桑白皮中摩魯新L的含量測定方法研究

薛天樂，丁 銳

亳州職業技術學院，亳州，236800

桑白皮中摩魯新L的含量測定方法研究

薛天樂，丁 銳

亳州職業技術學院，亳州，236800

為探索桑白皮中摩魯新L含量的測定方法，利用高效液相色譜法對桑白皮中摩魯新L含量進行了測定(色譜條件：Alltima C18色譜柱：4.6 mm×250 mm,5μm，流動相乙腈:水:乙酸=50∶50∶0.1，檢測波長270 nm)，結果表明：摩魯新 L在3.6～18 μg/mL之間線性良好(R2= 0.9993)，平均回收率為100.2%，RSD=1.1%。

桑白皮；摩魯新L；高效液相色譜法

桑白皮是?？浦参锷?MorusalbaL.)的干燥根皮，是常用的中藥材之一，有利水消腫、瀉肺平喘的功效。近年來，有研究表明桑白皮還具有降血糖、降血壓、降血脂、抗病毒、抗炎、止咳平喘等多種藥理活性[1-6]，極具開發潛力。但是，2015年版的中國藥典中還未給出桑白皮中有效成分含量的測定方法，限制了其應用。桑白皮中黃酮類化合物含量豐富，其中摩魯新L的含量較大且和多種藥理活性有關[7-8]，因此，本文擬建立桑白皮中摩魯新L的含量測定方法，希望能為桑白皮的二次開發提供參考。

1 儀器與試劑

Agilent1100液相色譜儀(美國Agilent)，KQ2200超聲波清洗器(昆山市超聲波儀器有限公司)，摩魯新L(自制，經多種方法檢測均為單體，高效液相色譜歸一化法檢測其純度達到99.76%)，桑白皮飲片(亳州同仁堂飲片廠)，乙腈(色譜純)，實驗室用水為雙蒸水，乙酸(色譜純)，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 確定提取溶劑

分別采用氯仿，乙酸乙酯，40%、80%和無水甲醇等溶劑超聲處理40min，結果顯示氯仿和乙酸乙酯的提取效率差，而40%、80%及無水甲醇提取效率相當。無水甲醇無需配置，且提取物水溶性雜質小，因此以無水甲醇作為提取溶劑。

2.2 確定提取方法與時間

將桑白皮粉碎成粗粉，取6份，每份1.0g，分別加入無水甲醇50.0mL，用超聲提取法和加熱回流提取法分別提取20、40和60min，結果顯示兩種提取方法效率相當，均為處理60min提取率最高。與回流法相比，超聲提取法具有不加熱、有效成分損失少的優點，因此以超聲提取60min作為制備方法。

2.3 對照品溶液的制備

準確稱取經105℃干燥至恒量的摩魯新L4.5mg，置于容量瓶中，用無水甲醇定容至25.0mL, 搖勻得0.18mg/mL對照品溶液，微孔濾膜(0.45μm)濾過，備用。

2.4 供試品溶液的制備

將桑白皮飲片粉碎成粗粉，精密稱取1.0g，加無水甲醇50.0mL，超聲提取60min，提取液濃縮，置于容量瓶中，再用無水甲醇定容至25.0mL，作為供試品溶液。

2.5 色譜條件

AlltimaC18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)，流動相乙腈-水-乙酸(50∶50∶0.1);檢測波長270nm，柱溫室溫，流速1.0mL·min-1。在此條件下摩魯新L與其他組分均能達到基線分離(圖1、2、3)。

2.6 標準曲線的繪制

精密吸取摩魯新L對照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分別置于10.0mL容量瓶中，以無水甲醇定容至刻度線，按“2.5”的色譜條件，進樣量為20μL，以峰面積為縱坐標，對照品的質量濃度為橫坐標，制定標準曲線，結果顯示摩魯新L在3.6～18μg/mL濃度之間線性良好，曲線方程為：y=112193x+26335，R2=0.9993。

2.7 精密度試驗

精密吸取濃度為7.2 μg/mL對照品溶液，連續進樣5次，結果如表1。

圖1 摩魯新L的色譜圖

圖2 桑白皮藥材的色譜圖

圖3 兩者的對照色譜圖

表1 精密度試驗

2.8 穩定性實驗

取質量濃度為18 μg/mL的對照品溶液，分別在1、4、8、12、24、36、48 h進行測定，結果見表2。

表2 穩定性試驗

2.9 重現性實驗

精密稱取同一批樣品各5份,每份1.0 g，分別按照“2.4”方法制備供試品溶液，各進樣20 μL進行檢測，結果如表3。

表3 重現性試驗

2.10 加樣回收率實驗

精確取已知含量的桑白皮粗粉9份，每份各1.0 g，分別加入等量的對照品，按“2.4”條件制備，然后按“2.5”色譜柱條件進行測定，進樣量為20 μL，根據標準曲線計算摩魯新L的含量，再根據加入量和樣品含量計算平均回收率，結果如表4。

表4 回收率實驗

2.11 不同批號桑白皮中摩魯新L的含量測定

取5批桑白皮飲片樣品，按“2.4項”條件制備，然后按“2.5”色譜柱條件進行測定，進樣量為20 μL，根據標準曲線計算摩魯新L的百分含量，結果見表5。

表5 不同批號桑白皮中摩魯新L的含量測定

3 結 語

本文建立了一種利用高效液相檢測桑白皮中摩魯新 L的方法，結果表明：本方法簡便、快速、準確且重現性好，可以作為桑白皮中摩魯新L的含量測定方法。

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(責任編輯：汪材印)

10.3969/j.issn.1673-2006.2017.01.31

2016-10-29

安徽省教育廳自然科學研究重點項目(KJ2016A500)；亳州市中藥科技創新團隊項目(BZ2013zzb06)。

薛天樂(1981-)，安徽亳州人，碩士，講師，研究方向:中藥活性成分提取與分離。

R284.1

A

1673-2006(2017)01-0114-03