非休眠期海南文昌昌灑蠟皮蜥脂肪蓄積的變化

羅樊強 吳 倩 劉黎明 馬 驊 王力軍

(海南師范大學生命科學學院，?？?，571158)

非休眠期海南文昌昌灑蠟皮蜥脂肪蓄積的變化

羅樊強 吳 倩 劉黎明 馬 驊 王力軍*

(海南師范大學生命科學學院，?？?，571158)

蠟皮蜥；

(College of Life Sciences，Hainan Normal University，Haikou，571158，China)

體脂肪普遍存在于蜥蜴類動物中[1-2]，對于具有冬眠習性的蜥蜴類而言，體脂肪蓄積是其休眠期極為重要的能量儲備[3-8]，對于蜥蜴類動物繁殖季節性腺的發育具有重要的影響[9-11]。相關研究表明，在繁殖季節，蜥蜴類脂肪蓄積的減少歸因于其繁殖活動增多和取食活動減少，為滿足更多的能量需要而大量消耗或動員脂肪[12-13]，因此蜥蜴類體脂肪蓄積的周期性變化，可以顯示不同時期的能量需求，從而影響繁殖或休眠活動。蠟皮蜥(Leiolepisreevesii)，別名坡馬、沙蝤、山馬，國內分布于廣東、廣西、澳門和海南，國外主要分布于越南，雄性背腹密布鮮明的橘黃色或橘紅色鑲黑圈的眼斑，雌性不明顯[14]。20 世紀70年代以前，蠟皮蜥野外種群數量十分豐富，但由于荒坡地和裸沙地等主要生境被大量的開發和利用，其野外環境的生存面臨著巨大的挑戰，再加上被海南沿海居民廣為食用，導致其分布范圍和種群數量急劇下降[15-17]。關于蠟皮蜥的研究主要集中于核型[18]、空間分布型[19]、兩性異形和繁殖輸出[20]、活動節律[21]、繁殖熱量學[22]、遺傳多樣性[23]、消化和生殖系統組織學[24-25]、生境及致危因素調查等方面[19]。

由于蠟皮蜥脂肪蓄積變化規律及其與繁殖和休眠之間的關系等尚未見報道，為了進一步宣傳和保護蠟皮蜥，本文通過索式抽提法對蠟皮蜥肌肉脂肪進行檢測和分析。旨在掌握非休眠期蠟皮蜥脂肪蓄積的主要部位和年周期變化規律及特點，闡明脂肪蓄積在蠟皮蜥繁殖期和休眠期時的作用和意義，并為進一步了解蠟皮蜥自身能量的分配對策提供科學依據和基礎資料。

1 材料與方法

1.1 研究地區自然概況

海南文昌地處熱帶北緣(N 19°20′～20°10′，E110°28′～111°03′)之間，氣候屬熱帶季風海洋性氣候，雨量充足，月平均氣溫24℃，年平均降雨量為1 749.5 mm，昌灑鎮位于海南文昌，面積197 km2，海岸線長11.7 km[26]。植被類型由濱海匍匐植被、特殊的沙地植被、濱海灌叢等構成，木麻黃(Casuarinaequisetifolia)、桉(Eucalyptusrobusta)、馬占相思(Acaciamangium)等人工作物林構成主要的沿海防護林帶群落，分布在研究區域的周邊；牛筋草(Eleusineindica)、馬纓丹(Lantanacamara)、光莢含羞草(Mimosabimucronata)、黃槐決明(Sennasurattensis)、飛機草(Chromolaenaodoratum)、假臭草(Praxelisclematidea)、銀膠菊(Partheniumhysterophorus)7種植物為外來入侵植物；長春花(Catharanthusroseus)、豐花草(Borreriastricta)、耳草(Hedyotisauricularia)、傘房花耳草(Oldenlandiacorymbosa)等植物具有藥用價值也經常被蠟皮蜥食用[27]。動物組成中與蠟皮蜥形成競爭和天敵關系的物種主要有南草蜥(Takydromussexlineatus)、長尾南蜥(Eutropislongicaudata)、多線南蜥(Eutropismultifasciata)、疣尾蜥虎(Hemidactylusfrenatus)、變色樹蜥(Calotesversicolor)和中國壁虎(Gekkochinensis)、異色蛇(Xenochrophispiscator)、臺灣小頭蛇(Oligodonformosanus)、草腹鏈蛇(Amphiesmastolatum)、翠青蛇(Cyclophiopsmajor)、臺灣竹葉青蛇(Trimeresurusgracilis)、灰鼠蛇(Ptyaskorros)等物種[28]。

1.2 脂肪含量測定方法

1.2.1 取樣和處理 2015年4～11月，每個月在海南文昌昌灑鎮從市場非法捕捉販獲得蠟皮蜥雌雄成體各10條，帶回實驗后先對蠟皮蜥進行對分組和編號，然后再進行生物學測定：體重(body mass，BM)采用精確到0.1 g的電子天平稱量；體全長(Total length，TL)、頭長(Head length，HL)、頭寬(Head width，HW)、尾長(Tail length，TL)、頭體長(Snout～vent length，SVL)采用精確到0.01 mm的游標卡尺測量；性別直接通過身體外部特征觀察確定。最后進行酒精麻醉處死，去除皮膚、爪及內臟，并將每個個體的頭體部和尾部分解(生殖腔往下為尾部)、編號和稱量。

1.2.2 脂肪含量測定

水分含量測定采用常壓烘干法，將處理好的樣品放置于70℃恒溫箱中干燥至恒重，前后重量差為水分重量。將干燥后的樣品去除骨骼后稱量干肌肉重量，然后用研缽將對樣品進行粉碎、磨細、混勻，分別裝入編好號的離心管中，保存在干燥器中，未測的樣品保存于-20℃以下的冰箱中保存。脂肪含量測定采用索式抽脂法進行脂肪抽提，每個樣品重復測定2次并取平均值作為測定結果，得干重脂肪含量，根據水分含量換算成濕重脂肪含量。換算公式：

濕重脂肪含量%=干重脂肪含量%×(1-水分含量%)[29]

1.3 數據處理

用單個樣本Kolmogorov-Smirmov 檢驗數據的正態性，采用Independent-Samplesttest，比較蠟皮蜥雌雄個體不同月份、不同身體部位脂肪含量的差異，描述性統計用平均值±標準誤表示，顯著水平設置為α=0.05。對脂肪含量和水分含量、頭體長和尾長的相互關系進行回歸分析和相關性分析。所有數據處理均用Excel 2003和SPSS16.0軟件完成。

2 結果與分析

2.1 蠟皮蜥體內脂肪含量的差異

通過對蠟皮蜥不同性別及身體不同部位脂肪含量經過獨立樣本t檢驗結果顯示：在整個非休眠期雄性頭體部脂肪含量低于雌性頭體部脂肪含量且差異顯著(P=0.016)；而雄性尾部脂肪含量低于雌性尾部脂肪含量且差異極顯著(P<0.001)；雄性頭部脂肪含量低于尾部脂肪含量差異極顯著(P<0.001)；雌性頭部脂肪含量低于尾部脂肪含量且差異極顯著(P<0.001)；說明蠟皮蜥體內脂肪含量主要蓄積于尾部。

2.2 蜥體內脂肪含量年周期變化

根據蠟皮蜥不同性別及身體不同部位脂肪含量年周期變化折線圖顯示，蠟皮蜥雄性和雌性頭體部脂肪含量在4月到8月基本不發生變化，9月之后略有上升；雄性蠟皮蜥尾部脂肪含量在繁殖季節(5～7月)至6月呈上升趨勢，而后至7月略有下降，但扔維持較高水平，在繁殖季節后雄性蠟皮蜥尾部脂肪含量開始保持平衡而后自8月開始略有上升直至11月；雌性蠟皮蜥尾部的脂肪含量在繁殖季節(5～7月)出現下降，6月達到一個最低值(9.09%)，而8月到10月屬上升期，于10月出現最大值(22.8%)，至11月略有下降，但仍高于其他月份(圖1)。

圖1 蠟皮蜥不同性別及身體不同部位脂肪含量變化(平均值±標準誤)Fig.1 The variations in fat content of reevese’s butterfly lizard in different gender and different body parts(Mean values±standard error)

2.3 蠟皮蜥體內脂肪含量與水分的關系

海南文昌昌灑蠟皮蜥肌肉含水量范圍為41.11%～82.54%，平均為66.90%；肌肉脂肪含量范圍為0.67%～35.27%，平均值為8.39%。肌肉的脂肪含量較少，水分和脂肪含量總和約占肌肉總量的75.50%?？傮w來說，當肌肉含水量減少則脂肪含量增加，而肌肉中兩者的含量總和變化不大(表2)。

蠟皮蜥雄性尾部的脂肪含量和水分含量呈顯著負相關(P<0.001)；雌性尾部的脂肪含量和水分含量呈顯著負相關(P<0.001)；而蠟皮蜥雄性頭體部的脂肪含量和水分含量無相關性(P=0.06)；雌性頭體部的脂肪含量和水分含量無相關性(P=0.04)(表3)。

2.4 蠟皮蜥體內脂肪含量與其相對應長度的關系

雄性蠟皮蜥頭體部的脂肪含量與其頭長無相關性(P=0.812)；雄性蠟皮蜥尾部的脂肪含量與其尾長也無相關性(P=0.705)；雌性蠟皮蜥頭體部的脂肪含量與其頭長無相關性(P=0.845)；而雌性蠟皮蜥尾部脂肪含量與其頭長呈正相關(P<0.001)(表4)。

表1 蠟皮蜥不同月份、性別及部位的脂肪含量(平均值±標準誤)(%)

Tab.1 Fat content of reevese’s butterfly lizard in different month and different gender and different body parts(Mean values±standard error)

表2 蠟皮蜥不同性別及身體不同部位長度、脂肪含量和水分含量變化(平均值±標準誤)

Tab.2 The variations in length and fat content and water content of reevese’s butterfly lizard in different gender and different body parts(Mean values±standard error)

表3 蠟皮蜥不同性別及身體不同部位脂肪含量和水分含量的回歸方程

Tab.3 Regression equation in fat content and water content of reevese’s butterfly lizard in different gender and different body parts

表4 蠟皮蜥不同性別及身體不同部位脂肪含量和其長度的回歸方程

Tab.4 Regression equation in fat content and length of reevese’s butterfly lizard in different gender and different body parts

3 討論

關于動物脂肪含量季節性變化研究有很多，動物在繁殖季節產卵前期平均脂肪含量最高，產卵中后期最低，與動物的攝食和性腺發育周期等密切相關[29-35]。許雪峰等在研究山地麻蜥(Eremiasbrenchleyi)在饑餓時主要利用肌肉脂肪作為能量來源，其結果顯示春季山地麻蜥肌肉脂肪含量顯著低于冬季，山地麻蜥越冬期間處于冬眠狀態不能進行攝食活動，長期處于饑餓狀態，生理活動明顯降低，在冬季肌肉中儲存的脂肪在越冬期消耗[36]，從蠟皮蜥尾部肌肉脂肪含量周年變化看，9～11月最高，而4～8月最低(圖1)。本實驗研究結果顯示蠟皮蜥雄性和雌性尾部肌肉脂肪含量均高于頭體部脂肪含量，由此可推斷蠟皮蜥體內脂肪主要蓄積于尾部。

杜衛國通過對北草蜥(Takydromusseptentrionalis)的研究得出，饑餓后肌肉脂肪含量減少，而阻礙了卵巢發育，肌肉脂肪的能量有可能轉移供給卵巢發育利用[37]，本研究結果顯示雄性蠟皮蜥在繁殖季節尾部肌肉脂肪含量沒有發生變化，而雌性蠟皮蜥在繁殖季節(5～7月)尾部肌肉的脂肪含量出現下降(圖1)。說明在冬眠期前蠟皮蜥肌肉脂肪含量積累越多不僅有利于度過冬眠期，提高越冬的成活率，而且也有助于卵巢的翌年發育。

有學者研究表明，動物的脂肪含量和水分含量在一定范圍內呈顯著負相關，可通過水分的含量來估算脂肪含量[38]，本研究表明蠟皮蜥脂肪和水分含量變化幅度很大，分別為0.67%～35.27%和41.11%～82.54%，雄性尾部和雌性尾部的脂肪含量和水分含量均呈顯著負相關，而蠟皮蜥雄性頭體部和雌性頭體部的脂肪含量和水分含量無相關性，因為蠟皮蜥體內脂肪主要蓄積于尾部，所以其體內總脂肪含量與水分含量呈負相關，并且不以性別和季節的變化而變化(表3)。Iles等研究結果類似，由于這種關系影響因子不太客觀，因此只有在一定的情況下才可以通過水分含量來估算脂肪含量[31]。但蠟皮蜥體內存在水分和脂肪含量的補償機制是肯定的。

脂肪含量和體長一般認為是沒有一致的相關性，脂肪含量不隨體長的長度而變化[32，39]。但也有觀點認為脂肪含量與體長呈正相關[33]。本研究結果也表明蠟皮蜥雄性頭體部和尾部及雌性頭體部的脂肪含量均與其長度無相關性，但雌性尾部脂肪含量與其尾長呈正相關(表4)。因此可以認為雌性蠟皮蜥脂肪含量同尾長正相關可能是因為雌性蠟皮蜥在交配產卵過程中所需要的能量比較多有關。

[1] Sarkar H B D，Shivanandappa T.Reproductive cycles of reptiles[M]//Saidapur S K.Reproductive cycles of Indian vertebrates.New Delhi：Allied Publ.Ltd.，1989：225-272.

[2] Fox H.The urinogenital system of reptiles [M]//Biology of the Reptilia.Gans C and Parsons T S.New York：Academic Press，1977：1-158.

[3] Dessauer H C.Seasonal changes in the gross organ composition of the lizard，Anoliscarolinensis[J].Journal of Experimental Zoology，1955，128(1)：1-12.

[4] Christiansen J L.Reproduction ofCnemidophorusinornatusandCnemidophorusneommicans(Sauria，Teiidae)in northern New Mexico[J].American Museum Novitates，1971，2442：l-48.

[5] Goldberg S R.Seasonal weight and cytological changes in the fat bodies and liver of the iguanid lizard，SceloporusjarrouiCope[J].Copeia，1972(2)：227-232.

[6] Derickson W K.Lipid storage and utilization in reptiles[J].American Zoologist，1976，16(4)：711-723.

[7] Guillette Jr L J，Sullivan W P.The reproductive and fat body cycles of the lizard，Sceloporusformosus[J].Journal of Herpetology，1985，19(4)：474-480.

[8] Guillette Jr L J，Bearce D A.Reproductive and fat body cycles in the lizard，Sceloporusgrammicusdispamlis[J].Transactions of the Kansas Academy of Science ，1986，89(1/2)：31-39 .

[9] Chapman B M，and Chapman R F.Observation on the biology of the lizardAgamaagamain Ghana[J].Proc.Zool.SOC.Lond.，1964，143：121-132.

[10] Hahn W E，Tinkle D W.Fat body cycling and experimental evidence for its adaptive significance to ovarian follicular development in the lizardUtastansburiana[J] .Journal of Experimental Zoology，1965，158(1)：79-85.

[11] Licht P，Gorman G C.Reproductive and fat cycles in Caribbean Anolis lizards[M].University of California Publications in Zoology，1970，95：l-52.

[12] Sharma R N，Shanbhag B A.Testis and abdominal fat body relationship in the garden lizard，Calotesversicolor[J].Zoologischer Anzeiger，1992，228(1-2)：32-38.

[13] Shanbhag B A，Prasad B S K.Fat body ovarian relationship in the garden lizard，Calotesversicolor(Daud.)[J].Journal of Experimental Zoology，1992，264(4)：454-460.

[14] 趙爾宓，趙肯堂，周開亞，等.中國動物志：爬行綱 第二卷[M].北京：科學出版社，1999：147-150.

[15] 王力軍.海岸沙灘上的爬行類——蠟皮蜥[J].野生動物，2004，25(1)：14-15.

[16] 王力軍，洪美玲，藍麗娟.蠟皮蜥——你離滅絕有多遠? [J].大自然，2005(4)：33-34.

[17] 王力軍，賀斌，周建芬，等.海南島沿海蠟皮蜥生境及其致危因素調查[J].安徽農業科學，2012，40(6)：3368-3369，3378.

[18] 容壽柏，羅欽洪，戴紹祥.蠟皮蜥的核型[J].動物學研究，1987，8(2)：164，190.

[19] 彭正強，黃光斗.蠟皮蜥的空間分布型[J].熱帶作物研究，1991，46(4)：72-74.

[20] 林熾賢，邱清波，林隆慧，等.蠟皮蜥的兩性異形和繁殖輸出[J].動物學研究，2004，25(6)：477-483.

[21] 王力軍，于豐軍，洪美玲，等.人工飼養條件下蠟皮蜥晝間行為時間分配及活動節律[J].四川動物，2005，24(1)：9-13.

[22] Lin C X，Du Y，Qiu Q B，et al.Relatively high but narrow incubation temperatures in lizards depositing eggs in warm and thermally stable nests[J].Acta Zoologica Sinica，2007，53(3)：437 - 445.

[23] Lin L H，Ji X，Diong C H，et al.Phylogeography and population structure of the reevese’s butterfly lizard (Leiolepisreevesii) inferred from mitochondrial DNA sequences[J].Molecular Phylogenetics and Evolution，2010，56 (2)：601-607.

[24] 洪美玲，傅麗容，王力軍，等.蠟皮蜥消化系統組織學初步研究[J].四川動物，2005，24(3)：333-336.

[25] 洪美玲，傅麗容，王力軍，等.雄性蠟皮蜥生殖器官的年周期變化[J].安徽農業科學，2011，39(4)：2260-2264，2276.

[26] 張冬明，吳鵬飛，郝麗紅，等.海南文昌市土壤有效磷時空變異特征及環境風險分析[J].土壤通報，2010，41(3)：728-732.

[27] 楊小波，吳慶書.海南文昌昌灑農村植被特點與農業開發中的生態環境問題研究[J].海南大學學報：自然科學版，2002，20(3)：239-242.

[28] 史海濤，趙爾宓，王力軍，等.海南兩棲爬行動物志[M].北京：科學出版社，2011.

[29] 張衡，張波，金顯仕，等.黃海中南部水域鳀魚脂肪含量的季節變化[J].海洋水產研究，2004，25(1)：9-14.

[30] Henderson R J，Almatar S M.Seasonal changes in the lipid composition of herring(Clupeaharengus) in relation to gonad maturation[J].Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom，1989，69(2)：323-334.

[31] Iles T D，Wood R J.The fat/water relationship in North Sea herring(Clupeaharengus)，and its possible significance[J].Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom，1965，45(2)：353-366.

[32] Lovern J A.Wood H.Variations in the chemical compositions of herring[J].Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom，1937，22(1)：281-293.

[33] McGurk M D，Mckone W D，Spencer K.Condition indices，energy density and water and lipid content of Atlantic herring(Clupeaharengusharengus) of southeastern Newfoundland[J].Canadian Technical Report of Fisheries and Aquatic Sciences，1980，958：41.

[34] Slotte A.Differential utilization of energy during wintering and spawning migration in Norwegian spring-spawning herring[J].Journal of Fish Biology，1999，54(2)：338-355.

[35] Rajasilta M.Relationships between food，fat，sexual maturation，and spawning time of Baltic herring (Clupeaharengusmembras) in the Archipelago Sea[J].Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences，1992，49(4)：644-654.

[36] 許雪峰，吳義蓮.山地麻蜥繼饑餓后的補償生長[J].動物學報，2002，48(5)：700-703.

[37] 杜衛國，陸祎瑋，計翔.杭州北草蜥繁殖期脂肪的利用[J].動物學研究，2003，24(5)：392-394.

[38] Galdos M E A，Albrecht-Ruiz M，Maldonado A S，et al.Fat content of Peruvian anchovy(Engrandisringens)，alter“EI Nino”phenomenon (1998-1999) [J].Journal of Food Composition & Analysis，2003，15(6)：627-631.

[39] Hodder V M，Parsons L S，Winters G H，et al.Fat and water content of herring in Newfoundland and adjacent waters，1966-1971[R].Fisheries Research Board of Canada，1973，365.

Reevese’s butterfly lizardLeiolepisreevesii；

Fat Accumulation Patterns in Reevese’s Butterfly Lizard(Leiolepis reevesii)During the Non-hibernation Seasonin Changsa Town，Wenchang City，Hainan

Luo Fanqiang Wu Qian Liu Liming Ma Hua Wang Lijun*

The pattern and characteristics of fat accumulation are important for species that hibernate，both during the breeding and hibernation seasons.We collected 20 butterfly lizards(Leiolepisreevesii)per month(10 males and 10 females)from April to November 2015 in Changsa Town，Wenchang City，Hainan Province to study the variation of fat accumulation by gender and by body part.We used the soxhlet method to extract fat and analyze data.Fat accumulations in the head and body differed by gender(P=0.016)although the values were constant across the whole non-hibernation season for each individual.Fat accumulation in tails differed by gender(P<0.001).During the breeding season(May to July)，tail fat declined only in females.After breeding season(August to November)，both males and females exhibited fat gain in tails.Fat accumulation differed by head，body and tail(P<0.001).Weight of tail fat was negatively correlated with tail water content(P<0.001)but head and body fat were unrelated to water content.The fat and water content changed dramatically during the non-hibernation period，ranging from 0.67% to 35.27% for fat and 41.11% to 82.54% for water.Moreover，except for the positive correlation found between tail fat and body length in females(P<0.001)，no other correlation was found between fat accumulation and lengths of body parts(P=0.06).

稿件運行過程

2016-04-12

修回日期：2016-07-13

發表日期：2016-11-10

脂肪抽提；

脂肪含量；

繁殖季節；

水分含量

Fat extraction；

Fat content；

Breeding season；

Water content

Q958

A

2310-1490(2016)04-357-06

脂肪的蓄積特點和程度對具有休眠習性的動物來說，無論在其繁殖期還是冬眠期，都具有至關重要的作用。為掌握非休眠期蠟皮蜥(Leiolepisreevesii)脂肪蓄積的變化規律，探索蠟皮蜥不同性別、身體不同部位脂肪蓄積特點，本研究于2015年4～11月，在海南文昌昌灑每月采集蠟皮蜥20條個體(10♀10♂)，應用索氏脂肪抽提和分析方法，對蠟皮蜥不同性別及不同身體部位脂肪蓄積程度進行檢測。結果表明：蠟皮蜥頭體部脂肪含量在整個非休眠期基本不發生變化，但不同性別間卻存在顯著差異(P=0.016)。同樣的，雌雄間尾部的脂肪含量存在極顯著差異(P<0.001)，且變化模式不盡相同。在繁殖季(5～7月)，僅雌性蠟皮蜥尾部的脂肪含量出現下降，而在繁殖季節后期(8～11月)，雌雄個體尾部的脂肪含量都顯著上升。此外，蠟皮蜥尾部和頭體部的脂肪含量差異極顯著(P<0.001)，且尾部的脂肪含量和水分含量呈顯著負相關(P<0.001)，而頭體部的脂肪含量和水分含量卻無相關性(P=0.06)。在非休眠期，蠟皮蜥的脂肪和水分含量均呈現較大幅度的變化，分別為0.67%～35.27%和41.11%～82.54%。此外，除了雌性蠟皮蜥尾部脂肪含量與其頭長和尾長呈正相關(P<0.001)外，身體不同部位脂肪含量與不同性別長度無關。

國家自然科學基金項目(No.31260519，30900143)

羅樊強，男，28歲，碩士研究生；主要從事動物生態學研究。E-mail：236699350@qq.com

*通訊作者：王力軍，E-mail：wanglijun_haikou@sina.com