孫慶柱 關景春 時均偉
(1.山東魯抗舍里樂藥業有限公司,山東濟寧 272100;2.山東魯抗生物制造有限公司,山東濟寧 272000)
產品名稱:硫酸粘桿菌素,即多粘菌素E,為多粘菌素E1、E2和E1-2硫酸鹽的復合物。
硫酸粘桿菌素對綠膿桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、痢疾桿菌、百日咳桿菌等大部分革蘭氏陰性菌有顯著抗菌作用,為畜禽頑固性痢疾等腸道常見病的首選藥物。該藥物具有較低的濃度(0.004%)下對革蘭氏陰性菌引起的疾病有治療和預防作用。
菌種·培養工藝:
(1)搖瓶:融解凍結種子,接種0.2~1.0ml。26.5~29.5℃,旋轉式搖床220~240min-1培養18~24h后移種,最佳時間是pH在5.0~7.0之間,稀釋10倍的OD530在0.04以上。
(2)種子罐工藝:把最佳移種時間菌種通過火焰接種至種子罐。29~31℃,80rpm培養18~30h,向發酵罐移種的最佳時間是pH在6.2以下。
(3)發酵罐工藝:根據代謝情況分階段控制培養溫度、攪拌轉速、通氣比,并優化補料工藝,降低動力和原材料成本。發酵周期一般90-120h。
(1)使用氨水進行pH值的調控,做好氨氮值控制,氨氮值高可用液堿調控。
(2)在發酵過程中后期開始起泡沫,用消沫劑控制液面,使用復合消泡劑效果更好。
(3)采用60~70%含量的液糖,依據發酵液殘糖控制殘糖含量在0.2~0.3%。
本文通過對多粘桿菌進行發酵工藝及培養基的優化,大生產發酵生物效價可達 6.78 ×105U/ml,在發酵過程中優化了遲效氮源豆粕和速效氮源硫酸銨配比,穩定了生物效價穩定長勢,并通過氨水穩定pH和氨氮值,降低原材料投入成本,取得較好的經濟效益。