2011—2015年規?；i場偽狂犬病野毒感染血清流行病學調查

林文耀，曾容愚，李聰，栗娟，張婷婷，劉輝，秦云，于朋

（西班牙海博萊生物大藥廠股份公司北京代表處，北京海淀100086）

2011—2015年規?；i場偽狂犬病野毒感染血清流行病學調查

林文耀，曾容愚，李聰，栗娟，張婷婷，劉輝，秦云，于朋

（西班牙海博萊生物大藥廠股份公司北京代表處，北京海淀100086）

2011年1月至2015年12月對中國21個省市1 537個規?；i場不同豬群的偽狂犬病野毒感染血清流行病學進行了全面調查與系統分析。結果顯示，偽狂犬病野毒抗體陽性豬場有984個，陽性豬場比例為64.0%；總血清樣品中偽狂犬病野毒抗體平均陽性率為31.60%。不同階段的豬群檢測結果表明，種豬帶毒率高是豬偽狂犬病持續存在的重要原因；生長肥育豬野毒抗體陽性率隨豬只日齡的增長而上升，可能與豬場忽視仔豬偽狂犬病免疫有關；提示要重視肥育豬偽狂犬病的免疫預防。調查結果顯示，豬偽狂犬病在規?；i場仍普遍存在。

豬偽狂犬??；血清流行病學；野毒感染

自2011年以來，豬偽狂犬?。≒R）大有卷土重來之勢，主要表現為豬群gE抗體陽性率顯著升高，發病妊娠母豬流產，產弱仔、死胎；新生仔豬死亡率高，同時出現角弓反張等神經癥狀，病死率在10%～50%。病毒的分離鑒定表明疫病由變異偽狂犬病病毒（PRV）毒株引起，并且新流行毒株處于獨立的進化分支，這對PR的防控提出了嚴峻挑戰[1-3]。為掌握現有防疫控制體系下我國豬場偽狂犬病感染的狀況，進而有效控制和凈化豬偽狂犬病，海博萊中國北京實驗室持續多年對全國部分規?；i場進行豬偽狂犬病的流行病學調查。筆者對2011年1月至2015年12月中國23個省市1 537個規?；i場不同豬群的偽狂犬病野毒血清流行病學進行了全面調查與系統分析，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 采樣方法樣品采用橫斷面采樣方法，分別采集公豬、后備豬、不同胎次生產母豬以及不同生長階段商品豬群的血液，分離血清，送海博萊北京實驗室檢測。

1.1.2 血清樣品血清樣品采集時間為2011年1月至2015年12月，共97 050份，其中種豬群血清樣品61 838份，不同周齡仔豬和生長育成豬樣品35 212份。樣品來自我國23個省市1 537個規?；i場，包括種豬場和商品育成豬場，記錄各豬場主要疫病免疫程序，方便對結果進行分析。

1.1.3 檢測試劑豬偽狂犬病野毒抗體測定采用gE-ELISA鑒別診斷試劑盒（CIVTEST SUIS ADV gE）。

1.2 試驗方法與結果判定

阻斷酶聯免疫吸附試驗（ELISA）法，操作方法以及結果判定參照試劑盒說明書進行。檢測的血清樣品全部來自使用gE基因缺失疫苗免疫的豬場，所以檢測到gE抗體陽性豬可以判斷該豬場被偽狂犬病野毒感染。在進行豬場結果判定和統計時，只要豬場有1個樣品為陽性，則該場判定為偽狂犬病野毒陽性場。

2 結果

2.1 2011—2015年規?；i場偽狂犬病野毒gE抗體檢測結果

2.1.1 2011—2015年不同地區規?；i場偽狂犬病野毒gE抗體檢測結果在2011—2015年所檢測的1 537個規?；i場中，984個豬場為偽狂犬病野毒陽性，豬場陽性率為64.0%；總血清樣品數97 050份，30 660份為陽性，樣品陽性率為31.6%（表1）。其中陜西、內蒙古陽性率高達100%，可能是由于送檢豬場較少造成的。然而從檢測豬場數較多的山東（259個豬場）和浙江（150個豬場）2個省來看，陽性豬場的比例也是居高不下：山東70.3%，浙江83.3%?？傮w而言，不同地區的豬場陽性率均居高不下，23個送檢省市中，有18個省市豬場陽性率≥50%。但是，不同地區的陽性豬場樣品陽性率卻差異較大，23個送檢省市中，只有4個省市樣品陽性率≥50%。這種差異可能是不同地區對偽狂犬病的重視程度和生產管理水平不同造成的。

表1 2011—2015年不同地區規?；i場偽狂犬病野毒gE抗體檢測結果

按照地區統計，七大區域均有豬偽狂犬病野毒感染。北方的陽性率高于南方，其中華北豬場陽性率最高，達到75%（圖1）。國內學者在北京、天津等地首先分離到偽狂犬病變異毒株，從而推測這場疫病可能首先在北方暴發，繼而在全國傳播流行[1-3]。從2011年開始，我們也發現北京的豬場陽性率明顯高于其他地區，豬場陽性率高達80%。

圖1 2011—2015年不同地區規?；i場偽狂犬病野毒gE抗體陽性率

2.1.2 2011—2015年規?；i場偽狂犬病野毒gE抗體陽性率由圖2可知，樣品陽性率和豬場陽性率從2011—2015年逐年上升，樣品陽性率由13.6%上升至41.3%，豬場陽性率由41.7%上升至78.1%。結果表明，豬偽狂犬病的流行有持續上升的趨勢，在未來一段時間仍是中國養豬業的重要傳染病之一。

圖2 2011—2015年規?；i場偽狂犬病野毒gE抗體陽性率

2.2 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場種豬的陽性率

2.2.1 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場不同階段種豬gE抗體陽性率由圖3可知，生產母豬的陽性率高于公豬和后備母豬。其中1～2胎母豬gE抗體陽性率最高為52.2%。

圖3 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場不同階段種豬gE抗體陽性率

2.2.2 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場種豬gE抗體陽性率由圖4可知，種豬陽性率從2011—2015年逐年上升，由33.5%上升至58.0%，其中2013年增長幅度最大，比2012年上升8.5個百分點。種豬偽狂犬病野毒感染持續上升的趨勢對豬偽狂犬病的防控和凈化提出了嚴峻的挑戰。

圖4 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場種豬gE抗體陽性率

2.3 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場不同生長階段肥育豬gE抗體陽性率

由圖5可知，肥育豬從16周開始gE抗體陽性率上升，從16周的32.5%上升至24周的52.6%，顯然由偽狂犬病野毒感染所致，這與陽性場肥育豬后期出現呼吸道疾病、日增重不理想等現象一致。10周和13周的gE抗體可能是母源抗體[4]。

圖5 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場不同生長階段肥育豬gE抗體陽性率

3 分析與討論

3.1 豬偽狂犬病仍是我國養豬業的主要傳染病

本次調查持續時間較長，時間跨度5年。調查樣品來自我國23個省市1 537個規?；i場，共97 050份，是目前國內調查范圍較廣的規?；i場偽狂犬病野毒感染血清流行病學調查。結果表明，2011—2015年豬偽狂犬病的流行有持續上升的趨勢，樣品陽性率由13.6%上升至41.3%，豬場陽性率由41.7%上升至78.1%。七大區域均存在偽狂犬病野毒的感染，北方地區的偽狂犬病野毒陽性率高于南方地區。其中華北豬場陽性率高達75%，西南最低為29.6%，可能是由于病毒在氣溫較低的北方更易存活。調查還發現，南方較北方更重視對仔豬的免疫預防。

國內相關學者也對偽狂犬病野毒血清流行病學做了相關的調查。胡睿銘等對9個省市2011—2013年的692份血清樣品進行gE抗體檢測，結果顯示，血清樣品陽性率為67.05%（464/692）[5]。鄒敏等對2012—2013年來自18個省市的393個送檢豬場共14 801份血清樣品進行檢測，結果顯示，豬場陽性率為44.02%（173/393），樣品陽性率為16.13%（2 388/14 801），并且發現陽性率有上升的趨勢[6]。解偉濤在2014年第一季度的檢測結果表明，血清樣品gE抗體陽性率為37.9%（1 244/3 281），比2013年上升6.6%；豬場陽性率為89.9%（124/138），比2013年上升6.3%[7]。

不同的調查研究產生了不盡相同的結果，可能與采樣地區、采樣階段、采樣數量不同有關，但是豬偽狂犬病有持續上升趨勢的結論是一致的，提示豬偽狂犬病在未來的一段時間仍是中國養豬業的主要傳染病之一，豬偽狂犬病的預防和凈化形勢不容樂觀。

3.2 種豬感染率持續上升是偽狂犬病持續流行的重要原因

由圖2和圖4可知，豬場陽性率和種豬陽性率都呈現出逐年上升的趨勢，種豬的陽性率與豬場的陽性率呈現正相關的關系。2012—2013年種豬陽性率由40.6%上升到49.1%，與此同時，豬場陽性率由44.3%上升到62.3%。分析各胎次生產母豬的陽性率，1～2胎的陽性率最高達到52.2%，明顯高于其他胎次，提示補充的后備母豬有可能為陽性豬，應該引起豬場足夠的重視，防止后備母豬的更新被偽狂犬病野毒感染，導致種豬的帶毒率居高不下。

預防種豬感染偽狂犬病野毒是偽狂犬病防控和凈化的關鍵問題。首先，要保證更新的公豬和后備母豬偽狂犬病野毒陰性，引種前進行gE抗體檢測，確保引進的種豬為陰性豬。做好隔離等生物安全措施，穩定后首先免疫偽狂犬病gE基因缺失疫苗，轉生產前免疫2次。為了提高中和抗體水平和抗感染能力，可免疫高效的偽狂犬病滅活疫苗，如海博萊高效滅活菌AUSKIPRA BK。偽狂犬病滅活苗可有效提高中和抗體滴度，降低抗體離散度。然后通過gE抗體篩查，淘汰陽性生產公豬，以保證生產公豬全部為陰性。因為偽狂犬病病毒可以通過精液傳播[8]。其次，加強種豬的免疫強度，年普免4次，可以有效減少種豬的帶毒和排毒時間。最后，生物安全仍是很重要的防線。從圖3得知，生產母豬的陽性率都高于50%，為了降低生產公豬的感染風險，必須禁止查情公豬返回公豬站，防止查情公豬成為偽狂犬病野毒傳播的媒介。

3.3 需要加強生長肥育豬的偽狂犬病疫苗免疫

由圖5可知，肥育豬gE抗體陽性率從16周開始上升。一般來講，gE母源抗體維持時間在120天左右[4]。如沒有野毒的感染，隨著母源抗體的消退，16周開始gE抗體陽性率應該出現下降。此次調查gE抗體陽性率在16周后不降反升，說明在13～16周這個階段有偽狂犬病野毒的感染，同現實生產相吻合?，F實生產中很多豬場只重視母豬的免疫，往往忽視仔豬的免疫。有的豬場只免疫母豬，不免疫仔豬。有的豬場母豬免疫進口疫苗，仔豬免疫國產疫苗，對仔豬偽狂犬病疫苗的選擇也比較隨意。有的豬場仔豬只在出生滴鼻免疫1次。隨著母源抗體的消退，肥育豬后期缺乏保護力，感染偽狂犬病野毒，在生產上往往出現呼吸道疾病，繼發細菌感染，如傳染性胸膜肺炎等，抗生素治療效果不明顯。此外，感染的肥育豬進入后備豬群，形成循環感染，這也是部分豬場偽狂犬病持續存在難以凈化的重要原因。據我們的經驗，在偽狂犬病防控壓力較大現狀下，仔豬滴鼻1次和2次肌注偽狂犬病疫苗，可以有效維持陽性場的生產穩定，減少仔豬的感染機會，陽性場獲得陰性仔豬也是有可能的。

3.4 豬偽狂犬病的防控

本次的調查結果表明，豬偽狂犬病的流行有持續上升的趨勢，在未來一段時間仍是中國養豬業的重要傳染病之一。在這種流行趨勢下，選用優質高效的偽狂犬病gE基因缺失活疫苗結合滅活疫苗的使用，采用科學的免疫程序是預防和控制豬偽狂犬病的主要手段。Zeng等和王繼春等用豬偽狂犬病活疫苗“喜可凈”（Bartha K61株）對仔豬免疫1次，1周后用豬偽狂犬病病毒變異株（AH02LA株）進行攻毒，結果顯示可以抵御偽狂犬病病毒變異株攻擊[9-11]。劉芳等使用gE基因缺失活疫苗緊急免疫，并對初生仔豬進行滴鼻和肌注免疫后有效地控制了PR疫情，說明現有疫苗對新流行毒株依然有較好效果[12]。這些研究結果表明Bathar-K61疫苗目前還是控制偽狂犬病的最好手段之一，能夠對抗偽狂犬病病毒（PRV）新流行株的攻擊，為豬提供完全保護。

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[2]Yu Xiuling,Zhou Zhi,Hu Dongmei,et al.Pathogenic Pseudorabies Virus,China,2012[J].Emerging Infectious Disease Journal,2014, 20(1):102-104.

[3]Wu R,Bai C,Sun J,et al.Emergence of virulent pseudorabies virus infection in northern China[J].J Vet Sci,2013,14(3):363-365.

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[6]鄒敏，楊旭兵，鄭輝，等.2012-2013年我國部分地區豬偽狂犬病流行病學調查[J].中國動物檢疫，2015（4）：1-5.

[7]解偉濤，郝慧芳，梁躍，等.2014年第1季度豬偽狂犬病流行病學調查及防控建議[J].今日養豬業，2014（6）：33-34.

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[10]Zeng R,Wang J,Torrents D,et al.PRV vaccine AUSKIPRA-GN (A3 solvent;Bartha k61 strain)provide quick and strong protection against Chinese PRV variant[C].Proceedings of the 7th Asian pig veterinary society Conference,Manila,2015:79.

[11]王繼春，曾容愚，Daniel Torrents，等.豬偽狂犬病活疫苗（Bartha K61株）對變異株的保護效力[J].畜牧與獸醫，2015（12）：1-4.

[12]劉芳，薛輝，秦樹英，等.廣西豬偽狂犬病病毒的分離鑒定及gE基因序列分析[J].養豬，2014（5）:105-108.

（編輯：富春妮）

S858.282.65+9.1

A

1002-1957(2016)02-0113-04

2016-02-02

林文耀（1985-），男，廣東吳川人，執業獸醫師，碩士，主要從事規?；i場生產管理及豬病防控工作. E-mail:lin.wenyao@hipra.com