超高效液相色譜-串聯質譜法測定畜禽肉中5種磺胺類藥物殘留

□ 孫鑫澤 張德花 吉林省食品藥品安全風險檢驗監測評估中心

磺胺類藥物是抗菌藥，通過對干擾細菌的葉酸代謝，抑制細菌生長，其具有很多優點，如高效、低毒、廉價、性質穩定及抗菌廣譜[1]。通過超高效液相色譜-串聯質譜法，可以測定畜禽肉中5種磺胺類藥物殘留，現闡述如下。

表1 磺胺類藥物的方法靈敏度、準確性及重視性

1 材料與配制溶液

1.1 材料

儀器和試劑：超高效液相色譜-串聯質譜儀（噴霧離子源為配備系統）ThermoC18小柱、Mill-Q超純水器、KQ-250型超聲波清洗器、吉爾森GX-274ASPEC四通道自動固相萃取儀；乙腈、甲醇等制配液，磺胺醋酰、磺胺呲定、磺胺嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺噻唑。

1.1.1 色譜條件

C18色譜柱，柱溫為35℃，溫度10℃，體積為5 μL。流動相：A為乙腈，B為0.1%甲酸水溶液。流速：0.25mL/min.

1.1.2 樣品處理

取樣品5.00g切碎并離心，再加入無水硫酸鈉5g和乙腈20mL混勻、冷凍并離心。取上層液100mL置于棕色雞心瓶中，殘渣內加入20mL乙腈反復上訴操作1次。將提取液合并一起，取10mL異丙醇加入雞心瓶。置于40℃水下減壓并用氮氣吹干。將殘留物加入1.00mL初始流動相，加入10mL的具塞聚丙乙烯離心管內，加入1mL正己烷混勻，以10000r/min冷凍離心5min，下層液經0.2 μm微孔濾膜過濾，待測定。

1.2 配制溶液

（1）各單標儲備液的配制：用乙腈溶解5種磺胺類藥物2.5mg。制成100 μg/mL 儲備液。

（2）配制混合標準液：取上述單標儲備液250 μL置于25mL容量瓶中，定容使用乙腈，配制混合標準液1 μg/mL進行使用。

（3）配制標準工作溶液：分別稱取5.00g空白陰性樣品，分成6份置于50mL離心管中，按樣品處理方法給予樣品處理，制成基質溶液。另外將5、10、25、50、100、200 μL 混合標準液分別置于10mL的具塞離心管，按上述方法吹干，再準確加入1.00mL基質溶液，渦旋混勻，制作成基質標準工作液。

1.3 觀察指標

觀察雞肉樣品中的回收率、加標方法、相對標準偏差。

1.4 統計學分析

數據處理應用SPSS20.0軟件，x2檢驗計數資料，當（P＜0.05）對比有差異。

2 結果

分析磺胺類藥物的方法靈敏度、準確性及重視性，其中研究發現1 μg/kg、的磺胺呲定、磺胺嘧啶平均回收率為82.7%、86.9%，藥物殘留較少，磺胺呲定的RSD數值較少較準確；5μg/kg磺胺呲定、磺胺嘧啶平均回收率88.7%、96.7%，藥物殘留較少，磺胺嘧啶的RSD數值較少較準確；而10 μg/kg磺胺呲定、磺胺噻唑平均回收率95.6%、105%，藥物殘留較少，磺胺噻唑RSD數值較少較準確。具體見表1。

3 討論

磺胺類藥物是常見的合成抗生素，長期、大量使用導致藥物殘留于生產食品中，磺胺類藥物殘留使人的身體機能下降，造成胃部不適感、貧血癥，并發腎臟疾病及血液疾病，且殘留藥物具有潛在的毒性及致癌性。超高效液相色譜串聯質譜法為一種靈敏快速、準確度高的、分離范圍廣的方法，其對樣品的要求較低，對化合物結構破壞小，適用有機分子和生物分子的分離。因此成為用于分析微量有機混合物的儀器。由于獸藥殘留的多樣化及其復雜程度，檢測獸藥殘留不僅限于一種藥物殘留的監測，單類監測獸藥殘留具有效率低，耗時長的缺點，因此超高效液相色譜串聯質譜法被廣泛應用于獸藥的檢測中。綜上所述，對于測定和篩選磺胺類藥物應用超高效液相色譜串聯質譜，具有監測準確、快速、范圍廣等優點。