水痘疫苗凍干保護劑的改進

李佳林 李開軍 黃林

（成都生物制品研究所有限責任公司病毒性疫苗二室 四川成都 610023）

水痘疫苗凍干保護劑的改進

李佳林 李開軍 黃林

（成都生物制品研究所有限責任公司病毒性疫苗二室 四川成都 610023）

明膠是水痘減毒活疫苗中常用的凍干賦形劑組分，是源于動物組織的大分子蛋白質。由于明膠可能引起疫苗接種后的不良反應，且與某些民族的宗教信仰相沖突，近年來WHO建議減少和避免明膠在病毒疫苗中的使用［1］。我國目前在疫苗凍干保護劑方面的研究與國外還有相當大的差距，明膠作為病毒性疫苗的凍干保護劑組分仍然廣泛使用，但目前國內還沒有相應的藥用輔料標準，因此必須盡快建立相應的質量標準；同時還應對疫苗中明膠含量、分布情況、以及對病毒的穩定性研究和替代物等方面進行全面的研究，以便將來在疫苗生產中取消明膠的添加。本文主要對常規使用的凍干保護劑1和不含明膠的凍干保護劑2進行對比，以便篩選出更適合的水痘疫苗保護劑。

明膠 水痘疫苗 保護劑 賦形劑 凍干

1 材料與設備

明膠 LYO-13型凍干機 一定比例的凍干保護劑 水痘減毒活疫苗

2 原理

凍干是復雜的相變過程,凍干制品在整個過程存在著各種應力,包括低溫應力、凍結應力、干燥應力等,它們常常是導致制品中蛋白質變性的因素,因此選擇適宜的凍干保護劑十分重要。凍干保護劑可以改變制品冷凍干燥時的物理、化學環境,減輕或防止冷凍干燥或復水［2］對病毒的損害,盡可能的保持病毒原有的各種生理生化特性和生物活性。而明膠正是凍干水痘減毒疫苗中使用的賦形劑,但由于其是源于動物組織的大分子蛋白質,可能與疫苗接種后不良反應有關,因此在疫苗生產中少用和不用動物源性的大分子蛋白質是疫苗發展的趨勢。本文將凍干保護劑1和不含明膠的凍干保護劑2進行對比,以便篩選出更適合的水痘疫苗凍干保護劑。

表1

表2

3 操作過程

本次水痘疫苗凍干保護劑的對比試驗共分為2組,第一組為對照組,即含有明膠的水痘疫苗（常規生產用凍干保護劑）共制備一批。第二組為實驗組,即不含明膠的水痘疫苗共制備3批。

四個批次的水痘疫苗生產工藝和所用液體均相同。首先生產組從細胞組接過合格細胞后,用水痘病毒京-84對細胞感染,72小時后進行洗滌換液并觀察病變,達到理想的病變后添加凍干保護劑,然后收獲放于-70℃冰箱內凍存,取出單次收獲物放在轉瓶機上旋轉融化破壁,完全融化后濾過合并即為半成品,然后對半成品抽樣滴定。最后送分包裝車間無菌灌裝到2ml西林瓶中、半加塞,放置同一凍干柜中進行34小時的完全冷凍干燥。具體信息見下表1：

凍干后,從每批水痘疫苗成品中抽取5支混合后進行成品滴度、熱穩定、下降值（37 ℃放置l周后滴度不低于1lgPFU/0.5ml）、異常毒性、物理外觀的檢查。具體結果見下表2：

4 結果討論

傳統明膠具有較好的凍干賦形效果,但亦可用其他物質取代凍干明膠的賦形劑地位,成品水痘疫苗的熱穩定性不合格可能需要調整凍干曲線。

在凍干過程中,明膠在對水痘這類比較脆弱的病毒的保護中作用甚微,一般不考慮明膠對病毒的保護作用。

在實驗結果比較中發現,取消明膠之后過敏反應降低,因此對于日益嚴格的生物制品行業標準來講,取消明膠是有積極意義的［3］。

［1］鄭新添，嚴忠平 《凍干保護劑及其保護機理的研究進展》中國生化藥物雜志

［2］孫東坡，胡一橋 《蛋白質藥品冷凍干燥制品中保護劑及其保護機理》藥學進展復水：重新吸回水分，恢復原狀，為冷凍干燥的逆過程。

［3］陸小軍《對含明膠病毒活疫苗引起的過敏反應的最低發生率估計》《國外醫學.預防.診斷.治療用生物制品分冊》2001年第03期

［4］朱茍波，陳秀珍《腮腺炎疫苗保護劑的改進》中國生物制品學

TB35

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1674-2060（2016）03-0204-01