凡納濱對蝦養殖土池中使用益生菌制劑效果分析

崔悅 齊遵利

DOI：10.3969/j.issn.1004-6755.2018.12.002

摘要：以凡納濱對蝦為研究對象，通過在養殖池中施用益生菌制劑，在露天土池中的使用量分別為0、0.3 g/m3、0.45 g/m3 、0.6 g/m3水體，研究了在凡納濱對蝦養殖水體中使用益生菌制劑對氨氮（NH+4-N）、亞硝酸鹽氮（NO-2-N）、化學需氧量（COD）等水質指標的影響和對凡納濱對蝦成活率以及飼料系數的影響，目的是探討益生菌制劑在凡納濱對蝦養殖池塘中的適宜使用量。

關鍵詞：露天土池;益生菌制劑;凡納濱對蝦;水質;成活率

凡納濱對蝦（Penaeus vannamei）俗稱南美白對蝦（Litopenaeus vannamei，Boone），是我國于80年代引進的一個對蝦品種，具有生長效率快、鹽度適應范圍廣、容易集約飼養等優點，位居世界上養殖蝦產量的前三位[1]。近年來，我國凡納濱對蝦養殖業蓬勃發展，養殖模式多樣性，養殖密度迅速提高，但高密度養殖也使養殖水體污染情況日趨嚴重。為此，以凡納濱對蝦為研究對象，通過在養殖土池中施用益生菌制劑，在露天土池中的使用量分別為0、0.3、0.45、0.6 g/m3水體（含活菌數1.53×1010 cfu/g以上），研究了在凡納濱對蝦養殖水體中使用益生菌制劑對氨氮（NH+4-N）、亞硝酸鹽氮（NO-2-N）、化學需氧量（COD）等水質指標的影響和對凡納濱對蝦成活率以及飼料系數的影響，目的是探討益生菌制劑在凡納濱對蝦養殖池塘中的適宜使用量。

1研究目標及內容

通過人為將復合益生菌制劑投入到養殖池水中，增加池水中的有益微生物的數量，人為制造有益微生物優勢種群，強化微生物的代謝作用，增加水體自身凈化能力，達到降解池水中氨氮、亞硝態氮、COD等有害物質調控水質的目的，同時以池水中的有益菌抑制有害菌，達到減少養殖動物病害發生的目的。

研究內容：通過在養殖水體中，定期施用一定量的復合益生菌制劑后，測定養殖水體的水質指標：氨氮（NH+4-N）、硝酸鹽氮（NO-3-N）、亞硝酸鹽氮（NO-2-N）、無機磷（PO3-4-P）、溶解氧（DO）、COD、pH值等濃度變化，養殖對象的生長指標：體長增長、成活率、飼料系數等，并與空白對照組進行比較，以了解復合益生菌制劑對凡納濱對蝦養殖水體水質的影響。

2材料與方法

2.1露天養殖池塘

試驗在灤南縣某養殖場進行，露天海水養殖池塘8個，每個池塘面積為33 300 m2，池深2.0 m，平均水深1.2 m。

2.2主要儀器設備、試劑

UV-5200型紫外可見分光光度計、YXQ-LS-50S11高壓滅菌器、FA2104N電子分析天平、SYNERGY超純水系統、Starter2100pH計、水下水溫計、鹽度計、DHG-9240A電熱恒溫干燥箱等。

2.3對蝦放養規格、數量

每個池塘放養全長0.8～1.0 cm的凡納濱對蝦苗125萬尾。蝦苗購買時經過POCKIT核酸分析儀進行白斑病毒（WSSV）、傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）、傳染性肌肉壞死癥病毒（IMNV）等特定病毒的檢測，確保購進無特定病毒蝦苗。

2.4益生菌制劑的使用

試驗用的益生菌制劑由江蘇某生物技術有限公司生產，由枯草芽孢桿菌、硝化細菌、反硝化細菌、光合細菌等多種活菌組成，活菌總數>1.53×1010 cfu/g。設試驗組3組，編號為A1、A2、A3，1個對照池組，編號為A0，每組設3個平行重復。放養對蝦苗后每隔13 d左右潑一次益生菌制劑，每次潑灑量：A1、A2、A3組池潑灑量分別為12、18、24 kg（潑灑濃度為0.3、0.45 、0.6 g/m3水體），初次潑灑益生菌制劑用量加倍，使用前2 d進行活化擴增，活化時1 kg益生菌制劑加紅糖0.5 kg，溶于20 m3水中，全部溶解，放在透光大容器內或透明塑料袋中，在自然陽光下活化，活化時間為2 d，然后均勻潑入池塘中，期間每隔2～3 h對容器或塑料袋中的水攪動一次，有條件的可進行充氣。對照組A0組不潑灑益生菌制劑，其余條件對照組和試驗組完全相同。

2.5飼養管理

放苗前1個多月向池塘中進水，進水深度1.5 m。放苗前一周使用漂白粉對試驗池和對照池池水進行徹底消毒。

期間每天投喂4次，根據對蝦個體大小、數量、水質、攝食和生長情況靈活確定投飼量，以投飼后70 min內對蝦大部分吃飽為宜。隨著對蝦個體的增大，飼料粒徑做適當調整。養殖前期每周換水7～8 cm;養殖后期適當加大換水量，每周換水一次，每次換水30 cm。試驗組池塘和對照組池塘飼養管理方法完全一致，投飼量也相同，整個試驗過程不用任何藥物及消毒劑。結合投飼每天巡視池塘，便于及時發現問題，每天記錄好各試驗蝦池的日常管理情況，記錄內容包括潑灑益生菌時間和數量、天氣、水溫、鹽度、投飼量、換水量等。在蝦池邊設置3～4個網筐，用于觀察凡納濱對蝦攝食和生長情況。自6月12日放蝦苗至9月28日收蝦共飼養107 d。

2.6采集水樣

每個池塘選取4個采樣點，在每個采樣點分別采取上層和下層的水樣混勻后測定。試驗從6月11日開始，6月12日放苗，至9月28日收蝦結束，每隔13 d左右采集一次水樣，水樣采集時間在兩次潑灑益生菌制劑之間，每次于上午9：00-10：00固定時間進行采樣。在放養蝦苗和開始潑灑益生菌制劑之前于6月11日采集一次水樣作為起始水樣樣品，隨后分別于6月24日、7月7日、7月20日、8月2日、8月15日、8月28日、9月10日、9月23日在試驗組池和對照組池各采水樣一次，共采水樣9次，然后進行水質分析。

2.7水質分析方法

池水水質指標均按照中華人民共和國國家標準GB17378.4-2007海洋監測規范第4部分（海水分析）規定的方法測定，其中：

3結果與分析

3.1對水質的影響

3.1.1對氨氮（NH+4-N）的影響露天池塘中氨氮（NH+4-N）含量的變化情況見圖1。

由圖1可見，整個養殖試驗期A1、A2、A3各試驗組池水中的氨氮含量均低于對照組，以A3組的氨氨含量最低，變化幅度最小。對照組A0和試驗組A1池水中氨氮含量波動的幅度較大，而試驗組A2和試驗組A3池水中氨氮的波動幅度相對較小，說明潑灑一定濃度的益生菌制劑能使凡納濱對蝦養殖池水中的氨氮含量保持在相對比較穩定的水平。

3.1.2對亞硝酸鹽氮（NO-2-N）的影響露天養殖池塘中亞硝酸鹽氮含量的變化情況見圖2。

由圖2可見，整個養殖試驗期A1、A2、A3各試驗組池水中的亞硝酸鹽氮含量均低于對照組，以A3組的亞硝酸鹽氮含量最低，自8月2日開始A3組的亞硝酸鹽氮含量顯著低于對照組A0池中亞硝酸鹽氮含量，且較其他三組變化幅度最小，說明在養蝦池塘中潑灑一定量的益生菌制劑降低了池塘中的亞硝酸鹽氮含量，因試驗組A1和試驗組A2池中加入量較小，降低效果不明顯。

3.1.3對硝酸鹽氮（NO-3-N）的影響露天池塘中硝酸鹽氮含量的變化情況見圖3。

由圖3可見，各試驗組蝦池中硝酸鹽氮呈先稍上升后下降的趨勢，試驗組A2、A3池水中硝酸鹽氮含量變化幅度不大，而試驗組A1和對照組A0池水中硝酸鹽氮含量波動較大。

3.1.4對溶解氧（DO）的影響露天池塘中溶解氧含量的變化情況見圖4。

由圖4可見，整個試驗過程試驗組A2和試驗組A3池中的溶解氧基本保持穩定，溶解氧維持在5.36 ～6.42 mg/L之間。對照組A0池的溶解氧含量試驗前期較穩定，后期隨著對蝦投飼量的增大溶解氧逐漸降低。各試驗組池水中溶解氧含量均略高于對照組池水中溶解氧含量，但與對照組池水中溶解氧的含量差異均不大。

3.1.5對化學需氧量（COD）的影響露天池塘中化學需氧量（COD）的變化情況見圖5。

由圖5可見，在整體養殖試驗過程中，各試驗組和對照組池水中的COD均逐漸升高，對照組A0升高速度比較快，最高時達到9.27。各試驗組池水的COD均低于對照組，而A2、A3組池的COD開始有所降低，后期逐步升高。由于受強降雨影響，在7月20日各實驗組和對照組的COD均略有下降。

3.1.6對無機磷（PO3-4-P）的影響露天池塘池水中無機磷（PO3-4-P）的變化情況見圖6。

從圖6中可以看出：整個養殖試驗過程中，前期各組間無機磷（PO3-4-P）含量在表現比較穩定，均在緩慢上升，在7月20日由于降雨原因略微有些下降，之后進入快速上升期，至8月28日開始由于每天加大了換水量無機磷（PO3-4-P）含量又有所下降。

3.1.7對pH值的影響露天池塘中池水的pH的變化情況見圖7。

由圖7可見，在整個養殖試驗過程當中，各試驗組A1、A2、A3池水pH值變化波動較小，保持相對穩定，而對照組A0池水的pH值變化波動幅度較大。在養殖試驗中后期，對照組A0 池水的pH值明顯低于A2和A3組池。

3.2對對蝦生長的影響

露天池塘中凡納濱對蝦不同處理組的生長指標見表1。

從表1中可以看出，在露天池塘條件下，各試驗組凡納濱對蝦成活率、規格和產量都比對照組有所提高，各試驗組的飼料系數均低于對照組。4結果討論

露天土池養殖是目前凡納濱對蝦養殖的主要方式，其特點為：露天土池面積大、對蝦放養密度低、受外界環境的影響較大、養殖管理要求技術含量低、產量高。本試驗在凡納濱對蝦養殖過程中使用益生菌，研究其使用效果和適宜的使用量，為凡納濱對蝦的健康養殖提供理論和實踐依據。

4.1對水質的影響

4.1.1對氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的影響本試驗中露天池塘中的氨氮（NH+4-N）、亞硝酸鹽氮（NO-2-N）含量均隨著養殖時間的延長而增高。整個養殖試驗期間池水中氨氮含量的變化較大，養殖試驗后期氨氮含量遠遠高于前期氨氮含量，主要是由于后期對蝦攝食量大，殘餌、糞便、有機碎屑等增多造成的，而添加一定量益生菌的會降低池水中是氨氮含量，維持氨氮一個相對穩定水平。

本養殖實驗中，露天池塘中潑灑益生菌制劑后試驗組A1、A2和A3組池均比對照組A0池水中亞硝酸鹽氮含量有所降低，自8月2日開始A3組的亞硝酸鹽氮含量顯著低于對照組A0亞硝酸鹽氮含量（P≤0.05）。

本養殖試驗期間露天池塘硝酸鹽氮（NO-3-N）的變動范圍0.207～0.433 mg/L。露天池塘水體中的硝酸鹽氮（NO-3-N）含量呈先上升后逐漸下降趨勢，可能是因為早期浮游植物光合作用增強產生大量氧氣，中后期益生菌中的反硝化細菌在硝酸還原酶、亞硝酸還原酶、一氧化二氮和一氧化氮還原酶還原酶催化作用下，將硝酸鹽最終還原成或N2O或N2的原因。

4.1.2對溶解氧（DO）的影響養殖池塘池水中溶解氧的主要來源是池水中浮游植物的光合作用產的氧，其次是風力，是自然增氧，受天氣及池水中浮游生物影響較大，自然池水中的溶解氧變動范圍為4.43～6.42 mg/L。

4.1.3對化學需氧量（COD）的影響本試驗中露天池塘中COD隨著養殖時間的延長而呈上升趨勢，但從結果看，除試驗組A3池和對照組A0池中COD呈顯著差異外，其他各組間均無顯著差異，這與沈南南，李純厚，賈曉平等的研究相吻合[2]。

通過排污、換水等措施可以在一定程度上降低池水在有機物質的含量，降低COD值，在露天池塘中每天的換水量非常少，而每天還有大量的新的殘餌、糞便產生，COD值很難降低。本試驗中在池水中使用一定量的益生菌可以降低COD值。

4.1.4對無機磷（PO3-4-P）的影響在整個養殖試驗過程中，露天池塘池水中無機磷（PO3-4-P）的含量保持在較低水平，一是對蝦投飼量低，殘餌、糞便中釋放的磷不多，二是池水中大部分的磷都被池塘底泥吸附，儲存在底泥中。試驗過程中，露天池塘中無機磷（PO3-4-P）的含量除降雨和換水時間外，隨著養殖試驗的進行始終保持上升的趨勢，原因是各種水處理方法均不能很好地降低池水中無機磷（PO3-4-P）含量的積累[3]，向池塘中潑灑益生菌對降低池水中的無機磷（PO3-4-P）含量效果也不明顯。

4.1.5對pH值的影響隨著試驗時間的延長，對蝦養殖池中生物總量不斷地增多，殘餌、糞便、生物殘骸等數量也不斷地增多，池中大量有機物質的分解消耗大量的溶解氧，導致池水pH下降。

露天池塘中影響pH值變化的主要因素是浮游植物的光合作用，在養殖試驗的中后期，凡納濱對蝦、微生物及其他生物的呼吸作用以及池中有機物質的分解產生的CO2也會影響到池水的pH值，池水的pH值變動幅度大，一般pH值的變動范圍為7.86～8.56。

4.2對對蝦生長的影響

4.2.1對成活率的影響本試驗研究表明，整個養殖試驗過程中凡納濱對蝦成活率各試驗組都高于對照組，主要是因為使用益生菌后池塘水質條件得到了改善，有利于凡納濱對蝦成活率的提高。

4.2.2對飼料系數的影響本試驗研究表明，整個養殖試驗過程中凡納濱對蝦飼料系數各試驗組都低于對照組，主要是因為使用益生菌后池塘水質條件得到了改善，有利于凡納濱對蝦攝食、消化，降低飼料系數。

4.2.3對養殖生產的指導整個試驗期間，養殖池水中的氨氮、亞硝酸鹽、COD呈逐漸增高的趨勢，前期氨氮、亞硝酸鹽、COD含量比較低，是因為蝦苗個體小，攝食量少，殘餌和排泄的糞便少，池水中的有機物質也就少，水質污染較輕。試驗中、后期氨氮、亞硝酸鹽、COD含量較前期明顯增高，是因為蝦苗個體逐漸增大，攝食量明顯增大，殘餌和排泄的糞便明顯增多，池水中的有機物質也隨之增多，水質污染越來越重，尤其后期氨氮、亞硝酸鹽含量達到高峰。

通過在養殖池中使用益生菌制劑，不但大大降低了氨氮、亞硝酸鹽、COD含量，提高了池水的溶解氧、硝酸鹽氮含量，穩定了池水pH，改善了養殖池水的水質。另外，通過生物之間的競爭，池水中的益生菌數量遠遠大于弧菌等有害菌數量，抑制了有害菌的生長和繁殖，給對蝦養殖提供了一個良好環境，減少了蝦病發生，大大提高了對蝦的成活率，從而提高了養殖經濟效益，與此同時，在保證養殖池水良好的情況下，對蝦健康生長，大大減少了池塘換水量，節約了養殖用水，又降低了對蝦養殖對環境的污染。

益生菌制劑應用于水產養殖業起步較晚， 但是也呈現了一定的規模。目前，我國市場上的益生菌制劑產品很多，其主要成分都是益生菌群[3]。其中，復合微生態制劑具有天然、無毒、無副作用、無污染、無殘留、安全可靠等優點。正因為益生菌制劑有著諸多優點，近年來國內外的很多研究人員嘗試著各種方式應用于水產養殖業中。黃永春[4]利用復合微生態制劑凈化了對蝦養殖水環境。陳靜等[5]、杭小英等[6]研究表明枯草芽孢桿菌能顯著降低水體中的氨氮和亞硝態氮。Ziaei 等[7]研究表明，利用芽孢桿菌能促進對蝦的生長，提高了成活率，提高了消化道內相關酶的活性。陳秋紅等[8]、李曉英等[9]研究表明利用復合微生態制劑能降低養殖池中的氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫含量，提高了溶解氧含量。

在本試驗條件下，在露天土池中添加菌制劑可以降低池水中氨氮（NH+4-N）、亞硝酸鹽氮（NO-2-N）、化學需氧量（COD），提高池水中的（NO-3-N）、溶解氧（DO），穩定pH值，提高凡納濱對蝦的成活率，降低飼料系數。綜合各項指標并從節約養殖成本的角度來看，建議在露天池塘中添加由枯草芽孢桿菌、光合細菌等配制成的復合益生菌制劑最適添加量為0.45 g/m3水體（含活菌數1.53×109 cfu/g以上）。

參考文獻：

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[5] 陳靜，徐海燕，谷巍.枯草芽孢桿菌 B7 的分離和凈化水質的初步研究[J].河北漁業，2008（11）：10-11，29.

[6] 杭小英，葉雪平，施偉達，等.枯草芽孢桿菌制劑對羅氏沼蝦養殖池塘水質的影響[J].浙江海洋學院學報（自然科學版），2008，27（2）：197-200.

[7] ZIAEI N S， REZAEI M H， TAKAMI G A， et al.The effect of Bacillus spp.bacteria used as probiotics on digestive enzyme activity，survival and growth in the Indian white shrimp Fenneropenaeus indicus [J].Aquaculture，2006，252（2-4）：516-524.[53]

[8] 陳秋紅，施大林，呂惠敏，等.復合微生態制劑對水產養殖水體凈化作用的研究[J].生物技術，2004，14（4）：63-64.

[9] 李曉英，董志國，閻斌倫，等.復合微生態制劑對中國對蝦養殖池塘水質和生長性能的影響中國飼料[J].2007，19：27-29.

（收稿日期：2018-11-23）