諾如病毒研究進展

王大鵬，上海交通大學農業與生物學院副研究員，碩士研究生導師。主要從事食源性致病微生物的污染與控制，包括致病微生物分子生態、流行病學監測、快速檢測方法和致病機理等研究工作。

2002年，國際病毒分類委員會根據病毒的形態、抗原特性及遺傳進化等特點將諾瓦克病毒歸入嵌杯狀病毒科，并正式更名為諾如病毒（Noroviurs，簡稱NoV）。

近年來，媒體曝光了多起因諾如病毒（Norovirus，以下簡稱“NoV”）污染導致的食品安全事件，目前，美國、英國、法國、德國、日本、澳大利亞、中國等諸多國家都有NoV感染的報道。NoV每年可導致全球1.25億人次感染和3.5萬人死亡，且發病量逐年攀升。通過對我國27個省份173家哨點門診2009年～2013年腹瀉病例的調查可以發現，NoV感染率高達11.6%（病例總數為34031，NoV感染病例為3950）。每年NoV導致全球直接經濟損失42億美元，社會經濟損失603億美元（其中，5歲以下嬰幼兒耗費398億美元）。所以，NoV的防控已經成為各國疾控部門關注的焦點之一。

諾如病毒簡介

1968年冬天，美國諾瓦克鎮的一所小學暴發了一起非細菌性急性腸胃炎事件，該事件導致學校半數以上學生出現急性嘔吐、腹瀉的癥狀，但是沒有鑒定出誘發該疾病的主要病原。直到1972年，美國科學家以免疫電鏡的方法證實4年前暴發急性腸胃炎的罪魁禍首是一種小個子病毒，并將其命名為諾瓦克病毒（Norwalk virus）；后來，各國科學家都發現了類似的病原，以致該病毒有了很多別稱，如諾瓦克病毒（Norwalk virus）、類諾瓦克病毒（Norwalk-like virus）或小圓狀病毒（small round structured virus）等。時至2002年，國際病毒分類委員會（The International Committee on Taxonomy of Viruses，簡稱ICTV）根據病毒的形態、抗原特性及遺傳進化等特點將其歸入嵌杯狀病毒科，并正式更名為諾如病毒（Noroviurs，簡稱NoV）。

NoV隸屬于嵌杯病毒科諾如病毒屬，病毒顆粒直徑27～34nm，無囊膜，屬單股正鏈RNA病毒，容易發生變異。病毒基因組7.5～7.8kb，共編碼3個開放閱讀框（ORF1-ORF3）。其中，ORF1編碼6個非結構蛋白；ORF2和ORF3分別編碼結構蛋白VP1（主要衣殼蛋白）和VP2（次要衣殼蛋白）。根據NoV主要衣殼蛋白編碼區（ORF2）核苷酸序列的不同，將該病毒分為GI-GVII共7組，其中GI（GI 1-9）、GII（GII 1-22，其中11/18和19為豬源）和GIV組為人類易感，GIII為牛源，GV為鼠源，GVI和GVII為犬源。因此，嚴格來講，僅有GI、GII和GIV組NoV可以感染人類，被通稱為人源諾如病毒（human Norovirus，以下簡稱hNoV），其中流行毒株基因型為GII.4，可感染所有人群。另外，為了紀念1968年首次暴發NoV感染，將NoV原型毒株（GI.1）仍稱為諾瓦克病毒（Norwalk virus）。但是，該毒株不感染B型血人群。

hNoV研究已經成為全球熱點，但其研究進展非常緩慢。2014～2016年，Jones和Ettayebi等人分別以B細胞和人腸道上皮細胞培養物成功地實現了hNoV體外培養，然而這兩種增殖體系仍有諸多局限性。迄今，除鼠源NoV外，NoV暫無成熟的體外增殖體系。所以，建立病毒體外培養體系是深入研究hNoV的關鍵。

hNoV的感染和傳播

hNoV具有致病率高、感染劑量低、對外界抵抗力強等特點，是全球誘發急性非細菌性胃腸炎最重要的食源性病毒。hNoV感染的臨床癥狀表現為：噴射狀嘔吐、腹瀉、腹痛、偶爾伴有發燒。hNoV感染后潛伏期短，感染后24～28小時會表現出典型癥狀，持續12～24小時，病程1～7天；hNoV患者排毒時間長，在患者糞便中的檢出時間可以持續數周。以上特性是hNoV經常在學校、醫院、游輪等較封閉的人員密集場所暴發疫情的根本原因。

hNoV傳播途徑廣泛，主要通過糞-口途徑進行傳播，亦可經食源、水源和氣溶膠傳播。常見果蔬（草莓、生菜等）和貝類（牡蠣、青口螺等）已被列為hNoV污染的高風險食品。經研究發現，生菜葉面、葉脈和氣孔中均可攜帶hNoV（見圖1）；牡蠣胃組織、消化盲囊、鰓組織和上前纖毛等均可吸附hNoV，其中胃組織中可以特異性結合病毒顆粒（見圖2）。因此，在處理和食用hNoV污染的食品時，需注意飲食衛生并盡可能避免交叉污染。

hNoV的檢測和防控

hNoV呈現出全世界范圍頻發且各地發病率出現逐年增高的趨勢，這與人們對其認識的深入、檢測方法靈敏度顯著提高有關。迄今為止，hNoV的檢測方法分別建立在病毒粒子外形、特異性核酸區段和主要抗原決定簇的基礎上，主要有電鏡法、免疫學方法和分子檢測法。其中，分子檢測方法因其應用性好、靈敏度高等特點引起了廣泛的研究。但是，傳統的分子檢測方法無法區分樣品的擴增模板是來自于完整的病毒顆粒還是游離的病毒核酸。我們建立了原位捕捉實時定量反轉錄方法，該方法以hNoV受體捕獲病毒顆粒，再以捕獲病毒顆粒的基因組為模板進行核酸擴增，破解了上述技術瓶頸。另外，該方法不需要提取病毒核酸，且可以規?；繖z測，這為hNoV的監測提供了一個新選擇。

hNoV通常在半封閉環境（如幼兒園、敬老院、賓館、軍隊、學校和游艇等）中暴發，并且可以感染各年齡階段的人群（老年人和嬰幼兒更易感染），嚴重影響了人們的身體健康。各國的疾控部門也做出了各種努力來降低病毒對人類的影響，但是均未提出有效的防控方法。

目前，主要通過以下幾種方式降低hNoV感染率：①注意個人衛生，飯前便后要充分洗手；②盡量不吃生食（尤其是貝類）；③即食性水果盡量削皮或進行消毒處理；④如果需要處理因hNoV感染導致的嘔吐物和腹瀉物，可以使用5～10倍日常餐具消毒濃度的84消毒液與污物混合，10～20分鐘后再對污物進行清理；如果有條件，可以佩戴口罩和手套進行個人防護。另外，hNoV患者應注意以下幾項要點：①自覺隔離靜養；②無需驚慌，安心靜養，一般3天內會自愈；③注意避免脫水，補充電解質和維生素；④不要從事任何食品生產，且毛巾、碗筷等需額外加熱消毒處理。

hNoV呈現出全世界范圍頻發且各地發病率出現逐年增高的趨勢，這與人們對其認識的深入、檢測方法靈敏度顯著提高有關。hNoV通常在半封閉環境中暴發，并且可以感染各年齡階段的人群。