多花黃精組培苗瓶內生根培養基優化及縮短育苗周期的方法①

饒寶蓉

(福建省南平市農業科學研究所 福建建陽354200)

多花黃精（Polygonatum cyrtonema）屬百合科（Liliaceae）黃精屬（Polygonatum）的多年生草本植物。據《名醫別錄》記載，黃精具有補氣養陰、健脾、潤肺、益腎的功效，常用于脾虛胃弱、體倦乏力、口干食少、肺虛燥咳、精血不足、內熱消渴的治療［1]?！吨袊幍洹芬幎?，作為黃精藥用的3 種原生藥是黃精（P.sibircumRed）、多花黃精（P. cyrtonemaHua）和滇黃精（P.kingianumColl．Et Hem s1）［2]。多花黃精是黃精中的優質品種。隨著市場對多花黃精需求量的增加，多花黃精野生資源日益匱乏，難以滿足需求，于是近年來多花黃精的人工栽培量也逐漸增加。

早在2003年，徐紅梅等［3]就開展了生長調節劑對多花黃精芽體外發生過程性狀的影響研究。2010年后，針對多花黃精的組織培養和快速擴繁的研究報道逐漸增多［4-9]，這些研究主要集中在芽的分化誘導和生根培養等方面，以期篩選出各階段最適培養基配方，多花黃精組培苗瓶內擴繁的研究也日趨成熟。但組培苗移栽種植過程中的問題也逐漸暴露，如組培苗的抗病性差，成活率不高，塊莖容易腐爛，出苗時間長等等。目前組培苗能否順利從組培室轉移到大田，最終移栽到林下，這是多花黃精組培苗能否實現工廠化育苗的關鍵技術之一。在栽培技術上的研究主要集中在根莖繁殖、根莖和林地的選擇［10]、根莖生長特性［11]、根莖的擺放［12]以及林下套種［13]等方面。關于多花黃精的組培苗在移栽成活技術方面的研究報道甚少。因此，筆者針對多花黃精組培苗移栽種植過程中出現的問題，如塊莖容易腐爛，出苗時間長，成活率不高等開展研究，以期為多花黃精的保存和資源開發提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗于2018年在福建省南平市農業科學研究所組培室及基地大棚進行。試驗材料源于福建省南平市農業科學研究所組培室的多花黃精組培苗，且為在MS培養基上培養的繼代苗。

1.2 方法

1.2.1 生根培養基制備

基本營養液：MS＋0.3 mg/L NAA＋20 g/L蔗糖；

CK：基本營養液＋7.6 g/L 卡拉膠，pH 5.8，120 mL/瓶（常規生根培養基）；

A1：基本營養液＋濾紙（1～2 層），pH 5.8，12 mL/瓶（淺層液體培養基）；

A2：基本營養液＋紗布，pH 5.8，12 mL/瓶（淺層液體培養基）；

A3：基本營養液＋河沙（1 cm 厚），pH 5.8，12 mL/瓶（淺層液體培養基）。

類似A1、A2 這種淺層液體培養在馬鈴薯、草莓、甘薯、香蕉、野生薄荷、藍莓、生姜等幾種作物試管苗快繁以及食用菌菌種制備上的應用已有報道［14-22]。將4種培養基準備好后，進行121℃、131 kPa、22 min滅菌。放置72 h確認無污染。

1.2.2 接種培養

將增殖培養18 d 左右的莖切成帶1～2 個芽的小塊莖轉入培養基中，每瓶接8小塊。

接種后置于培養箱中培養30 d 后，開始觀察生根情況，60 d后統計根數、根長和根粗。培養條件：光照強度1500～2500 lx，時間11 h/d，恒溫（25±2）℃。

1.2.3 移栽試驗設計

將已生根多花黃精塊莖進行2～4℃低溫冷藏，分別冷藏30 d（B1）60 d（B2）90 d（B3），以未冷藏為CK，探究塊莖的出土時間與成活率，至移栽開始跟蹤觀察出土時間，120 d后開始評價整齊度，統計成活率與新根數。

移栽前剪去塊莖上的葉子，將塊莖不同深度的放置于土壤中，以塊莖的一芽頭離土表的高度為準，分別放置深度為3、2、0 cm，移栽180 d 后開始統計成活率，株高，葉片數。

1.2.4 數據統計分析

試驗數據采用Microsoft Excel 2000、JMP 軟件進行數據的處理和分析。

2 結果與分析

2.1 不同培養基對多花黃精塊莖生根的影響

不同培養基對多花黃精塊莖生根的影響見表1。從表1 可以看出，開始長根的時間CK＞A3＞A2＞A1，以紗布為固著物的瓶內淺層液體培養基（A2）最短，濾紙為固著物的瓶內淺層液體培養基（A1）次之，卡拉膠為凝固劑的常規培養基（CK）最長，但各處理均未達到顯著性差異。生條根數為卡拉膠為凝固劑的常規培養基（CK）＞濾紙為固著物的瓶內淺層液體培養基（A1）＞紗布為固著物的瓶內淺層液體培養基（A2）＞沙子為固著物的培養基（A3），CK、A1、A2 三者差異不顯著，A3 顯著性小于A1、CK。根長仍然是以卡拉膠為凝固劑的常規培養基（CK）最長，與以濾紙為固著物的瓶內淺層液體培養基（A1）差異不顯著，但兩者顯著性高于以沙子為固著物的培養基（A3）。以沙子為固著物的培養基（A3）的根最粗，為0.58 mm，其次為紗布為固著物的瓶內淺層液體培養基（A2），再次為濾紙為固著物的瓶內淺層液體培養基（A1），卡拉膠為凝固劑的常規培養基（CK）的最細，A3 顯著高于CK、A1、A2，CK、A1、A2三者間的差異不顯著。

表1 不同培養基對多花黃精塊莖生根的影響

2.2 不同低溫冷藏時間對多花黃精塊莖移栽出土時間與成活率的影響

從表2上可知，不同的低溫冷藏時間對多花黃精組培苗的出土時間有較大的影響，其中冷藏60 d（B2），冷藏90 d（B3）的出土時間大大降低，顯著低于未冷藏（CK）和冷藏30 d（B1）。幾種處理成活率差異不顯著。整齊度也以冷藏時間長的為好。冷藏的時間越長，成活率略有下降，但差異不顯著，新根數有一定的降低?？偟膩碚f，冷藏90 d的（B3） 多花黃精組培苗出土時間短，整齊度高。

表2 不同低溫冷藏時間對多花黃精塊莖移栽出土時間與成活率的影響

2.3 種植深淺度對移栽成活的影響

從表3可以看出組，培苗塊莖放置的深度對多花黃精成活率有較大的影響，隨著芽頭離表土面越深，成活率越低，離土表3 cm 的成活率為73%，離土表2 cm 的成活率80%，離土表1 cm 的成活率90%，3 處理達到顯著性的差異；株高也以深度大的為低，塊莖頂芽離土表3 cm 的，6 個月后株高能達到5.8 cm，塊莖頂芽離土表2 cm 的，6 個月后株高能達到7.67 cm，塊莖頂芽離土表0 cm 的，6 個月后株高能達到9.08 cm，三者達到顯著性差異。葉片數與成活率、株高的趨勢相同但未達到顯著性差異。從結果可知淺植更有利于多花黃精組培塊莖的生長。

表3 種植深淺度對移栽成活的影響

3 討論與結論

組培苗移栽種植前的清洗環節很關鍵，一旦粗心馬虎，苗很容易受損，特別是針對多花黃精組培苗的塊莖移栽種植發現塊莖容易腐爛的現象，進行了幾種塊莖生根的培養基試驗，比較了多花黃精組培苗幾種生根方法的效果，結果表明，以卡拉膠為原料使其固化的瓶內固體生根培養基成本最高、生根效果一般，生根時間長，根系較為細長，而以濾紙、紗布，沙子替代卡拉膠的培養基培養的根系粗度逐漸加粗，長度縮短，以沙子為固著物的根系最粗，是較為理想的生根基質。以卡拉膠為凝固劑的培養基存在洗苗難，根系易受損，特別是多花黃精塊莖有很多的折痕縫隙特點，很容易夾藏膠狀培養基，難清洗，一旦未清洗凈塊莖表面很容易滋生細菌，造成塊莖腐爛。以濾紙和紗布為固著物的瓶內淺層液體培養基生根能大大減輕洗苗的困難，清洗簡單，節約成本且移栽長勢上均優于以卡拉膠為凝固劑的培養基，這與胡楠［23]、謝君鋒［24]、朱勤［25]、王星［26]、譚體瓊等［27]分別在魔芋、甘蔗、甘薯、香蕉、馬鈴薯等作物上的研究結果相似，但是以紗布為固著物的培養基根系會穿過紗布纏繞在紗布上，取紗布時易造成斷根，濾紙又較為薄，根系沒有向下生長的空間，導致根系較為細長而盤旋在培養瓶底部，須根少，而用沙子作為固著物能彌補這些不足，不僅無需洗苗，根系還有足夠生長的空間，根系粗壯，須根多，這不僅減少了傷苗、傷根的機率，同時降低了組培苗生產成本，增加了經濟效益，是值得推薦的效果較好的生根方法。

多花黃精組培苗移栽存在出苗率低、出苗時間不統一，甚至不出苗的現象，這嚴重阻礙了多花黃精的生長，不利于種苗的種植管理與批量銷售以及多花黃精的產業化發展。以2～4℃低溫冷藏70～80 d 大大縮短了多花黃精出土的時間，縮短塊莖的休眠期，較好地解決了以上問題。雖然隨著冷藏時間的增加，成活率會略有所下降，但差異并不顯著，并且整齊度大大提高，有利于育苗公司種苗的管理與運營。試驗結果還可以看出，組培苗塊莖放置的深度對多花黃精成活率有較大的影響，不宜種植太深，越深成活率越低，以根系掩蓋好，塊莖的芽頭以露土為佳，這與塊莖的通氣有關，通氣好，雜菌滋生其塊莖上的少，不宜腐爛，成活率高。