豬流行性腹瀉疫苗研究進展

賈睿琳

（四川省南充市動物疫病預防控制中心，南充 637000）

0 引言

豬流行性腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒引起的腸道傳染疾病。豬會產生食欲不振、脫水、腹瀉以及嘔吐等癥狀。此病情經常發作于仔豬上，母豬的發病率相對較低。但是一旦染上該病，就會產生腹瀉、嘔吐、食欲不振等現象，從而導致體重降低直至死亡，并且這一疾病的死亡率較高。盡管有一部分的仔豬經過救治，存活下來，但是疫情帶來的后遺癥也非常嚴重。豬流行性腹瀉疫情的產生，給全球的養豬專業戶造成了巨大的經濟損失。因此針對該疫病的預防不僅要定期對豬舍進行打掃與檢查，還要采用科學合理的飼養方法。此外，給仔豬進行疫苗免疫才是根本。隨著國家科技的快速發展，相關科研人員也對該病情進行了深入研究，并研制出了相應疫苗。

1 組織滅活疫苗

組織滅活疫苗是分裂所獲得的毒株，感染生命體征正常并且健康的小動物。小動物發病之后，取出體內病毒含量最高的組織進行滅活等處理，然后再加入佐劑制作而成的疫苗。因為采取的是已經滅活的病毒，或者是病毒感染含量最高的組織[1]，所以相對安全，并且容易保存，給運輸過程中帶來極大便利。國內針對感染流行性腹瀉仔豬最初的救治方式，采取的是組織滅活疫苗注射。

有專家采用毒株對剛剛出生不久的仔豬進行感染，然后獲取仔豬身上的組織，再添加佐劑研制出的中國首例豬流行性腹瀉疫苗，就是組織滅活疫苗。通過對新生仔豬的組織滅活疫苗注射試驗可以看出，在疫苗注射后的2個星期，新生仔豬體內產生的中和抗體較強，免疫效果非?？捎^，可保障豬群在半年之內免受野毒的進攻。

2 細胞滅活疫苗

將通過分裂獲得的毒株接種在適合病毒生長的細胞內，通過細胞傳代后將其滅活，所制作成的疫苗就是細胞滅活疫苗。

馬思奇[2]等相關專家研制出免疫期與組織滅活疫苗一樣長達半年之久的豬流行性腹瀉病毒和豬傳染性腸胃炎病毒二聯疫苗，并且其對新生仔豬的免疫保護率幾乎達到90%。之后幾年，鄒勇等又研制出比二聯疫苗更為先進的三聯疫苗。三聯疫苗包括豬流行性腹瀉、豬傳染性腸胃炎、豬輪狀病毒。此疫苗的研制，對新生仔豬的保護率比二聯疫苗還要高出許多。細胞滅活疫苗的研制過程比組織滅活疫苗更為簡單，而且成本相對較低，對豬流行性腹瀉的防控能起到更好的效果。

3 弱毒疫苗

致病力弱化后的毒株研制成的，對病毒自身的感染力不變，但是減弱其致病力的疫苗就是弱毒疫苗[3]。弱毒疫苗的制作采用正常繁殖的弱毒株，所以在一定程度上它能刺激機體形成較長時間的免疫。

佟有恩等運用豬流行性腹瀉的毒株，進行弱毒株的克隆培育，通過此弱毒株研制出豬傳染性胃腸炎病毒的二聯活疫苗。在此之后，隨著國家技術的不斷發展，馮力等研制出三聯活疫苗，而三聯活疫苗的主動免疫時間能達到半年之久。弱毒疫苗可以在不增加任何佐劑狀況下，對較強的細胞免疫進行反應引導，所以它的免疫原性效果較好。因為弱毒疫苗具有一定的活性，所以活性的強弱會直接影響到免疫效果，這就需要對弱毒疫苗的保存與運輸提出更高的要求，避免在運輸或是保存中活性降低，導致免疫效果減弱，從而對疫苗的注射造成影響。

4 亞單位疫苗

將病原體的抗原基因和擁有較強表達能力的質粒連接進行重組后，轉染到合適的載體中。然后經過載體表達蛋白并對蛋白進行純化，再選擇合適的佐劑與蛋白相混合所研制成的就是亞單位疫苗[4]。亞單位疫苗的安全性能高并且免疫原性較為突出，注射過亞單位疫苗的動物，已經不會再向環境進行排毒，從而減小風險。

焦茂興[5]等人通過一系列的重組方法，成功將Vero進行感染。利用已經被感染細胞的上清液對小白鼠進行注射，可以發現Vero細胞可以引誘小白鼠免疫回應。以亞單位疫苗與滅活疫苗為參考，小白鼠在注射疫苗半個月后，注射亞單位疫苗的小白鼠比注射滅活疫苗的小白鼠所產生的抗體濃度高，但是在大約20 d后，注射亞單位疫苗的小白鼠體內的抗體濃度明顯低于注射滅活疫苗的小白鼠。由此可以做出判斷，亞單位疫苗在體內的抗體濃度會隨著代謝相應減少，在體內不能形成較長時間的免疫效果。

5 病毒樣顆粒疫苗

病毒樣顆粒疫苗主要是指結合基因工程的方法，集中整合目的抗原蛋白基因和其他病毒的結構蛋白基因，進行克隆重組，形成結構計劃蛋白顆粒[6]。因為病毒樣顆粒沒有調節蛋白、核酸，所以它不具備復制能力，但是它具有正常病毒顆粒該有的特性，能進到宿主細胞中，從而激發其全方位的免疫能力。

王翠玲[7]通過一系列的細胞構建與重組后，成功感染Sf9細胞。經鑒定，該細胞可以形成豬流行性腹瀉病毒的病毒樣顆粒。將小白鼠注射純化后的豬流行性腹瀉病毒的病毒樣顆粒進行半個月的觀察檢測，發現小白鼠體內能產生較強的免疫能力。因為病毒樣顆粒和亞單位疫苗相同，都屬于蛋白質，所以它們二者的免疫效果需要再進行深入研究。

6 核酸疫苗

核酸疫苗就是使編碼某種抗原的基因重新組成到真核進行表達的載體，然后不通過任何媒介，直接將其注入到小動物身體內，使注入在小動物身體內的外源基因能有效激活其免疫能力，引誘其產生和疫苗注射類似的免疫應答，從而達到疾病預防的效果。核酸疫苗可以通過靜脈、肌肉、皮下、表皮等多種方式進行注射。但是試驗證明，通過肌肉注射，可以獲得較長時間的免疫應答，從而能對小動物進行更好的保護。多核細胞中的骨骼肌細胞與其它組織不同，它具有充足的肌漿網，并且在其橫貫系統中具有細胞外液，它能夠深入到肌細胞中，所以其它組織吸收蛋白質與DNA的能力都不如它。

7 結束語

豬流行性腹瀉給全球的養豬專業戶帶來巨大經濟損失，因此豬流行性腹瀉疫苗也在不斷的發展研究過程中。隨著國家的快速發展以及科學技術的提高，豬流行性腹瀉疫苗的研究過程會越來越順利，研發的疫苗也會更加安全有效。雖然在目前疫苗的研發當中，仍然存在著諸多問題，但是相信隨著科技的進步，這些問題都會得到有效解決，進而為養豬專業戶帶來更多效益，更好的推動養豬業發展。