中草藥飼料添加劑對雞熱應激的影響

劉建國，惠軍來，陳 軍

（1.商洛市洛南縣保安鎮農業綜合服務站，陜西洛南 726115；2.洛南縣職教中心，陜西洛南 726100；3.洛南縣巡檢鎮農業綜合服務站，陜西洛南 726104）

熱應激是指在高溫環境中對機體提出的任何要求所做的非特異性生理反應的總和。其主要原因是環境溫度增高，主要發生在夏季及溫度較高的地區，雛雞多發生，生理反應多為呼吸速度加快，心率加快，水及電解質平衡紊亂。動物表現食欲降低，張口呼吸，少動懶動，嚴重者大量死亡，給養雞業造成巨大損失。當環境溫度高于26℃時，雞生長速度緩慢且在一定范圍內成正相關（孔麗娜等，2015），發現在雞處于熱應激條件下其肉品質下降（李軍喬，2012）。國內外對此進行大量研究，但尚未有較好的解決方法。

常用抗熱應激劑有微量元素類、有機酸類、維生素類、抗生素類、鎮靜劑類和中草藥類等?；幾鳛榭篃釕び泻芎玫男Ч?，由于化藥純度較高，對機體造成的傷害較大，獸藥殘留較高。中草藥是在中醫基礎理論和臨床辨證基礎上，依據藥物的四氣五味對機體進行調理，具有療效顯著、副作用小，殘留少等特點，同時我國中草藥資源豐富，因此，將中草藥作為飼料添加劑對資源的利用有重要意義（于翠平，2014；陳國順，2007）。本研究以金銀花、地榆、白術、石膏等中草藥為原料，依據中草藥組方原則對其進行組方，并添加到飼料中，觀察自擬中草藥復方對仔雞熱應激的影響。

1 材料

1.1 試劑 試驗藥材：金銀花、地榆、白術、黃芪，以2∶1∶1∶1的比例進行組方，然后對各個藥物進行粉碎。

1.2 試驗動物 80只健康仔雞來自洛南縣秦豐源養雞專業合作社王明亮養雞場，試驗于夏天環境溫度，5 d平均溫度在30℃以上進行。

2 方法

2.1 動物分組 選取80只健康仔雞，隨機分為中草藥飼料添加劑高劑量組、中劑量組、低劑量組和空白對照組，中草藥飼料添加劑高劑量組、中劑量組、低劑量組分別按照基礎日糧的1.5%、1.0%、0.5%進行添加?？瞻讓φ战M不添加，正常飼喂，飼喂方式為自由采食和飲水，連續飼喂14 d。

2.2 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞臨床表現的影響 試驗期間，在稱飼料，飼喂飼料及定時對試驗雞進行觀察，主要觀察試驗雞的精神狀態，運動情況、呼吸情況、采食和飲食情況及糞便狀態等臨床表現。

2.3 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞生長性能的影響 試驗前對試驗雞稱重。每天上午定時給予飼料并稱上一天沒吃完的飼料，記錄其日采食量。在第2天給料時稱重并記錄，試驗結束時對試驗雞稱末重。計算其日增重，料重比。計算公式如下：

2.4 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞組織器官的影響 試驗結束時，對試驗雞每組隨機取3只進行剖檢，觀察試驗雞各臟器狀態，有無肉眼可見的病變，若有進行病理切片制作，觀察中草藥添加劑對試驗雞組織的影響。

2.5 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞血液生化指標的影響 試驗結束時，對試驗雞翅靜脈采血2 mL，置于抗凝管中，分離血清，使用全自動血液生化分析儀進行檢測，其檢測項目主要包括總蛋白，白蛋白，球蛋白，葡萄糖，谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶。

2.6 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞血清熱休克蛋白含量的影響 試驗結束時，對試驗雞翅靜脈采血2 mL，置于抗凝管中，分離血清，利用ELISA試劑盒測定試驗雞血清中熱休克蛋白含量的影響。2.7 數據處理 利用SPSS20.0軟件進行單因素方差分析，Duncan’s法多重比較，試驗數據均以“平均值±標準差”表示。P＜0.01表示差異極顯著，P＜0.05表示差異顯著。

3 結果

3.1 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞臨床表現的影響 試驗期間，試驗雞精神狀態良好，反應靈敏，運動姿勢正常，無扎堆現象，被毛光亮不雜亂，采食飲水正常，糞便正常。

3.2 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞生長性能的影響 由表1可知，飼料中添加中草藥后，試驗動物的末重增加，但以高劑量組效果最好，與空白對照組相比差異極顯著（P＜0.01）；添加劑中、低劑量組對日增重效果影響不顯著，與空白對照組相比差異不顯著（P＞0.05），而高劑量與空白對照組相比日增重顯著增加（P＜0.05）；日采食量各組之間無顯著性差異（P＞0.05），但添加劑組有升高趨勢，料重比降低，與空白對照組相比，中草藥添加劑高劑量組差異顯著（P＜0.05）。

3.3 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞組織器官的影響 試驗結束后對試驗雞進行解剖，試驗雞內臟無出血，無結節，無潰瘍，臟器均正常，表明中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞組織器官無不良影響。

3.4 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞血液生化指標的影響 由表2可見，給藥中草藥飼料添加劑后，各試驗組雞甘油三脂、球蛋白、白蛋白均無顯著性差異（P＞0.05），但中草藥飼料添加劑組球蛋白、白蛋白含量有上升趨勢。血清總膽固醇含量升高，與空白對照組相比，中草藥添加劑中、低劑量組差異顯著（P＜0.05）；血清總蛋白含量升高，與空白對照組相比，中草藥飼料添加劑低劑量組差異顯著（P＜0.05）。

表1 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞生長性能的影響

表2 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞血液生化指標的影響 g/L

3.5 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞血清熱休克蛋白含量的影響 由表3可知，飼料中添加中草藥后，熱應激試驗雞的血清熱休克蛋白含量升高，其中中草藥添加劑高劑量組效果明顯，與空白對照組相比，差異顯著（P＜0.05）。

表3 中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞血清熱休克蛋白含量的影響 ng/L

4 討論

隨著集約化養殖方式的發展，空氣流通和熱量散發成了重要問題，加之夏天天氣較熱，濕度較大，因此，在溫度較高地區熱應激的發生率較高。對基礎設施的改建又耗資較大。因此，在飼料中添加中草藥或者某些藥物來減少動物熱應激是種較好的方式（胡永靈，2015；賀紹君，2014）?；幪砑觿┋熜э@著，但長期添加可能出現耐藥性或者器官毒性問題。由于中草藥具有毒性小、殘留低等特點，所以作為添加劑有較明顯的優勢，本研究以熱應激臨床表現對其進行辯證組方，選取具有清熱解毒、疏散風熱的金銀花；具有涼血解毒的地榆；清熱解毒，涼血止痢的白頭翁；補氣升陽，固表的黃芪進行組方，并以梯度劑量進行添加。試驗中，臨床表現結果表明：自擬的中草藥復方添加劑對試驗雞并無不良影響，對試驗動物安全。

生長性能是通過動物增重、采食量等指標進行判斷的，可以直接表現試驗動物的生長發育情況，研究表明，中草藥飼料添加劑對熱應激試驗雞有促生長作用，這種作用可能是通過改善試驗雞的熱應激狀態完成的。

血液是由血漿和血細胞組成。血漿為淺黃色半透明液體，含有無機鹽、纖維蛋白原、白蛋白、球蛋白、酶、激素、各種營養物質、代謝產物等，對機體功能的行使具有重要作用（李振，2011；孫友林，2006）。血液生化指標可以間接反映機體代謝和正常情況，如總蛋白和白蛋白是機體蛋白質，是反映機體營養的重要指標，同時球蛋白是維持機體免疫功能的重要物質（楊恒偉，2010），研究結果表明，飼料中添加中草藥可以增加血清總蛋白，這與陳靜等（2006）研究結果一致。其余各生化指標雖無顯著性差異但有升高趨勢，如球蛋白含量，可以推測中草藥添加劑亦有增強免疫的功能。

熱休克蛋白是一類功能性相關蛋白質，當細胞受到溫度或其他壓力時，其表達會增長。熱休克蛋白的主要功能是提高細胞抗應激能力，特別是耐熱能力。熱休克蛋白70家族最為重要和保守（TISSI RESA）。當機體出現熱應激時，熱休克蛋白70會被大幅度誘導，以提高細胞的耐熱性和對細胞的保護作用（王丹，2011；孫培明，2006），因此，熱休克蛋白70可以作為熱應激指標。本研究結果表明，當試驗動物在高溫狀態下，熱休克蛋白70含量增加，使機體抵抗高熱環境，飼喂添加中草藥的飼料后，熱休克蛋白70含量下降，表明飼喂中草藥飼料添加劑能改善動物的熱應激狀態。