α-內收蛋白基因多態性與血壓鹽敏感和左室肥厚的相關性

王若琦 李紅梅 唐獻斐 彭昳媛 魏秋醉 黃怡佳 潘征

(右江民族醫學院 1臨床學院心臟內科，廣西 百色 533000；2基礎學院)

高血壓發病機制復雜，是多個微效基因與環境因素交互作用的產物。鈉離子被認為是影響血壓的最重要環境因素，而α-內收蛋白(ADD)參與細胞連接、膜離子轉運和信號傳遞等過程,與多種鈉離子轉運機制密切相關〔1,2〕。許多研究發現ADD基因Gly460Trp多態性與高血壓的易感性和靶器官損傷等存在相關性。血壓的鹽敏感性(SS)和左室肥厚(LVH)都是高血壓發生發展的獨立危險因素〔3,4〕，與高血壓的預后密切相關，明確ADD基因Gly460Trp多態性與兩者的相關性有助于更加深入理解兩者的發生機制，制定相應的治療方案。本研究擬探討ADD基因Gly460Trp多態性與血壓鹽敏感和LVH的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 2014年6月至2017年6月在右江民族醫學院臨床學院住院治療，資料齊全，年齡18～80歲，同意參與研究的壯族高血壓患者。排除存在繼發性高血壓、嚴重肝腎功能不全、腦血管意外及不愿意參與研究者等。根據冷加壓試驗檢測結果分為鹽敏感者和鹽不敏感者各75例；鹽敏感者男40例、女35例，年齡54～72歲，平均(63.14±8.62)歲；鹽不敏感者男42例，女33例，年齡55～78歲，平均(61.97±7.54)歲。根據LVH的檢測結果分為LVH組102例和無LVH組48例。LVH組男62例，女40例，年齡55～76歲，平均(63.23±8.57)歲；無LVH組男20例，女28例，年齡51～74歲，平均(62.35±9.47)歲。各組在性別和年齡等差異無統計學意義(P>0.05)。均知情同意。

1.2基線調查 調查研究對象的人口學信息、疾病史和家族史等。

1.3臨床資料 以電子血壓計規范測量收縮壓(SBP)和舒張壓(DBP)，以全自動生化儀檢測肝功能、腎功能、血糖和血脂等生化指標。

1.4左室肥厚的檢測 固定的技術人員采用飛利浦彩色多普勒超聲診斷儀檢測量左房前后徑(LAD)、右房前后徑(RAD)、左心室舒張末期內徑(LVDd)、左室收縮末期內徑(LVDs)、右室舒張末期內徑(RVDd)、室間隔厚度(IVS)、左室后壁厚度(PW)和左室射血分數(LVEF)。按照Devereux校正公式計算左室重量(LVM，g)=0.8×1.04×{〔左室內徑(LVID)+IVS+PW〕3-LVID3}+0.6。體表面積(BSA)=0.006 1×身高+0.012 8×體重-0.152 9。左室重量指數(LVMI，g/m2)=LVM/BSA，以LVMI>125 g/m2(男)，>110 g/m2(女)為診斷LVH標準。

1.5鹽敏感的檢測和判斷 血壓的SS判定目前尚無統一規范的方法和標準，近年來國內外有相關研究提出冷加壓試驗可作為可靠并且相對簡單的方法檢測SS〔5,6〕。本研究采用冷加壓試驗檢測和判斷SS，即測量基線血壓值，受試者的手掌置于冰水混合物中，計時60 s，以試驗后收縮壓、舒張壓和平均動脈壓中任一項最高值較基礎血壓值升高15 mmHg為陽性，反之為陰性。

1.6基因多態性檢測 參考相關文獻〔7,8〕進行檢測。常規抽取靜脈血5 ml，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，低滲分離白細胞，提取基因組DNA。Genebank進行引物檢索驗證并委托公司合成。ADD基因引物序列上游的順序：5'-CTCCTTTGCTAGTGACGGTGATTC-3',下游的順序：5'-GACTTGGGACTGCTTCCATTCGGC-3'。95℃預變性5 min，變性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，40個循環，72℃再延伸5 min，內切酶酶切。以基因雙鏈第614位的堿基都是G的為GG型，都是T堿基的為TT型，其余為GT型。

1.7統計學分析 采用SPSS17.0軟件進行χ2及t檢驗。

2 結 果

2.1鹽敏感患者與鹽不敏感患者的心臟結構指標比較 兩組LVPS、LVDd和LVMI差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2合并LVH組與不合并LVH組心臟結構指標比較 兩組LAD、LVDs、LVDd、LVMI和LVEF差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表1 鹽敏感患者與鹽不敏感患者的心臟結構指標

與鹽不敏感組對比：1)P<0.05

表2 LVH患者與LVH組患者的心臟結構指標

與無LVH組對比：2)P<0.05

2.3鹽敏感組與鹽不敏感組ADD基因Gly460Trp多態性檢測結果 兩組GG型、TG型和TT型分布差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 鹽敏感與鹽不敏感組、合并LVH與不合并LVH組ADD基因Gly460Trp多態性檢測結果〔n(%)〕

與無LVH組比較：1)P<0.05

2.4合并LVH組與不合并LVH組ADD基因Gly460Trp多態性檢測結果 左室肥厚組TT基因型頻率明顯高于無左室肥厚組(P<0.05)。見表3。

3 討 論

內收蛋白是異源二聚體細胞骨架蛋白，在細胞表面離子轉運與維持鈉鉀泵的功能等方面起到了重要作用。內收蛋白的3種亞基分別由ADD1、ADD2、ADD3 3種基因編碼，ADD1基因與高血壓的關系的研究較多，其Gly460Trp多態性曾經也是鹽敏感高血壓易感基因研究的熱點〔9,10〕。早前的臨床研究和薈萃分析認為ADD基因的Gly460Trp多態性可能與血壓的SS相關〔11〕，我們進行的納入了更多研究結論的薈萃分析結果提示白人ADD基因的Gly460Trp多態性與SS之間并不存在顯著關聯，亞組分析顯示亞洲國家一些小規模研究的結果認為倆者存在著關聯〔12〕。

鹽是高血壓最重要的環境相關因素。鹽敏感是包括人類在內的哺乳動物共有的生物學特點。不同的人對鹽負荷存在不同的血壓反應，血壓可在鹽負荷后呈現出的相應升高或者降低等改變。血壓的SS是連接鹽與高血壓的遺傳基礎，是原發性高血壓的中間遺傳表型，也是心血管病的獨立危險因子〔13,14〕。

LVH是發生心力衰竭和心腦血管病等的獨立危險因素。臨床上有超過30%的高血壓患者可能發生LVH，并且發生率與高血壓嚴重程度呈正相關。高血壓伴LVH的加權危險將會加劇并促進心腦血管病的發生和進展〔4,15〕。

本研究結果與我們前期的研究和既往的相關研究結論相似〔12,16〕。

LVM受許多因素的影響，多種因素可以誘導心臟質量增加和室壁增厚，進而導致心室重構和心力衰竭等〔4,17〕。根據本研究結果，我們推測ADD基因Gly460Trp多態性可能是高血壓患者LVM的預測指標，T等位基因可能是高血壓左室肥厚發病的遺傳易感基因。與GG基因型相比，TT基因型可能通過影響心肌細胞膜內收蛋白功能，干擾了心肌肌動蛋白的絲狀聚集及可能激活腎小管細胞Na+-K+-ATP酶活性，增加水鈉潴留，加重心肌負荷等機制在LVM發生發展中起了重要作用。因此，對高血壓患者盡早進行ADD基因Gly460Trp多態性檢測，盡早發現高危人群，盡早積極干預治療有助于將高血壓防治戰線前移，延緩甚至逆轉靶器官損傷，降低心血管事件及死亡風險，改善預后，具有重大的理論意義和現實價值。