ILT4與Ki67在上皮性卵巢癌淋巴結轉移患者中的表達情況

張彩霞　王麗萍　武建軍　趙靈燕

內蒙古醫科大學附屬醫院1婦產科，2消化科，呼和浩特0100593內蒙古醫科大學研究生學院呼和浩特010059

4內蒙古醫科大學公共衛生學院呼和浩特010059

ILT4與Ki67在上皮性卵巢癌淋巴結轉移患者中的表達情況

張彩霞1王麗萍2#武建軍3趙靈燕4

內蒙古醫科大學附屬醫院1婦產科，2消化科，呼和浩特0100593內蒙古醫科大學研究生學院呼和浩特010059

4內蒙古醫科大學公共衛生學院呼和浩特010059

目的探討免疫球蛋白樣轉錄子4（ILT4）與Ki67在上皮性卵巢癌淋巴結轉移患者中的表達情況。方法回顧性分析70例上皮性卵巢癌患者，通過淋巴結轉移情況分為淋巴結轉移組（37例）和無淋巴結轉移組（33例），觀察兩組患者ILT4、Ki67的表達情況。結果免疫組織化學結果顯示，淋巴結轉移組中，卵巢癌組織中ILT4表達水平低于無淋巴結轉移組，Ki67表達水平高于無淋巴結轉移組（P＜0.05）；淋巴結轉移組ILT4陽性率35.14%（13/37）低于無淋巴結轉移組的84.85%（28/33），差異有統計學意義（P＜0.05）；淋巴結轉移組Ki67陽性率表達81.08%（30/37）高于無淋巴結轉移組的45.45%（15/33），差異有統計學意義（P＜0.05）。結論在上皮性卵巢癌淋巴結轉移患者中，ILT4水平表達降低，Ki67表達升高，可將其作為診斷病情的指標。

上皮性卵巢癌；淋巴結轉移；免疫球蛋白樣轉錄子4；Ki67

Oncol Prog，2016，14（6）

上皮性卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤，該病發病隱匿，易復發轉移，并且在臨床上缺少早期診斷方法，若未及時能作出早期診斷，則預后較差［1-2］。在上皮性卵巢癌患者中，淋巴結轉移對腫瘤分期及評估預后有重要意義［3-4］。研究顯示，免疫球蛋白樣轉錄子4（immunoglobulin-like transcript 4，ILT4）和Ki67與淋巴結轉移存在密切聯系，但在婦科腫瘤中對于這兩種指標的研究較少［5］。本研究對上皮性卵巢癌患者中ILT4與Ki67表達與淋巴結轉移的相關性進行了研究，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2014年11月至2015年11月在我院通過病理學診斷確診為上皮性卵巢癌的患者70例。納入標準：①通過國際婦產科聯盟（FIGO）中對卵巢惡性腫瘤分期結果均為Ⅲ、Ⅵ期［6］；②均為初次發病，且是散發病例。根據病理證實是否存有淋巴結轉移，將患者分為淋巴結轉移組37例和吳林壩轉移組33例。年齡34～72歲，平均為（50.49±3.71）歲，其中漿液性癌18例，黏液性癌16例，子宮內膜樣癌3例，腫瘤分期Ⅲ期30例，Ⅵ期7例；無淋巴結轉移組患者年齡35～71歲，平均為（51.19±3.69）歲，漿液性癌17例，黏液性癌14例，子宮內膜樣癌2例，腫瘤分期Ⅲ期26例，Ⅵ期7例。而且一般資料特征比較，差異無統計學意義（P＞0.05），可以進行對比分析。

1.2方法

采取所有患者卵巢癌組織，使用4%多聚甲醛固定，石蠟包埋切片。使用免疫組化二步法染色，切片常規脫蠟，在4%H2O2中進行孵育10 min，水浴95℃，15 min抗原修復，加入200倍稀釋的一抗之后，4℃過夜；PBS沖洗2～3次，滴入Polymer Helper試劑，37℃孵育20 min；PBS沖洗2～3次，滴入IgG；37℃孵育20 min，PBS沖洗2～3次；DAB顯色，自來水沖洗干凈，復染、脫水、透明和封片等操作。最后采用PBS進行陰性對照，使用光學顯微鏡進行觀察。其中鼠抗人Ki67單克隆抗體由美國Changdao公司進行提供，鼠抗人ILT4單克隆抗體由美國Sunbio公司提供。通過染色的有無及強弱情況進行分級，無染色情況為陰性（-），部分腫瘤細胞發生染色為弱陽性（+），所有腫瘤細胞發生染色為強陽性（++）。并結合HE染色，選擇5個無壞死細胞的視野，使用圖像分析團建對陽性細胞進行計數，計算每個視野中每1000個細胞中陽性細胞所占的百分比，表示陽性細胞率表達情況。

1.3統計學分析

數據用SPSS1-8.0軟件包進行處理，計量資料用均數±標準差（±s）表示，并采用t檢驗，計數資料的比較采用χ2檢驗，等級資料的比較采用秩和檢驗，以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2　結果

淋巴結轉移組患者卵巢癌組織中ILT4表達水平低于無淋巴結轉移組，差異有統計學意義（P＜0.05）。淋巴結轉移組卵巢癌組織中Ki67表達水平高于無淋巴結轉移組，差異有統計學意義（P＜0.05）。（表1）

表1　兩組患者ILT4和Ki67表達水平（%，±s）

表1　兩組患者ILT4和Ki67表達水平（%，±s）

組別淋巴結轉移組（n=37）無淋巴結轉移組（n=33）ILT4表達15.67±2.15 31.24±6.81 Ki67表達38.87±11.23 24.52±6.19

在淋巴結轉移患者中，ILT4（-）的患者高達64.86%（24/37），ILT4（+）及ILT4（++）的患者依次減少；而無淋巴結轉移組ILT4（+）患者占54.55%（18/33），其次是ILT4（++）和ILT4（-），兩組ILT4強弱表達情況經秩和檢驗分析，差異有統計學差異（P＜0.05）。有淋巴結轉移組患者ILT4陽性率35.14%（13/37），低于無淋巴結轉移組患者的84.85%（28/33），差異有統計學意義（P＜0.05）。（表2）

表2　兩組患者ILT4表達強弱及陽性率比較［n（%）］

2.3兩組患者Ki67表達強弱及陽性率比較

在淋巴結轉移患者中，Ki67（+）患者占56.76%（21/37），其次是Ki67（++）和Ki67（-）；無淋巴結轉移組中，Ki67（-）患者占54.54%（18/33），其次是Ki67（+）和Ki67（++），兩組Ki67強弱表達情況經秩和檢驗分析，差異有統計學差異（P＜0.05）。有淋巴結轉移組患者Ki67陽性率81.08%（30/37），高于無淋巴結轉移組患者的45.45%（15/33），差異具有統計學意義（P＜0.05）。（表3）

表3　兩組患者Ki67表達強弱及陽性率［n（%）］

3　討論

卵巢的惡性腫瘤在早期診斷上較為困難，約70%的患者在發現時已經屬腫瘤晚期，致使預后差，且病死率高［7-8］。淋巴結轉移是上皮性卵巢癌中臨床分期的重要依據，也是指導治療及判斷預后的重要因素。研究表明，在腫瘤細胞中，某些分子表達與否和水平高低與淋巴結是否轉移之間存在著一定聯系［9］。因此在上皮性卵巢癌中，尋找可靠的指標對病情分期的判斷及預后都具有重要的臨床意義。

ILT4是ILTs家族中的重要成員，屬抑制性受體，在單核細胞、樹突狀細胞、T淋巴細胞和自然殺傷細胞中，都有不同程度的表達，調節機體免疫反應，且和多種組織相容性復合體分子等相互結合，向細胞內傳達信號，抑制細胞免疫功能。研究顯示，ILT4與其配體結合，通過細胞內免疫絡氨酸抑制基序的傳遞下發出負調節信號，從而抑制淋巴細胞的活化和增殖情況［10］。研究顯示，ILT4在肺癌組織中有不同程度表達，且和肺癌的發生進展有密切聯系［11-12］。采用免疫組化法檢測ILT4表達水平，結果顯示，ILT4隨上皮性卵巢癌的發展，表達強度逐漸下降，在存在淋巴結轉移患者的卵巢癌組織中ILT4表達水平低于無淋巴結轉移的患者，且陽性率的表達情況也低于無淋巴結轉移的患者，差異均有統計學意義。表明ILT4與上皮性卵巢癌發生發展有緊密關系，可成為上皮性卵巢癌臨床診斷的指標。

Ki67是反應惡性腫瘤細胞的增殖活性重要分子標志物，是目前對腫瘤增殖活性和增殖速率檢測的可靠指標。腫瘤的增殖、浸潤轉移及預后間關系密切，Ki67的表達對細胞增殖及患者預后評估具有重要臨床意義。研究顯示，在上皮性卵巢癌患者中，Ki67表達水平高于良性卵巢上皮性腫瘤患者，且隨著腫瘤分期的增高，Ki67表達水平也呈上升趨勢［13-14］。本研究結果顯示，淋巴結轉移患者卵巢癌組織中Ki67表達水平高于未發生淋巴結轉移的患者，且陽性率高于未發生淋巴結轉移的患者，表明Ki67的表達可提示腫瘤細胞的增殖活性和速率，Ki67表達越高，患者體內的腫瘤細胞增殖速率越快，易受到侵襲而發生淋巴結轉移。此次研究結果限制，可以將Ki67的表達作為判斷是否有淋巴轉移情況的重要參考指標，對今后在腫瘤的治療方式、療效評估及預后中都存在積極的臨床意義。

綜上所述，在上皮性卵巢癌中，淋巴結轉移的患者ILT4表達水平低于無淋巴結轉移患者，Ki67表達水平高于無淋巴結轉移患者，這兩個指標可為臨床診治起到積極作用。

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Expression of ILT4 and Ki67 in patients with epithelial ovarian carcinoma and lymph node metastasis

ZHANG Cai-xia1WANG Li-ping2#WU Jian-jun3ZHAO Ling-yan41Department of Obstetrics，2Department of Gastroenterology，Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical College，Hohhot 010059，Inner Mongolia，China
3Graduate School，4School of Public Health，Inner Mongolia Medical College，Hohhot 010059，Inner Mongolia，China

ObjectiveTo investigate the expression profile of ILT4 and Ki67 in patients with epithelial ovarian carcinoma and lymph node metastasis.MethodA retrospective analysis was performed in 70 patients with epithelial ovarian cancer，who were stratified as lymph node metastasis group（n=37）and non-lymph node metastasis group（n=33）by respective status of metastasis.The expression of ILT4 and Ki67 in both groups were analyzed.ResultIn immunohistochemical analysis，the expression of ILT4 in ovarian cancer tissue of metastasis group was lower than that in non-metastasis group，while the expression of Ki67 was higher in the former than that in the latter（P＜0.05）；the positive rate of ILT4 expression in metastasis group was 35.14%（13/37），lower than that in non-metastasis group at 84.85%（28/33），with significant difference observed（P＜0.05）；while the positive rate of Ki67 was 81.08%（30/37）in metastasis group，higher than that in non-metastasis group at 45.45%（15/33），which was of significant difference（P＜0.05）.Conclusion In epithelial ovarian cancer patients with lymph node metastasis，it is common that low ILT4 expression is accompanied by high expression of Ki67，which can be used as an important index for the diagnosis.

epithelial ovarian cancer；lymphatic metastasis；immunoglobulin-like transcript 4；Ki67

R737.31

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.06.28

2016-02-28）

（corresponding author），郵箱：946908569@qq.com