云南省文山壯族苗族自治州獸醫實驗室建設現狀調查

（文山州動物疫病預防控制中心，云南文山 663000）

文山壯族苗族自治州（以下稱文山州）地處云南省的東南部，全州8 縣（市）104 個鄉（鎮），動物防疫工作點多面廣，難度較大。2018 年我國非洲豬瘟（ASF）的發生，暴露了文山州基層動物疫病防控能力的薄弱，因此全面了解其獸醫實驗室建設現狀及檢測能力水平，針對性地加強8 縣（市）動物疫病預防控制中心獸醫實驗室的建設，提高各縣市獸醫實驗室綜合技術能力，對全州動物疫病的預防與控制具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 調查對象的基本情況

至2020 年文山州共有8 個縣級獸醫實驗室，1 個州級獸醫實驗室。獸醫實驗室是動物疫病控制系統的重要組成部分，承擔著動物疫病的診斷、檢測、監測以及流行病學調查等重要任務，是動物疫病防控工作中重要的技術支撐力量。各級獸醫實驗室在建設、運行、管理等方面的問題直接或間接地影響著當地動物疫病防控工作[1]。

2004 年以來，國家加大對獸醫系統實驗室建設投資力度，農業農村部在全國實施了省、州（市）、縣三級獸醫實驗室考核驗收、認證工程，為縣級獸醫實驗室的建設、規范運行帶來了發展機遇[2]。全州8 縣（市）在不同程度上新建、擴建獸醫實驗室，通過考核驗收獲得省級獸醫實驗室考核合格證的有7 個，其中包括3 個邊境測報站（文山市、麻栗坡縣、富寧縣），1 個州級獸醫實驗室，3 個縣級獸醫實驗室（丘北縣、廣南縣、馬關縣）。

1.2 調查方法

經問卷調查、檢測工作調查、現場調查等方式，對實驗室建設狀況、運行情況、儀器設備、人員配備、開展檢測項目以及生物安全防護等方面進行調查，全面掌握文山州獸醫實驗室建設現狀，針對實際問題提出思考，為提高文山州基層獸醫實驗室動物疫病檢測能力與實驗室生物安全水平奠定基礎。

2 調查結果

2.1 檢測能力范圍及通過考核情況

對文山州1 市7 個縣的動物疫病預防控制中心獸醫實驗室建設情況開展問卷調查，結果顯示：文山州系統內獸醫實驗室共有9 個，包括州級1 個、市級1 個、縣級7 個（其中邊境測報站3 個），具備常規抗體血清學檢測、監測能力的實驗室9 個，具備病原分子生物學檢測能力實驗室1 個（州級獸醫實驗室）；具備ASF 檢測能力的實驗室4 個（州級1 個、縣級3 個）。全州獸醫實驗室通過省級考核驗收比例為77.8%（7/9），2 個縣級（硯山縣、西疇縣）獸醫實驗室未完成建設與考核，獸醫實驗室的建設與地方財政收入、政府重視程度、養殖量等因素密切相關。

2.2 基礎設施及人員配備

在調查具備抗體血清學檢測、ASF 檢測能力的獸醫實驗室中，實驗室建設面積基本達到縣級獸醫實驗室建設標準（200 m2以上），但有部分實驗室所處的地理位置達不到相對獨立；文山州獸醫實驗室專業技術人員僅有34人，各縣實驗室為2～4人，高級獸醫師15 人（約44%）；年齡在40～55 歲的工作人員占比90%；實驗室技術人員大專學歷有18 人，大學本科學歷13 人，碩士學歷3 人（均在州級獸醫實驗室），畢業于獸醫專業技術人員僅60%。文山州獸醫實驗室建設總體上推進較慢，實驗室專業技術人員年齡偏大、職稱不高、學歷偏低、配備不足直接影響實驗室檢測工作的推進。

2.3 儀器設備及試劑配備

配有便攜式熒光定量PCR 儀的實驗室4 個，配有普通PCR 儀的實驗室1 個（州級獸醫實驗室），配有全自動核酸提取儀實驗室2 個（1 個州級1 個縣級），配有酶標儀實驗室9 個。ASF 檢測儀器設備與試劑涉及4 個生產廠家，血清學檢測儀器設備與試劑基本相近，多數以省級比對試驗要求一致。

2.4 生物安全設備設施

9 個獸醫實驗室均同時配有生物安全柜、高壓滅菌設備，但工作人員理解執行生物安全管理文件的能力有待加強，在調查中發現各縣實驗室人員生物安全設備的使用、管理不規范，對生物安全方面的理解片面，生物安全意識不強，盡管設備已就位，但生物安全措施的落實不到位。

2.5 能力驗證情況

2017 年有6 個實驗室參加云南省禽流感血凝抑制比對試驗，比對結果符合率約為92.5%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對符合率為94%。2018 年參與云南省禽流感病原學PCR 檢測比對實驗室1 個，比對結果符合率為97%；參與禽流感血凝抑制試驗比對實驗室6 個，比對結果符合率為95%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對符合率為98%。2019 年參與云南省非洲豬瘟病毒核酸PCR 檢測比對實驗室1 個，使用國家ASF 參考實驗室提供的引物進行盲樣比對，比對結果符合率為100%；參與ASF 熒光快速PCR 檢測比對實驗室3 個，比對結果符合率約為93%；參與禽流感病原學PCR 檢測比對實驗室1 個，比對結果符合率為100%；參與禽流感血清學檢測能力比對實驗室7 個，比對結果符合率98%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對實驗室7 個，比對結果符合率為100%。全州獸醫實驗室在病原學PCR 檢測方面能力十分薄弱，缺乏新的檢測儀器設備；在血清學檢測能力方面有所提高，但因試驗因素影響及人員技術等原因仍存在檢測結果不穩定的情況。

3 討論

3.1 獸醫實驗室建設

經現場調查發現文山州縣級獸醫實驗室建設緩慢，基礎硬件設施相對不足。從全州獸醫實驗室建設完成情況來看，完成實驗室基礎硬件平臺建設，具有固定相對獨立實驗室區域；能開展血凝和血凝抑制試驗、瓊脂凝膠免疫擴散試驗、平板凝集試驗、試管凝集試驗、ELISA 抗體檢測試驗等血清學檢測項目；通過省級考核驗收的獸醫實驗室7 個，全州獸醫實驗室建設完成比例為77.8%。目前擁有ASF 檢測能力的獸醫實驗室僅有4 個，占總數的44.4%。各獸醫實驗室條件有限，難以開展病原學檢測項目，縣級獸醫實驗室檢測項目少、檢測能力薄弱?？h級獸醫實驗室配置的儀器設備中廢舊、老化的儀器占比較高，而適用于目前動物疫病檢（監）測的儀器設備相對稀缺，難以滿足當前動物疫病檢（監）測工作的需求。全州獸醫實驗室服務于動物疫病預防控制工作的基礎硬件設施有待提高。對于縣級獸醫實驗室的建設及檢測診斷能力水平，我國其他地區也存在實驗室硬件基礎條件不完善，無法正常開展動物疫病的檢測和對疫病及時準確的診斷工作，甚至ASF 檢測能力的缺失等問題，面對目前復雜多樣的動物疫病，持續加強縣級獸醫實驗室的建設十分重要[3-6]。

3.2 獸醫實驗室內部管理

獸醫實驗室內部質量管理體系和生物安全體系的建設不完善。80%的基層獸醫人員對管理體系的認識、理解局限于文件上，實際工作落實情況與文件要求存在一定差距，執行和運行上存在一些細節問題。獸醫實驗室對實驗室物資管理方面存在不足，如對ASF 檢測，各實驗室采購ASF 快速檢測儀器、試劑廠家各不一致，來源復雜，缺少統一的判定標準，檢測結果可靠性有待驗證。部分獸醫實驗室開展PCR 檢測環境的控制能力較低，進行ASF 檢測的實驗室存在半開放性的實驗室，檢測區域未達到負壓標準。我國高級別獸醫防護實驗室分布不均且數量有限，大量高風險動物疫病樣品的采集、前期處理、疫病初篩等試驗活動尚需要由基層獸醫實驗室承擔，面對基層獸醫實驗室的基礎設施改造、設備配置、完善規范運行、人員能力提升等諸多因素，基層獸醫實驗室急需規范內部工作，強化實驗室管理[7]。

3.3 實驗室檢測技術人員

各縣獸醫實驗室檢測技術人員素質參差不齊，檢測能力不足。因體制改革，實驗室檢測人員不穩定，存在一人同時兼數職、調崗工作兼扶貧工作等現象，導致獸醫實驗室檢測壓力大，超負荷運轉。在現場調查中發現部分實驗室檢測人員對快速PCR 儀器檢測方法認識匱乏，試驗操作不規范，檢測結果無法正確判斷；大部分檢測人員未開展崗前專業的ASF 檢測技術及PCR 和熒光PCR 檢測技術實操培訓，僅依靠個人經驗、儀器廠家短暫的儀器操作培訓及大規模的政府ASF 防控文件、政策知識培訓，技術人員的檢測能力無法達到實際檢測工作的要求。獸醫實驗室的檢測能力難以適應新形勢下動物疫病防控工作需求，疫病的預警和預報能力發揮不夠，服務功能發揮不全[8]。

3.4 實驗室生物安全意識

基層獸醫安全意識缺乏，生物安全防護落實不到位。實驗室專業技術人員缺乏，實驗室操作技術不規范，實驗室雖然配有高壓滅菌鍋和生物安全柜等重要生物安全防護裝置，但因人員意識及操作規范方面的投入相對不足，許多人認為“建成生物安全實驗室就一定能夠進行有效的防護”[9]。而實際在實驗室開展禽流感、口蹄疫、布病、ASF等動物疫病的檢測過程中，試驗人員對廢棄物的處理、生物安全防護裝置的維護保養以及試驗關鍵設備及應用防護等方面存在短板，導致工作中存在很大的生物安全隱患。

4 建議

4.1 重視縣級獸醫實驗室建設

從本次調查情況來看，文山州9個獸醫實驗室，僅有4 個實驗室具有ASF 檢測能力，少數實驗室具有完整的生物安全管理體系?？h級獸醫實驗室檢測能力十分薄弱，無法及時準確診斷疫病，繼而錯失控制疫病的最佳時機。隨著現代畜牧業的不斷發展，獸醫實驗室建設、功能定位都發生了變化[10]。各縣政府部門應高度重視基層動物疫病預防控制機構獸醫實驗室的建設，合理安排獸醫實驗室建設運行專項資金的投入，加快推進縣級獸醫實驗室的建設，尤其是邊境以及畜牧養殖業豐富的縣市，充分履行基層獸醫實驗室的職能、職責，切實開展動物疫病診斷、監測、檢測、流行病學調查等重要工作，提高實驗室的服務功能，為獸醫行政管理部門和動物衛生監督執法部門提供科學有力的技術保障。

4.2 加強實驗室內部管理

基層獸醫隊伍龐大、建設發展不平衡，需加強管理與指導。當前，全州各縣獸醫實驗室內部質量管理體系與生物安全管理體系建設、執行不到位，各縣獸醫實驗室應以實驗室建設為契機，結合實際工作不斷改進、建設管理體系，加強實驗室管理，加大培訓學習力度，利用年度實驗室內部審核和管理評審工作強化兩大體系的學習與落實，向外探討、向內提升，逐步規范化管理獸醫實驗室。

4.3 提高獸醫實驗室檢測服務能力

各縣市獸醫實驗室應主動開展檢測技術、生物安全、政策法規、質量體系文件等相關基礎知識的培訓，并對實驗室檢測人員進行考核持證上崗。對實驗室已授權的檢測項目有計劃地進行內部培訓，定期開展實驗室內的檢測能力比對。同時積極主動參與省、州級組織的檢測能力比對試驗，對檢測能力比對符合率不高的試驗項目進行分析總結、查找原因，加強實驗室檢測能力比對與技術培訓，提高實驗室檢測能力與技術服務水平。

4.4 選擇可靠的檢測儀器設備與試劑

獸醫實驗室檢測儀器設備、檢測技術的標準、試劑等不統一，檢測數據不統一分析是獸醫實驗室檢測工作的一個難題。目前，出現在市面上的ASF 診斷和檢測制品多種多樣，相關儀器設備與試劑種類繁多，價格不一，在選擇診斷、檢測試劑、儀器設備時要與實際情況相結合，選擇質量可靠、較穩定的通用儀器設備及檢測試劑。

4.5 加強生物安全防護

獸醫實驗室作為密切接觸臨床病例的場所，加強實驗室生物安全防護措施，規范實驗室人員、儀器設備等操作程序，是防止實驗室感染與病原傳播的有效手段。各縣級獸醫實驗室管理滯后，生物安全設備有效利用率較低，廢棄物無害化處理不規范，生物安全意識薄弱，生物安全風險較高，因此亟需科學嚴謹地加強生物安全防護與管理。各獸醫實驗室可考慮從生物安全制度的制定、落實，人員的管理，風險評估、預防及控制[11]，以及生物安全儀器設備的規范使用，有效維護保養等方面來完善獸醫實驗室的生物安全防護。