基于文獻數據挖掘的七十味珍珠丸與二十五味珍珠丸的現代研究進展對比和分析

徐文龍++孫位軍++王張++劉光麗++梁源

【摘要】應用文獻數據挖掘法，對比二十五味珍珠丸與保密方七十味珍珠丸的組方、化學成分、藥理學和臨床等現代研究信息，為七十味珍珠丸的藥效物質基礎和作用機制研究提供思路。挖掘出七十味珍珠丸的植物類藥材12種，動物類藥材5種，礦物類和寶石類藥材8種，金屬類藥材4種，混合物1種，與二十五味珍珠丸共有的藥物僅9種。二十五味珍珠丸中動植物類藥物和礦物藥類成分已建立含量測定方法，七十味珍珠丸中的礦物和金屬類藥材已建立含量測定方法，但植物藥類尚未開展。七十味珍珠丸的藥理作用研究較多，但作用機制研究不深入，而二十五味珍珠丸幾乎沒有開展作用機制研究。兩者主要用于心腦血管和神經系統疾病的治療，二十五味珍珠丸治療疾病范圍較七十味珍珠丸少，且兩藥多與其他藥物配伍，均未見不良反應報道。

【關鍵詞】七十味珍珠丸；二十五味珍珠丸；組方；藥理；對比

【中圖分類號】R29【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2017）04-0059-05

Comparison with the Modern Research Progress of The Rannasangpei and

Twenty Five Pearl Pill Based on Prescription Data MiningXU Wenlong1SUN Weijun1WANG Zhang2*LIU Guangli1LIANG Yuan1

1.College of Pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137，China；

2.College of Ethnomedicine，Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137，ChinaAbstract：With the application of literature mining，and through a comparison with twenty five pearl pill and the secret prescription of Rannasangpei formula，modern research information were mined and collected， to provide modern research of twenty five pearl pill and Rannasangpei. It is Revealed that Rannasangpei has twelve kinds of herbs，five kinds of animal medicinal materials，eight kinds of minerals and gems class，four kinds of metals，one kind of mixture， and there exists only 9 drugs shared by twenty five pearl pill and Rannasangpei. Methods for determination of certain contents in twenty five pearl pill has been set up，including plant and animal.Meanwhile，methods for determination of contents including minerals and metal medicinal materials in the Rannasangpei have been established and plant dont study. The Rannasangpei has always enjoyed various pharmacological effects without clear working mechanisms， but twenty five pearl pill almost clear working mechanisms. They are mainly used in the treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases as well as nervous system diseases， the scope of twenty five pearl pill treatment less and compatibility significantly， with few reports about adverse effects.

Keywords：Rannasangpei Pill； Twenty Five Pearl Pill； Component； Pharmacology； Comparison

二十五味珍珠丸和七十味珍珠丸均已被《中國藥典》（2015版）收載。二十五味珍珠丸系藏族驗方，最早收載于公元八世紀藏醫巨著《四部醫典》的第3部“秘訣部”中，主要用于中風、半身不遂、口眼歪斜、昏迷不醒、神智紊亂、譫語發狂等。七十味珍珠丸源于二十五味珍珠丸，經歷代藏醫藥學家不斷改進和完善，最后由藏醫南方學派代表人物蘇喀巴·年尼多杰于十五世紀中葉研制而成[1]；具有安神、鎮靜、通經活絡、調和氣血、醒腦開竅的功效，用于“黑白脈病 ”、“龍血”不調；中風、癱瘓、半身不遂、癲癇、腦溢血、腦震蕩、心臟病、高血壓及神經性障礙。目前，七十味珍珠丸在全國范圍內僅有兩家企業具有國藥準字號，即西藏甘露藏藥股份有限公司和青海金訶藏藥廠；二十五味珍珠丸則有西藏神猴藥業有限責任公司、西藏甘露藏藥股份有限公司、青海金訶藏藥廠、昌都藏藥等企業具有國藥準字號。

七十味珍珠丸與二十五味珍珠丸在藥物組成上有較多相似之處，故通過化學成分、藥理和臨床研究的對比，能夠為二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的現代研究提供思路。

1組方數據挖掘

一般認為七十味珍珠丸來源于二十五味珍珠丸，因此進行兩組數據挖掘并進行比較，可以挖掘出七十味珍珠丸處方中更多的藥物信息，為多成分質量控制標準的制定提供基礎。

11二十五味珍珠丸組方在《中國藥典》（2015版）中，僅收載二十五味珍珠丸中組成藥物，未記錄其具體的各組方比例。其中植物類藥材有19種，即肉豆蔻、草果、丁香、豆蔻、檀香、余甘子、肉桂、毛訶子、木香、冬葵果、蓽撥、香旱芹、黑種草子、沉香、降香、紅花、訶子、志達薩增、西紅花；動物類藥材有4種，即體外培育牛黃、人工麝香、螃蟹、水牛角濃縮粉；礦物類藥材有4種，即石灰華、金礞石、珍珠、珍珠母。從藥物數目來說，二十五味珍珠丸并非由25味藥組成，而是27味，究其原因，可能是由于古代藏醫缺乏植物分類學知識，將紅花與西紅花、珍珠與珍珠母分別視為同一種藥物。

12七十味珍珠丸組方七十味珍珠丸為保密處方，僅公開了部分藥物的名稱，其具體的組方比例無從得知，阻礙了藥效物質研究和質量控制水平的提高，如《中國藥典》（2015版）所載的藥物有珍珠、檀香、降香、九眼石、西紅花、牛黃、麝香等[2]。

根據公開出版的文獻，整理總結出七十味珍珠丸中植物類藥材應有32種，已知12種即西紅花[3]（藏紅花[4]）、檀香、安息香、沉香、降香、短穗兔耳草（短穗兔草[5]）、甘草、天竺黃、木訶子、訶子、藏荊芥、荊芥等；動物類藥材應有8種，已知5種即麝香（人工麝香）、野牛血、牛黃（人工牛黃）、羚羊角、熊膽等；礦物和寶石類藥材應有20余種，已知8種即天然珍珠（珍珠）、九眼石、瑪瑙、珊瑚、藍寶石、貓眼石、松石[6]、青金石等；金屬類藥材應有10余種，已知4種即金、銀、銅（銅灰）、天然鐵等[7]；混合物1種，即佐臺（坐臺[8]）?？偨Y發現，在組方中礦物和寶石類藥材多達20余種，占比約29%。此外，各單位生產的七十味珍珠丸在部分藥物的使用上存在差異，如有單位使用麝香、牛黃，而有些單位使用人工麝香和人工牛黃，另外各單位煉制佐臺（佐塔）的工藝也不盡相同，這些都可能影響藥效物質基礎及藥效。

13二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的共有藥物共有植物藥6種，即檀香、沉香、降香、紅花、西紅花、訶子；共有動物藥2種，即牛黃（人工牛黃）、麝香（人工麝香）；共有礦物與寶石類藥1種，即珍珠（人工珍珠）。由此可知，兩者共有的藥物僅9種，可能是因為七十味珍珠丸屬于保密配方，尚未公布的藥物中可能存在共有藥物。

2化學成分研究

21二十五味珍珠丸的化學成分研究對部分藥物的化學成分進行了研究，如應用HPLC測定西紅花中的西紅花苷I[9]、肉桂中的桂皮醛、木香中的木香烴內酯和去氫木香內脂[10]；應用RP-HPLC法測定人工牛黃中的人工牛黃膽酸[11]；通過原子吸收分光光度法測定了重金屬元素含量，即平均含鉛75720mg·kg-1、砷22626mg·kg-1、汞<0005mg·kg-1和鎘01242mg·kg-1[12]；采用激光誘導擊穿光譜（LIBS）技術對金屬成分如鈣、鈉、鉀、鎂進行了定性分析[13]。而其它已知藥物中的化學成分未見分析報道，究其原因可能是其在組方中含量較低，成分測試存在一定困難。

22七十味珍珠丸的化學成分研究只開展了礦物和金屬成分的研究，如吳金泉等[14]采用LIBS對七十味珍珠丸Mg、Ca、Na、Fe、Al、Si、K、Li、Hg、Pb、Au等10種元素進行了定性研究，同時還對不同價態的Pb元素進行了LIBS的時間演化研究；李玉等[15]用ICP-AES法測定七十味珍珠丸中的微量和常量元素，測定出銅、鐵、鈷等多種元素的含量。見表1。

表1七十味珍珠丸中元素的含量/10-6

CuFeCoMnVZnMgPKNaCaAlCd535250050765125463385352388317256273700295502717262

23二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的化學成分研究對比二十五味珍珠丸中礦物藥數量和含量較七十味珍珠丸為少，共有金屬鈣、鈉、鉀、鎂、鉛、汞等元素，且含量各不相同；二十五味珍珠丸中的3個植物藥與1個動物藥已有含量測定指標，但未見七十味珍珠丸中動物藥和植物藥中化學成分的研究報道，有可能與組方中含量相對較低有關，其化學成分在儀器的檢測限以下，也可因礦物藥含量較多，干擾了動物藥和植物藥檢測；另外處方保密對化學成分研究有較大的障礙。

3藥理研究

31二十五味珍珠丸的藥理研究二十五味珍珠丸能增加記憶再缺失小鼠模型的逃避潛伏期，并可減少小鼠發聲和退縮的錯誤次數，表明珍珠丸能通過改善模型小鼠的記憶能力，提高其智力，從而改善癡呆癥狀[16]；制造頸總動脈結扎致大鼠不完全性腦缺血模型，二十五味珍珠丸預防給藥可明顯降低模型大鼠腦毛細血管通透性、腦含水量和腦指數，從而減輕腦水腫[17]；二十五味珍珠膠囊按504 g生藥/kg·d（相當于臨床給藥量的70倍）灌胃60d以及停藥2周后，動物的血液學指標、血液生化學指標及臟器指數沒有明顯異常，提示在臨床規定劑量范圍內是安全的[18]。

32七十味珍珠丸的藥理研究七十味珍珠丸 05～1g/ kg 可明顯減輕缺血性腦梗塞引起的行為障礙，減少梗塞面積，使缺血性腦組織病理變化減輕，對腦缺血有保護作用[19]。七十味珍珠丸治療腦血管及神經系統疾病可能與其抑制腦內β-EP[20]、5-HT、NA、DA[21]的異常升高和海馬神經元凋亡[22]有關；具有防治急性腎型高血壓、中樞鎮靜、抗驚厥[23]、改善血液流變學[24]和血流動力學[25]、改善腦膜微循環[26]、減輕血小板聚集[27]、抗血栓形成[28]等藥理作用，并可能通過抑制β-分泌酶[29]的表達來改善學習記憶[30]。

索有瑞等[31]通過模擬人工胃液發現，七十味珍珠丸中重金屬元素汞、砷、鉛、鎘等吸收較少，大部分排出體外，機體內無明顯長期蓄積性毒性。說明七十味珍珠丸中重金屬元素并非機體正常生理所需要，但重金屬元素在七十味珍珠丸中是怎樣發揮作用尚未清楚，去除重金屬元素是否會影響藥效也有待進一步研究。

33二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的藥理研究對比二十五味珍珠丸的藥理學研究相對滯后，幾乎沒有開展作用機制研究。七十味珍珠丸現代藥理學研究較多，主要集中在抗腦缺血及其初步機理研究方面，但作用機制研究需結合分子生物學、細胞生物學技術進一步深入。

4臨床研究

41二十五味珍珠丸的臨床研究主要用于血管性癡呆[32]、冠心病[33]、坐骨神經痛[34]、缺血性腦卒中[35]、椎動脈型頸椎病[36]、腦出血后遺癥 [37]、急性高血壓腦出血[38]等疾病，臨床不良反應未見報道。詳見表2。

表2二十五味珍珠丸的主要臨床研究

主治臨床觀察血管性癡呆觀察組（尼莫地平、甲磺酸二氫麥角堿緩釋片、鹽酸氟西汀膠囊，加用二十五味珍珠丸的綜合治療組）32 例和對照組（西藥組）16 例。觀察組19例明顯好轉，10 例好轉，3例無效，總有效率9063%；對照組5例明顯好轉，7 例好轉，4例無效，總有效率7500%。冠心病治療組（珍珠丸組）和對照組（常規治療組）各106例，兩組均連續治療8周。治療組總有效率934%，對照組總有效率736%。坐骨神經痛二十五味珍珠丸治療105例，其中痊愈92例，好轉13例。缺血性腦卒中29例缺血性腦卒中病人口服二十五味珍珠丸，并設立常規治療對照組（12例，阿司匹林、胞二磷膽堿）對照觀察，二十五味珍珠丸治療缺血性腦卒中8周時NIH評分為（607±274）分，療效優于對照組的（425±205）分。椎動脈型頸椎病對照組32 例，治療組32 例。在對照組（前列地爾注射液）治療基礎上加服二十五味珍珠丸，治療組的總有效率9375%，對照組總有效率7500%。腦出血后遺癥180例治療組（二十五味珍珠丸）和對照組常規治療，治療組總有效率為956%，對照組總有效率為800%。急性高血壓腦出血治療組45例，對照組（香丹注射液）42例，治療組總有效率為7778%，對照組總有效率為5714%。

42七十味珍珠丸的臨床研究常用于缺血性腦卒中（腦缺血、中風、癱瘓、薩病、腦中風后遺癥[39]、腔隙性腦梗塞[40]、腦溢血[41]）、腦震蕩[42]、原發性高血壓[43]、小兒抽搐[44]、面癱、阿爾茨海默病[45]、神經血管性頭痛[46]、植物神經功能紊亂[47]及心絞痛[48]等心腦血管和神經系統疾病，相當于藏醫的“黑白脈病”的范疇。目前由治療心腦血管疾病和神經系統疾病擴展到其它疾病，如小兒抽搐、風濕性關節炎等；七十味珍珠丸與其他中西藥聯合使用均取得滿意效果，如治療腔隙性腦梗塞與銀杏葉注射液合用總有效率906%、治療腦梗塞與二十五味珍珠丸合用總有效率為 967%。亦未見不良反應報道。

43二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的臨床研究對比二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸均用于心腦血管和神經系統疾病的治療，臨床效果顯著，但均未見不良反應報道。故應在現有基礎上，采用多中心、大樣本、隨機、對照、雙盲的現代臨床實驗研究七十味珍珠丸治療心腦血管疾病的有效性和作用機制[31]。

5小結

51七十味珍珠丸與二十五味珍珠丸對比分析通過上述數據對比分析可知，在組方上七十味珍珠丸和二十五味珍珠丸共有植物藥6種（檀香、沉香、降香、紅花、西紅花、訶子），動物藥2種（牛黃、麝香），礦物與寶石類藥1種（珍珠）。在化學成分上，兩者均共同含有鈣、鈉、鉀、鎂、鉛、汞等元素，均進行了對于礦物藥的研究。二十五味珍珠丸由于其組方公開（組方比例未知），已進行如肉桂、西紅花等植物藥的化學成分分析；而七十味珍珠丸由于為保密處方，對于其植物藥的研究尚未見公開文獻報道。在藥理研究上，兩者均進行了安全性和腦缺血方面的藥理研究，但二十五味珍珠丸整體而言藥理研究相對滯后，七十味珍珠丸現代藥理學研究較多。在臨床上，兩者均多用于心腦血管疾病，此外七十味珍珠丸目前還用于治療小兒抽搐、風濕性關節炎等。

52七十味珍珠丸的量-時-效關系不清楚七十味珍珠丸“每3～7日給藥一次”，似“緩釋作用”，但缺乏藥理學和藥劑學數據支撐。在治療心腦血管疾病中存在有效劑量與時間段跨度均很大等問題，如在治療缺血性腦卒中的劑量為2～1000mg/（kg·d），平均值為192mg/（kg·d），臨床治療的有效時間段為10～90d，實驗研究的有效時間段為3h至7d。在劑量設置和起效時間、維持時間判斷方面均可能存在誤判或隨意的可能，進而影響臨床治療的有效性[49]。故開展七十味珍珠丸的量時效關系研究，可為后續的有效性評價、作用機制和臨床研究提供基礎。

53七十味珍珠丸中植物藥化學成分的分析測試思路及實踐通過上述數據對比分析可知，在七十味珍珠丸中，與二十五味珍珠丸共有植物藥6種（檀香、沉香、降香、紅花、西紅花、訶子），并且在其它公開發表的文獻中還整理出安息香、沉香、短穗兔耳草、甘草、天竺黃、木訶子、藏荊芥、荊芥等藥物組成。通過查閱藥典等資料分析這些植物藥中含有的化學成分，筆者重點開展了七十味珍珠丸中沒食子酸、柯里拉京、沉香四醇等化學成分的HPLC研究和分析?，F已定量測試6個成分（詳見圖1），其中沒食子酸含量最高，為1484 mg/g；其次為西紅花苷Ⅰ和柯里拉京，含量分別為0654 mg/g和0567 mg/g，鞣花酸、西紅花苷Ⅱ及沉香四醇含量相對較低，分別為0399 mg/g、0343 mg/g及0279 mg/g。還定性測試出鷹嘴豆芽素A、胡椒堿、甘草苷，進而為開展血清藥物化學和藥代動力學研究奠定了基礎。

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（收稿日期：2016-12-12編輯：陶希睿）

基金項目：國家自然科學基金資助項目（NO：31400950）；廣西自然科學基金（NO：2015GXNSFBA139138、2015GXNSFCA139021、2016GXNSFAA380189）。

作者簡介：伍冠一（1980-），男，漢族，博士，助理研究員，副教授，研究方向為中藥止癢機制研究。E-mail：w5gy1@126com

通信作者：陳曦（1982-），女，漢族，博士研究生，講師，研究方向為中藥業癢成分析。E-mail：52004111@qqcom