苷代謝中的重要酶，可催化腺苷產生不可逆的脫氨基反應，其功能與淋巴細胞的激活和分化有關。Chotmongkol[5]通過研究177例患者腦脊液中ADA的活性，認為CSF中ADA水平是早期診斷結腦的重要指標。朱敏等[6]研究表明，結腦組腦脊液中ADA的活性明顯高于對照組，同時應用ROC曲線對ADA在診斷結腦時的臨床準確性進行了評價，當取COV 7.75U/L，其診斷的敏感性為87%，特異性為94.1%。

早期分泌性靶抗原-6(ESAT-6)是結核桿菌早期分泌性低分子蛋白，主要存在于致病性結核桿菌，而不存在于牛型分枝桿菌及大部分環境中的分枝桿菌中。Murakami S等[7]認為ESAT-6可以作為非結核病流行區結核桿菌感染的標志。何俊瑛等[8]用免疫組化法對結腦患者進行了腦脊液單核細胞內ESAT-6檢測，發現其靈敏度為70%，特異度達到95%。楊笑等[9]研究42例結腦患者38例腦脊液單核細胞內ESAT-6檢測呈陽性反應，陽性率為90.5%。張昆南等[10]采用腦脊液抗原負壓濃縮技術檢測ESAT-6，敏感性為91.4%，特異性為94.3%。

本研究中結腦患者急性期INF-γ、ADA和ESAT-6表達水平明顯升高，顯著高于其恢復期表達水平，也顯著高于對照組表達水平(P<0.05)，恢復期與對照組間表達無明顯區別(P>0.05)。重癥組INF-γ、ADA和ESAT-6表達水平顯著高于輕癥組，輕癥組INF-γ、ADA和ESAT-6表達水平顯著高于對照組(P<0.05)。單獨檢測其中一項，敏感性、特異性和準確性最高為81.54%、90.00%和84.21%；二項聯合檢測，敏感性、特異性和準確性最高為87.69%、86.67%和85.26%；三項聯合檢測，敏感性、特異性和準確性高達92.31%、80.00%和88.42%。

總之，INF-γ、ADA和ESAT-6在結腦患者腦脊液中表達水平顯著升高，其表達水平的動態變化對疾病的診斷和病情的評估具有重要的臨床意義，聯合檢測能提高陽性檢出率。

參考文獻：

[1]中華醫學會．臨床診療指南(結核病分冊)[M]．北京：人民衛生出版社．2005：1-55．

[2]朱飛,張家堂,邢小微,等.IL-8、MMP-9、INF-γ的檢測對結核性腦膜炎及病毒性腦膜炎發病的意義[J].中華神經醫學雜志,2012,11(8):838.

[3]李志惠,崔丹,趙杰,等.結核性胸膜炎胸液結核分枝桿菌特異性INF-γ與ADA的關系[J].河北醫藥,2013,35(21):3232.

[4]趙日光,姜彬.結核性腦膜炎腦脊液γ-干擾素檢測的臨床價值[J].華北煤炭醫學院學報,2011,13(5):604.

[5]Chotmongkol V,Y Teerajetgul,C Yadwut,et al．Cerebrospinal fluid adenosine deaminase activity for the diagnosis of tuberculoua meningitis in adults[J]．Southeast Asian J Trop Med Public Health,2006,37(4):948.

[6]朱敏,范玉美,陳園園.6種標記物診斷結核性腦膜炎的臨床價值[J].浙江中西醫結合雜志,2009,19(1):18.

[7]Murakami S，Takeno M，0ka H，et al.Diagnosis of tuberculous meniningitis due to detection of ESAT-6 specific gamma interfero production in cerebrospinal fluid enzyme-linked immunospot assay[J]．Clin Vaccine Immunol，2008,15(5)：897．

[8]何俊瑛,劉士甫,朱艷霞,等．腦脊液單核細胞內ESAT-6檢測對結核性腦膜炎的診斷意義[J]．腦與神經疾病雜志,2010,18(3):209.

[9]楊笑,郭旻,謝鵬.腦脊液單核細胞內ESAT-6對結核性腦膜炎的診斷價值[J].中國神經精神疾病雜志,2012,38(6):330.

[10]張昆南,許自強,吳曉牧,等.腦脊液中檢測結核分枝桿菌特異性抗原對結核性腦膜炎的診斷意義[J].中華神經科雜志,2011,44(2):86.

文章編號：1007-4287(2016)01-0047-04

(收稿日期：2014-08-20)