肺結核患者外周血輔助性T細胞亞群相關細胞因子臨床意義初探

李曉紅,佟冬冬

(1.長春市傳染病醫院,吉林 長春130123；2.吉林大學第一附屬醫院,吉林 長春130021)

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肺結核患者外周血輔助性T細胞亞群相關細胞因子臨床意義初探

李曉紅1,佟冬冬2*

(1.長春市傳染病醫院,吉林 長春130123；2.吉林大學第一附屬醫院,吉林 長春130021)

結核分枝桿菌感染宿主后發病與否，不僅與感染細菌的數量和毒力等因素相關，同時還取決于機體的免疫功能狀態。目前認為機體的抗結核免疫反應主要通過T淋巴細胞介導巨噬細胞的細胞免疫反應[1]。為明確CD4+T淋巴細胞及其亞型相關細胞因子與結核病進展的相關性,我們應用流式細胞術檢測肺結核患者CD4+T淋巴細胞計數,采用流式細胞微球陣列技術(CBA)檢測其分泌細胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10的含量，探討其經有效抗結核治療后的臨床意義?，F將研究結果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料肺結核患者組：選取2010年1月-2011年12月于我院診斷治療的初治肺結核患者給予常規抗結核化療方案進行治療，即2HRZE/4HR(H為異煙肼，R為利福平，Z為吡嗪酰胺，E為乙胺丁醇)，6個月后達臨床治愈(癥狀均緩解，痰菌陰轉，X線胸片提示結核病灶明顯吸收)。共92例，其中男62例，女30例，年齡在18-57歲之間，平均年齡為28.84±11.06歲。所有患者均符合中華醫學會結核病學分會制定的《肺結核診斷及治療指南》診斷標準[2]。所有患者均排除心、肝、腎等臟器嚴重疾病或自身免疫性疾病的患者，未曾使用免疫調節劑，化療過程中可依據患者的臨床表現給予適當的保肝藥物及復合維生素輔助治療。健康人群對照組：選取健康人群30例，其中男20例，女10例，年齡19-58歲之間，平均年齡為30.3±11.88歲。兩組在性別構成和平均年齡方面比較均無統計學意義(P>0.05)，具有組間可比性。

1.2試驗方法肺結核患者組于治療前、治療后2個月以及化療后6個月，對照組空腹抽取靜脈血4-5 ml進行檢測。CD4+T淋巴細胞檢測采用抗凝全血標本;選用試劑為BD MultiTESTTMCD3/CD8/CD45/CD4 Kit(美國 BD 公司,批號:84305)Thl/Th2相關細胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10檢測選用試劑為BDTMCBAHuman Thl/Th2 Cytokine II Kit(美國 BD 公司,批號:88810)。使用美國BD公司的BD FACSCalibur流式細胞儀于吉林大學公共衛生學院實驗中心進行檢測，試驗方法嚴格按照試劑盒所提供的說明書操作。

1.3統計方法所有臨床研究數據均采用SPSS13.0軟件t檢驗進行統計學分析，并以P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異非常顯著。

2結果

2.1患者組與對照組的CD4+T淋巴細胞及其亞型Th1/Th2細胞相關細胞因子水平比較

與對照組健康人群相比，肺結核患者CD4+T淋巴細胞計數降低，INF-γ水平降低，差異具有統計學意義(P<0.05)；IL-10水平明顯提高，經統計學分析，有顯著差異(P<0.01)。結果見表1。

表1　實驗組與對照組的比較±s)

注：與對照組相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01

2.2肺結核患者在抗結核治療過程中CD4+T淋巴細胞及相關細胞因子水平動態觀察及比較

患者在強化治療(2個月后)、療程結束(6個月后)測定CD4+T淋巴細胞計數及細胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10水平，分別與入院時測定情況進行比較及統計學分析。治療2個月后，CD4+T淋巴細胞計數、INF-γ、IL-2、IL-4無明顯變化，經統計學分析無明顯差異；IL-10水平較前下降，其差異具有統計學意義(P<0.05)。治療6個月后，CD4+T淋巴細胞計數明顯上升，IL-10水平明顯下降，經統計學分析有顯著差異(P<0.01)；INF-γ水平上升、IL-4水平下降，差異具有統計學意義(P<0.05)；IL-2水平上升，經統計學分析有明顯差異(P<0.01)。結果見表2。

表2　治療過程中CD4+T淋巴細胞及其亞型Th1/Th2細胞相關細胞因子水平的比較±s)

注：與入院時相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01

3討論

有關結核病患者機體免疫功能方面的研究,是近幾年來國內外學者研究的熱點之一。結核病免疫是T淋巴細胞介導的細胞免疫,CD4+T淋巴細胞對結核病的發病和演變具有決定性意義。CD4+T淋巴細胞因分泌不同的細胞因子,分型為Th1和Th2細胞,其平衡狀態與疾病的轉歸和愈后密切相關[1]。Th1細胞主要通過分泌IFN-γ、IL-2等細胞因子發揮相應的生物學效應，在細胞免疫中發揮極為重要的作用。IFN-γ通過促進Th1細胞和巨噬細胞參與的炎癥反應，抑制Th2細胞和嗜酸性粒細胞參與的炎癥反應而加強細胞免疫應答。Th2細胞主要通過分泌IL-4、IL-10等細胞因子發揮相關生物學效應。IL-4通過抑制巨噬細胞的活化，阻斷INF-γ激活巨噬細胞介導的免疫應答[3]。由此可見，Th1/Th2應答平衡對于結核病的發生、發展及轉歸起著決定性的作用。

本研究主要是針對初治結核病患者的CD4+T細胞計數以及Th1和Th2細胞相關細胞因子進行測定觀察，從而對于患者的免疫功能進行分析判定。結果顯示：92例肺結核患者外周血CD4+T細胞的水平較健康對照組低,提示細胞免疫功能降低；通過INF-γ、IL-2水平降低可判定Th1細胞水平降低，提示保護性細胞免疫功能抑制；IL-4、IL-10水平明顯提高可判定Th2細胞水平增加?？梢娀顒有苑谓Y核患者細胞免疫功能降低，Th1/Th2應答平衡失衡。此結論與相關學術報道[4,5]結論一致。在抗結核治療過程中動態觀察并與治療前進行對比分析，有效的抗結核治療有助于細胞免疫功能逐漸恢復。表2數據顯示，活動性肺結核患者在抗結核強化治療后，CD4+T細胞計數增加(P<0.05)，IL-10數值下降(P<0.05)；經有效抗結核治療6個月后，CD4+T細胞計數明顯增加(P<0.01)，INF-γ水平升高(P<0.05)、IL-2水平升高(P<0.01)，IL-2數值下降(P<0.05)，IL-10數值下降(P<0.01).此組觀察病例均為抗結核治療取得良好療效的病例，故可推斷：活動性肺結核經有效抗結核治療后免疫功能逐漸恢復，Th1細胞水平增加，Th2細胞水平降低，Th1/Th2應答平衡平衡逐漸恢復。

綜上所述，活動性肺結核患者細胞免疫功能降低，Th1/Th2應答平衡失衡，Thl細胞的功能降低，Th2細胞功能增強；經有效抗結核治療后，細胞免疫功能逐漸恢復。由此可見，外周血CD4+T細胞計數以及Th1和Th2細胞相關細胞因子水平的動態監測有助于對肺結核患者預后情況的正確評價。然而，免疫細胞和細胞因子的作用是復雜的和多方面的，其具體機制仍需進一步深入研究。

參考文獻：

[1]謝惠安,陽國太,林善梓,等主編.現代結核病學[M].北京：人民衛生出版社，2000.136-235.

[2]中華醫學會結核病學分會.肺結核診斷和治療指南[J].中華結核和呼吸雜志,2001,24(2):70.

[3]Hartmann P,Plum G.Immunological defense mechanisms in tuberculosis and MAG-infection[J].Diagn Microbial Infect Dis,1999,34(7):147.

[4]張賢蘭，呂江青，林兆原，等.肺結核患者CD4+T淋巴細胞凋亡及相關細胞因子水平變化[J].廣州醫學，2008，29(10)：1664.

[5]譚耀駒，張言斌，馮蝶儀，等.初治肺結核患者外周血Th1/Th2 細胞的測定及臨床意義[J].中華結核和呼吸雜志，2004，27(6)：385.

文章編號：1007-4287(2016)06-1011-02

*通訊作者

(收稿日期：2015-08-19)