活性溶菌酶試驗對痤瘡發病機制的作用探討

滕艷 聶瑾 朱蓓蓓 宦靜 楊雪源 劉毅 侯偉

[摘要]目的：探討痤瘡皮損分離的常見微生物中，非痤瘡丙酸桿菌在痤瘡發生中的作用。方法：評估記錄及對比分析33例痤瘡患者使用活性溶菌酶前（基線）、使用后第2周、第4周面部粉刺及炎性皮損的數量和嚴重程度。結果：基線、治療后第2周、第4周非炎性皮損（粉刺）數量分別為（13.64±5.90）處、（13.64±5.92）處、（13.27±6.27）處，試驗前、后非炎性皮損（粉刺）數量變化無統計學意義（P>0.05）；基線、治療后第2周、第4周炎性皮損（丘疹、膿皰）數量分別為9.48±5.14、7.45±4.27、6.06±4.50，試驗前、后炎性皮損數量變化有統計學意義（P<0.01）；18例受試者使用活性溶菌酶后炎性皮損減少30%以上，有效率達54.55%。結論：除痤瘡丙酸桿菌外，其它微生物在痤瘡發病機制中也可能起著一定作用。

[關鍵詞]痤瘡；活性溶菌酶；痤瘡丙酸桿菌；微生物；發病機制

[中圖分類號]R758.73+3 [文獻標志碼]A [文章編號]1008-6455（2018）03-0066-03

The Active Lysozyme Test to Investigate the Pathogenesis of Acne

TENG Yan，NIE Jin，ZHU Bei-bei，HUAN Jing，YANG Xue-yuan，LIU Yi，HOU Wei

（Clinical Trials & Cosmetics Testing Unit Institute of Dermatology，Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College，Nanjing 210042，Jiangsu，China）

Abstract： Objective To investigate the role of non-P.acnes in the development of acne in common microorganisms isolated from acne lesions. Methods Records and comparative Analysis of the number and severity of facial comedo and inflammatory lesions in 33 subjects with acne prior to active lysozyme use （baseline） and at week 2， week 4 post-use. Results At baseline，the second and fourth week after the test the number of non-inflammatory lesions （comedo） were 13.64±5.90，13.64±5.92 and 13.27±6.27.There was no significant difference in the number of non-inflammatory lesions（comedo） before and after the treatment（P>0.05）. At baseline，the second and fourth week after the test the number of inflammatory lesions （papules and pustules） were 9.48±5.14，7.45±4.27 and 6.06±4.50.The numbers of inflammatory lesions before and after the test had statistical significance（P<0.01）.Eighteen subjects reduced the inflammatory lesions by more than 30% and the effective rate reached 54.55%. Conclusion Other microorganisms besides P.acnes may also play a role in the pathogenesis of acne.

Key words： acne； active lysozyme； propionibacterium acnes； microorganisms；pathogenesis

痤瘡是臨床常見的慢性炎癥性毛囊皮脂腺疾病，患病率為65%～75%[1]。好發于青春期，臨床表現主要以顏面部及胸背部黑頭、白頭粉刺，炎癥性丘疹、膿皰為主。其病因及發病機制較復雜，早在19世紀末就發現痤瘡丙酸桿菌感染是最主要發病機制之一。2016年，我國學者劉瑋、崔勇等[2]研究卻提出痤瘡丙酸桿菌很可能不是痤瘡的致病菌，此結果引起了皮膚科學者們的廣泛爭議。近5年來，筆者門診開展了對痤瘡患者皮損內容物微生物培養檢測項目，臨床檢測結果顯示：除了檢出痤瘡丙酸桿菌以外，還檢出多種非污染微生物，包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及馬拉色菌等?；钚匀芫缸鳛橐环N能溶解微生物細胞壁的堿性酶，抗菌譜廣，其中包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等，有學者認為[3]痤瘡丙酸桿菌在痤瘡患者體內可能產生了一種脂多糖生物被膜，從而免受溶菌酶的破壞（微生物）。因此，本文設計以下試驗以探討非痤瘡丙酸桿菌等微生物在痤瘡發病機制中的作用。

1 資料和方法

1.1 一般資料：本項試驗共有34例符合納入標準的受試者自愿參加，均簽署知情同意書。其中1例不能按時到訪，其余33例受試者完成了4周的療效觀察。受試者平均年齡26歲，其中男性4例、女性29例，年齡最大33歲，最小22歲。

1.2 納入標準：①常住南京；②年齡18～35歲；③面部輕或中度痤瘡，痤瘡嚴重程度參考日本痤瘡研究小組建立的痤瘡嚴重程度分級標準，按照半臉炎性皮損（丘疹及膿皰）數量進行分級；④對常用化妝品不敏感；⑤近3個月未參加其他臨床研究；⑥按要求使用產品，且能按照約定時間到訪。

1.3 排除標準：①過敏體質、有皮膚?。ㄈ纾簼裾?、脂溢性皮炎、日光疹）及嚴重的系統疾病史者；②正在皮膚科接受治療的人群，或1個月內使用羥基酸類、美白類以及抗衰老類藥物的受試者；③囊腫型重度痤瘡患者。

1.4 痤瘡嚴重程度分級：參考日本痤瘡研究小組建立的痤瘡嚴重程度分級標準[4]。

1.5 注意事項：①試驗期間，禁止進行影響被測部位測試的治療；②試驗期間，禁止使用其他同類及影響測試的產品；③試驗期間，護膚品、彩妝、防曬品等生活用品要同試驗前一致，禁止更換。

1.6 試驗方法

1.6.1 測試產品：活性100溶菌酶面膜（生產廠家：陜西慧康生物科技有限責任公司，生產批號：FK2545W，含0.06g溶菌酶凍干粉，15ml溶菌酶專用酶溶液），要求所有受試者晚上清潔面部后在室溫20℃～25℃的房間里休息20min，然后將面膜敷貼于面部（包括痤瘡皮損處），30min后取下，連續使用4周。測試期間不得更換新的化妝品。

1.6.2 測試方法：由皮膚科醫師對試驗開始時、第2周、第4周時痤瘡皮損（粉刺、炎性丘疹、膿皰）進行計數，填寫CRF表。用圖像分析儀VISIA-CR （固定光源、固定角度、以便于前后對比）于使用產品前、使用后2周、4周拍照（正面、左右側面部照片各1張）。

1.7 療效判定指標：①痤瘡皮損計數結果；②痤瘡皮損下降百分比；③有效率（皮損減少30%判定為有效）。

1.8 統計學處理：數據采用SPSS18.0統計軟件處理，進行重復測量方差分析檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 有效性評價

2.1.1 痤瘡皮損計數結果：試驗前非炎性皮損（粉刺）數量為（13.64±5.90）處，第2周為（13.64±5.92）處，第4周為（13.27±6.27）處，試驗前后非炎性皮損（粉刺）數量變化無顯著性差異（P>0.05）；試驗前炎性皮損（丘疹、膿皰）數量為（9.48±5.14）處，第2周為（7.45±4.27）處，第4周為（6.06±4.50）處，試驗前后炎性皮損（丘疹、膿皰）數量變化有顯著性差異（P<0.01）。

2.1.2 痤瘡皮損下降百分比：從0周到第4周，炎性皮損（丘疹、膿皰）的數目有明顯下降。非炎性皮損（粉刺）數量下降的幅度非常小，無統計學差異。炎性皮損（丘疹、粉刺）的下降幅度較大，說明產品對炎性皮損有一定作用。統計學分析顯示炎性皮損的下降有顯著性差異，見圖1。

2.1.3 有效率：如將皮疹減少30%判定為有效。統計結果顯示對痤瘡炎性皮損的有效率為54.55%。對另一部分痤瘡患者（45.45%）的炎性皮損并沒有療效。

2.2 照片評估：見圖2～3。

3 討論

自1893年以來，痤瘡丙酸桿菌被認為是痤瘡發病中的主要致病菌[5]，并作為痤瘡治療的重要靶點。隨著對痤瘡發病機制研究的深入，越來越多的國內外學者在痤瘡皮損處培養出了除痤瘡丙酸桿菌外的其他致病微生物，例如表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、馬拉色菌等[6-8]。2016年，劉瑋等[2]把痤瘡丙酸桿菌在長波紫外線下發出特征性的紅色熒光這個現象作為切入點進行研究，結果發現，正常毛孔中的痤瘡丙酸桿菌數量遠遠多于痤瘡皮損中的數量，同時發現痤瘡皮損中還存在其他可疑的致病微生物。因此，他們提出“痤瘡可能是一種與多種微生物相關的毛囊炎癥”。

本試驗產品主要成分為活性溶菌酶，活性溶菌酶作為一種水解粘多糖的堿性磷酸酶，通過水解糖苷鍵使肽聚糖分子發生斷裂，從而導致微生物因細胞壁溶解而死亡?；钚匀芫缚咕V廣，對大多數G+菌（包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）有效而大多數G-菌無效，其原因在于兩者細胞壁肽聚糖含量不同而存在差異，G+菌細胞壁含90%的肽聚糖，而G-細胞壁肽聚糖含量少脂多糖含量高[9]。而有學者認為痤瘡丙酸桿菌，作為一種G+厭氧菌，在痤瘡患者體內可形成一種生物被膜，其主要成分之一就是脂多糖，故使痤瘡丙酸桿菌免受溶菌酶的破壞。Murai等[10]用尿素液基微量稀釋法針對24株厚皮馬拉色菌試驗，發現溶菌酶在高濃度時亦不能殺滅馬拉色菌但對馬拉色菌的抑制作用呈劑量依賴性。

本組臨床結果顯示，治療4周后，活性溶菌酶產品對非炎性皮損（粉刺）無治療效果，早有文獻報道[11]粉刺內存在大量痤瘡丙酸桿菌，因其不僅能分泌脂酶將皮脂分解為游離脂肪酸從而刺激角質形成細胞的角化，還能直接誘導角質形成細胞的增殖，成為了粉刺形成的一個重要因素。炎癥反應是痤瘡發病的重要因素，與痤瘡皮損中致病微生物有關。本試驗33例痤瘡受試者使用活性溶菌酶產品后，18例（54.55%）痤瘡炎性皮損治療有效，而15例（45.45%）無效?；钚匀芫覆荒苡行б种起畀彵釛U菌，卻對受試者痤瘡炎性皮損產生了治療效果，這一結果提示可能存在除痤瘡丙酸桿菌外溶菌酶致病譜內的微生物（如金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、馬拉色菌等）參與痤瘡炎性反應。而活性溶菌酶對部分炎性皮損無效，是否與溶菌酶抗菌譜有關，有待更多的研究進一步發現痤瘡發病機制中除痤瘡丙酸桿菌以外的致病微生物及其作用機制。

[參考文獻]

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[8]Kumar B，Pathak R，Mary PB，et al.New insights into acne pathogenesis： Exploring the role of acne-associated microbial populations[J].Dermatologica Sinica， 2016，34（2）：67-73.

[9]李凡，徐志凱.醫學微生物學[M].8版.北京：人民衛生出版社，2013：

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[10]Murai T，Nakamura Y，Kano R，et al.Susceptibility testing of Malassezia pachydermatis using the urea broth microdilution method[J].Mycoses， 2002，45（3-4）：84-87.

[11]Jahns AC，Eilers H，Ganceviciene R，et al.Propionibacterium species and follicular keratinocyte activation in acneic and normal skin[J].Br J Dermatol，2015，172（4）：981-987.

[收稿日期]2017-11-30 [修回日期]2018-02-23

編輯/李陽利