孕期人巨細胞病毒感染與不良妊娠結局的探討

游雪云，劉艷秋，徐永華，張兆振，趙鳳

(江西省婦幼保健院產前診斷中心，江西 南昌 330006)

人巨細胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)為雙鏈DNA病毒，該病毒在人類感染中很普遍，特別是在嬰幼兒、孕婦等免疫力低下的人群中感染更常見[1]，孕婦感染HCMV時，病原體可經過胎盤引起母嬰垂直傳播，從而導致宮內胎兒流產、死胎、早產、先天畸形及出生后嬰幼兒發育遲緩等病變[2]。本文對305例病例組及412例正常對照組孕婦進行了外周血HCMV抗體、IgG親合力指數及HCMV-DNA的檢測。了解南昌地區孕婦HCMV的感染情況可阻止不良妊娠繼續，減少殘障兒出生，對優生優育、提高人口素質具有重要意義，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象與樣本 2015年1月-2017年12月在江西省婦幼保健院門診就診的16551例年齡為22～40歲、 體重在 45～60kg、 孕周在 9～20周的孕婦。305例有不良妊娠結局的孕婦納入病例組，同時隨機選取412例正常妊娠結局的孕婦為正常對照組。抽取孕婦靜脈血2.5ml，分離血清；同時采集乙二胺四醋酸(EDTA)抗凝血2.5mL，分離血漿，均置冰箱儲存待檢[3]。

1.2 CMV IgG和IgM抗體檢測 采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測孕婦外周血CMV IgG和IgM抗體，CMV抗體試劑盒購自北京貝爾生物技術有限公司，按照試劑盒說明書進行相關操作，每次檢測均設立陰、陽性對照[4]。結果判讀：待測樣本OD值≥陰性對照孔OD值+0.1作為陽性判斷標準。

1.3 HCMV-DNA檢測 采用熒光探針定量多聚酶鏈反應技術檢測孕婦血中的CMV-DNA。使用中山醫科大學達安基因診斷公司HCMV-DNA熒光定量PCR試劑盒。HCMV-DNA拷貝數＞510×102基因拷貝/ml為陽性。

1.4 CMV IgG親合力檢測 上述實驗檢測判定為IgG陽性的血清標本再進行親和力檢測，采用與CMV IgG定量檢測相同的ELISA試劑盒進行。根據公司提供的軟件計算標本的AI值，AI＜30%為低親和力抗體，表示為近期發生的原發感染，AI≥50%為高親和力抗體，提示既往感染。

1.5 統計學處理 采用SPSS 17.0軟件對所有數據進行分析，兩組數據進行組間卡方檢驗比較，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 孕婦CMV抗體陽性率及親和力指數檢測結果根據CMV抗體實驗室檢測結果的判讀[5]，717例孕婦中，16例（2.2%）CMV IgG和IgM均陰性，提示未感染CMV。8例孕婦表現為CMV IgG-/IgM+。孕婦總體CMV IgG陽性率為96.6%，其中正常對照組陽性率相對低于病例組孕婦（P=0.037），差異有統計學意義(P＜0.05)。根據CMV感染狀態判讀標準，兩組孕婦潛在感染比例，即CMV IgG+/IgM-，分別為93.1%和95.2%，差異無統計學意義（P=0.425）。另外，病例組孕婦活動性感染即（CMVIgG+/IgM+）比例為 3.9%（12/305）明顯高于正常對照組（1.2%），差異有統計學意義（P=0.023）。為了區分活動性感染是原發感染還是既往感染，又檢測了孕婦血清CMV IgG AI。檢測結果顯示，病例組12例活動性感染孕婦中8例AI≥50%，提示既往感染；剩余4例AI＜30%，提示原發感染。而正常對照組4例均為高親和力抗體，提示與繼發感染有關。實驗結果顯示HCMV-IgG低親和力樣本病例組孕婦所占比例明顯高于對照組孕婦，差異有統計學意義(P＜0.05)。值得注意得是，這4例低親和力樣本病例組孕婦的新生兒在出生后隨訪時均異常，包括2例生長發育遲緩、1例化膿性腦膜炎及1例頭顱畸形。見表1。

表1 病例組和正常對照組孕婦CMV血清學狀態比較

2.2 兩組孕婦血HCMV-DNA檢測結果的比較 對照組孕婦陽性例數所占比例顯著低于病例組孕婦，差異有統計學意義(P＜0.05)。正常妊娠組中有1例HCMVDNA陽性，而病例組中有64例HCMVDNA陽性，提示胎兒有感染風險。病例組中，1例IgM（-）/IgG（-）樣本 HCMV-DNA 檢測結果為陽性，提示患者可能處于HCMV感染窗口期。另病例組12例IgM（+）/IgG（+）樣本親和力試驗結果有4例為低親和力，而HCMV-DNA檢測結果有5例樣本陽性，推測繼發感染中可能存在新毒株再次感染。見表2。

3 討論

HCMV是細胞內寄生的病原體，在自然人群中感染較普遍，據報道發達國家人群感染率為30%～70%，而我國人群的感染率在80%以上[6]。若HCMV侵入人體，將長期存在于體內，并大部分免疫正常的個體將表現為無癥狀感染，若胎兒、幼小嬰兒及免疫抑制個體感染HCMV可出現明顯病癥[7]，而孕婦感染后將可能導致胎兒畸形、流產及早產等，感染嚴重者可致胎兒死亡[8]。

表2 兩組孕婦HCMV感染與HCMV-DNA檢測結果的比較

本研究中大部分孕婦（94.3%）為潛在感染，僅很小部分孕婦（2.4%）發生CMV活動性感染，特別是原發感染，這與既往報道一致[9，10]。孕期CMV活動性感染低可能是由于很多孕婦在妊娠前就已經感染過CMV，妊娠前已存在的母體免疫力對胎兒或新生兒有一定的保護作用，可降低CMV感染的風險[11]。值得一提得是，病例組4例低親和力樣本孕婦的妊娠結局有2例表現為新生兒生長發育遲緩，其余2例分別表現為頭顱畸形及化膿性腦膜炎。據報道胎兒顱面部畸形可能與先天性CMV感染有關[12，13]，也有研究報道CMV感染可能與HIV感染患者化膿性腦膜炎的不良預后有關[14]。由此可見，病例組HCMV陽性率明顯高于正常妊娠結局者(P＜0.001)，說明了孕期HCMV感染對胎兒的危害作用確實不容忽視。

在本研究中，我們還對HCMV的原發與繼發性感染進行了評估。通過檢測HCMVIgM/IgG先篩選出 IgM（+）/IgG（+）孕婦，接著檢測 IgG 抗體親和力指數，然后評估兩組孕婦HCMV的原發性感染與繼發性感染情況，同時對兩組孕婦的血樣進行HCMV-DNA檢測，用以評估胎兒的感染風險。通過對兩組研究對象的HCMV-IgG陽性樣本進行親和力指數評估后發現，HCMV-IgG低親和力樣本病例組孕婦所占比例明顯高于對照組孕婦，差異有統計學意義(P＜0.05)。另外，從兩組研究對象的HCMV-DNA檢測結果可以發現，病例組孕婦陽性例數所占比例顯著高于正常對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)。 此外，本文病例組 IgM（+）/IgG（+）樣本中，親和力試驗提示12例樣本中有4例為低親和力，即存在原發感染，而HCMV-DNA檢測中有5例樣本陽性，推測繼發感染中可能存在新毒株再次感染HCMV-DNA而被檢出。另外病例組中，有 1 例 IgM（-）/IgG（-）樣本 HCMV-DNA 檢測結果為陽性，提示患者可能處于HCMV感染窗口期，抗體還沒出現，但HCMV-DNA已經可以檢測出，可見，采用HCMV-DNA檢測早期感染患者可以避免窗口期漏檢。鐘瑞芬等[15]認為采用HCMVDNA檢測比采用CMV IgM抗體檢測來判斷是否感染HCMV更具有準確、快速、可靠的優點。綜上所述，HCMV-DNA結合HCMV-IgG親和力指數檢測，可以較好的反映孕婦是否存在原發感染或活動性感染這些危險因素，我們還應對孕期CMV活動性感染的孕婦進行持續監測并正確進行胎兒風險評估，從而為臨床提供早期診斷和早期預防胎兒先天畸形的有力依據。

綜上所述，南昌地區CMV感染中CMV-IgG陽性率較高，并且大部分為潛在感染，且僅很少部分孕婦在孕期發生活動性感染。對于早孕期確診為HCMV感染者，我們應該建議終止妊娠，而對于中晚期HCMV感染者，目前還沒有特別有效的治療方法。所以只有增強育齡婦女的身體素質，提高孕前、孕早期的保健意識，自覺進行孕前HCMV篩查，排除活動性感染后再懷孕；同時在人群中普及對HCMV宮內感染的宣傳力度，以提高其對HCMV危害的認識。