先天性耳聾患兒76例耳聾基因突變篩查結果研究

易天華 賀建橋

doi：10.3 969/j .issn.1007-614x.2018.5.71

摘要 目的：分析先天性耳聾患兒76例耳聾基因攜帶情況。方法：收治先天性耳聾患兒76例，對其采用基質輔助激光解吸/離子化飛行時間質譜技術檢測SLC26A4、GJB2、GJB3、線粒體12SrRNA 4個常見遺傳性耳聾基因（共20個位點）的突變情況。結果：經飛行質譜檢測，耳聾相關基因突變18例，檢出率23.68%。其中GJB2基因突變9例（11 84%），SLC26A4基因突變6例（7 89%），SLC26A4、GJB2、GJB3復合突變3例（3.94%）。結論：先天性耳聾基因突變檢出率較高，GJB2基因純合率最高，SLC26A4基因突變次之。先天性耳聾基因的突變檢測為減少出生缺陷患兒提供了依據，應重視先天性耳聾基因的基因學檢測。

關鍵詞 先天性耳聾；基因突變；SLC26A4；GJB2

作為最常見出生缺陷之一的先天性耳聾，是一種非綜合性耳聾，特征是以聽力喪失為唯一癥狀，60%與遺傳因素有關，占遺傳性耳聾的70%，其他綜合性耳聾30%[1]。至今已克隆和鑒定出常染色體隱性遺傳耳聾基因40個，常染色體顯性遺傳耳聾基因27個，線粒體耳聾基因7個和X連鎖耳聾基因3個[2]。目前報道的耳聾相關突變基因有SLC26A4、GJB2、GJB3、線粒體12SrRNA，并且已作為臨床耳聾基因的常規檢查。不同的基因在不同的民族和地區有不同的突變率和發病率[3]。本研究對本市先天性耳聾患兒76例進行4個基因20個突變位點的耳聾基因普遍篩查，這4個基因分別是（GJB2/GJB3/SLC26A4/線粒體12SrRNA），從而進一步對我市聽力障礙兒童耳聾基因攜帶情況進行分析和了解，明晰當地先天性耳聾基因的流行病學情況。

資料與方法

2013年9月-2014年9月收治已行人工耳蝸植入進行術后康復的先天性耳聾患兒76例，男41例，女35例，平均年齡5 .12歲；患兒攜帶耳聾突變基因18例。

聽力診斷與評估：有關聽力學的診斷和隨訪的臨床資料，包括患兒一般信息、耳毒性藥物使用史、母親孕期疾病史、新生兒出生后病史、耳聾家族遺傳史、體格檢查、出生時的聽力篩查及隨訪資料等。采用耳聲發射和電生理檢查對聽力學進行檢查測驗，具體如下：①采用美國GSI-33型中耳分析儀進行聲導抗測試，對耳聲發射進行檢測。②利用美國GSI Audera聽覺腦干誘發電位測試儀進行電生理檢查測試。

基因檢測方法：所有患兒均對足跟血進行采集，使用濾紙采集卡，待卡自然晾干后將其裝回密封袋中，等待送檢。對耳聾基因利用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜（MALDI-TOF-MS）技術進行檢測，對4個常見耳聾基因GJB2、SLC26A4、MT-RNR1和GJB3進行20個突變位點的檢測。

統計學方法：建立Excel數據庫，采用SPSS 13.0軟件進行統計分析，對耳聾基因檢出率進行描述性分析。

結果

基因檢測結果，見表1。

聽力篩查及隨訪情況：雙側耳聾組18例中患兒出生時聽力通過2例，其余的經檢測均沒有通過。通過的這2例基因檢測，結果是SLC26A4基因復合雜合突變者，患兒1歲左右時對聲音的反應差。對患兒進行ABR檢測，結果表明2例均是雙耳重度聾，隨后對其進行顳骨CT檢查，結果顯示2例均提示大前庭導水管擴張。左側耳聾患兒1例，表現為左側耳廓畸形、耳道閉鎖，聽力學在6個月時的診斷是左耳重度耳聾，MRI檢查結果表明右耳未見明顯異常，1歲時外傷后出現極度下降的右耳聽力，ABR再次檢測結果提示重度耳聾，雙耳，而顳骨CT檢查結果表明大前庭導水管擴張出現于左耳，而基因檢測表示未見陽性突變。

討論

最先被克隆定位的遺傳性耳聾基因是GJB2，其對縫隙連接蛋白Cx26進行編碼。在人類耳蝸毛細胞中Cx26表達較高，該基因的突變與耳聾發生相關性較大，是突變率最高的耳聾基因[4]。本研究中GJB2突變9例（11.84%），其中235del C純合突變率最高，其次為35del G和235del C雜合突變，進一步證明了突變高頻率耳聾基因是GJB2[5]。GJB2突變一般會引起常染色體隱性遺傳，對GJB2基因突變攜帶者的婚育方面，本研究結果可起到一定的指導作用。

編碼縫隙連接蛋白的另一個基因則是GJB3，其可引起常染色體顯性或隱性遺傳性耳聾[6]。在本研究中GJB3混合突變3例（3.94%），均通過聽力篩查且隨訪無異常。但有報道提示，該基因雜合突變多表現為遲發型高頻聽力下降[7]。臨床上應提醒基因突變攜帶者進行定期的聽力測試，當出現聽力下降時應及時就醫。

SLC26A4屬于離子轉運體家族，其突變導致常染色體隱性遺傳[8]，在本研究中，SLC26A4突變率僅次于GJB2（7.89%，且突變類型有雜合突變和純合突變，因此進行SLC26A4基因突變篩查，早期檢測篩查并進行有效的預防，可使患者的聽力下降得到阻止或延緩。另外，本研究中對線粒體DNA12SrRNA基因致聾突變沒能檢出，這主要和本研究例數少有一定的關系。

本研究通過對本市先天性耳聾患兒76例行常規耳聾基因檢測，發現GJB2和SLC26A4是當地遺傳性耳聾的主要致病基因。其中235delC純合突變是GJB2基因檢出頻率最高的突變位點。SLC26A4基因檢出頻率最高的突變位點為IVS7-2A>G雜合突變。遺傳因素在先天性耳聾患兒中占較高比例，對于患兒及突變基因攜帶者的聽力隨訪意義重大，尤其是遲發性耳聾發生。耳聾基因的較早檢出，對做到早發現、早診斷、早干預、早預防并減少耳聾患者的出現，有針對性地對耳聾基因攜帶者進行婚前、孕前及產前的遺傳咨詢指導，避免耳聾患兒出生有積極意義。

參考文獻

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