大棗有效成分含量測定研究進展

王金丹

摘要：大棗中含有多種生物活性物質，對大棗中有效成分含量進行測定具有重要意義。在查閱、收集國內相關文獻資料基礎上，綜述近幾年大棗有效成分含量測定的研究進展，以期為進一步開展大棗研究提供參考。

關鍵詞：大棗;有效成分;含量測定;研究進展

中圖分類號：R284.2 ? ?文獻標識碼：A ? ?文章編號：1674-1161（2020）01-0060-03

大棗是鼠李科植物棗樹的成熟果實，別名紅棗、干棗、棗子等，味甘，性平，具有補中益氣、養血安神功效，既是常用的中藥材，又是一種營養極其豐富的食品，即藥食同源。大棗中含有環磷腺苷、黃酮類、皂苷類、三萜類、生物堿類等多種生物活性物質。近年來，針對大棗中有效成分含量測定進行了大量的研究和應用，取得了許多有價值的研究成果。大棗有效成分含量測定方法有高效液相色譜法、反相高效液相色譜法、紫外分光光度法、高效液相色譜—蒸發光散射法、高效毛細管電泳法、親水色譜—二極管陣列檢測器—電噴霧四極桿飛行時間質譜法、液相色譜—質譜聯用法、離子色譜法和一測多評法等。本課題綜述各種測定方法的研究進展，以期為進一步開展大棗研究提供參考。

1 高效液相色譜法

李環研究優化高效液相色譜法測定大棗中蘆丁含量的效果。該方法測定時的標準為：MACHEREY-NAGEL（MN）NUCLEODUR 100-5 C18柱（BATCH2064），流動相為乙腈∶0.05%磷酸（0.15∶0.85），流速1.0 mL/min，波長257 nm，柱溫40 ℃。結果表明：蘆丁含量的線性范圍為0.050 55～0.404 40 μg，相關系數r=0.998 7，加樣回收率為97.06%。上述結果符合相關的標準，RSD=1.3%（n=6）。采用優化高效液相色譜法測定大棗中蘆丁含量，效果準確，且能避免糖類成分對測定結果的干擾。

劉世軍等人研究采用高效液相色譜法同時測定大棗中齊墩果酸和白樺脂酸的方法。色譜柱為Hyperil BDS C18（4.6 mm×250 mm，5μm），流動相為甲醇∶水（85∶15），檢測波長210 nm，柱溫25 ℃。結果表明：齊墩果酸、白樺脂酸在0.008～0.200 mg/mL時呈良好的線性關系，平均加樣回收率分別為101.25%，101.64%，RSD分別為2.44%，1.25%。該方法操作簡單，測定準確，重復性好。

侯廣月等人建立大棗中齊墩果酸、熊果酸、環磷酸腺苷和環磷酸鳥苷測定的高效液相色譜法。試樣經乙腈—水在60 ℃超聲提取，過濾后選用Waters Symmetry ShieldTMRP18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5μm）分離，流動相為乙腈∶0.1%甲酸水，流速為1.0 mL/min，柱溫為30 ℃，二極管陣列檢測器檢測，外標法定量。結果表明：齊墩果酸線性范圍為1.2～90.0 μg/mL，熊果酸線性范圍為1.0～75.0 μg/mL，環磷酸腺苷和環磷酸鳥苷線性范圍為1.0～100.0 μg/mL，相關系數均>0.999，定量限為1.0～1.2 μg/mL。平均回收率為85%～115%;日內和日間相對標準偏差均≤5.470%。該方法簡便、快速、準確，適用于大棗中齊墩果酸、熊果酸、環磷酸腺苷和環磷酸鳥苷的測定。

2 紫外分光光度法

李蓮芳等人建立大棗中總黃酮含量的測定方法。以蘆丁為對照品，在275 nm波長下測定總黃酮在三氯化鋁甲醇溶液中的吸光度，計算大棗中總黃酮含量。該方法簡便易行，適用于大棗中總黃酮含量的測定。

3 液相色譜—質譜聯用法

液相色譜—質譜聯用法（HPLC—MS）能提高大棗中白樺脂酸、齊墩果酸和熊果酸含量分析的選擇性和靈敏度。

張勇等人采用液相色譜—質譜聯用法測定大棗中脂酸、齊墩果酸和熊果酸三萜酸的含量。選用聚合物鍵合的ODS色譜柱Ulti-mate XB-PAH色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）進行分離，以乙腈∶水（90∶10）為流動相，電噴霧質譜負離子選擇離子模式檢測。結果表明：所建立的檢測方法靈敏度高（50.8～113.9 pg），分離度高（R≥1.7），線性關系良好（r≥0.999 0），重復性好（RSD≤3.5%）。聚合物鍵合的ODS固定相可對三萜酸同分異構體進行高效分離，且HPLC—MS對三萜酸含量分析的專屬性和靈敏度較高。

4 高效液相色譜—蒸發光散射法

曲楓等人采用高效液相色譜—蒸發光散射法（HPLC—ELSD）同時測定大棗多糖酸性條件下水解產物中阿拉伯糖和D-半乳糖含量。結果表明：樣品中阿拉伯糖和D-半乳糖分離良好，分別在2.00～10.00 μg（r2=0.995 7）和2.08～10.40 μg（r2=0.990 3）范圍內線性關系良好，平均加樣回收率分別為103.87%（r2=5.42%，n=9）和93.04%（RSD=4.90%，n=9）。

5 親水色譜—二極管陣列檢測器—電噴霧四極桿飛行時間質譜法

親水色譜法采用極性材料作為固定相，適合極性化合物的保留和分離;電噴霧四極桿飛行時間質譜能夠提供化合物母離子和子離子的精確分子量，從而推斷分子式。多種檢測方法聯合應用，具有較好的分離度、靈敏度，可實現大棗中環磷腺苷的準確、快速鑒別和定量測定。

趙恒強等人研究建立超聲輔助提取—親水色譜—二極管陣列檢測器—電噴霧四極桿飛行時間質譜法（UAE—HILIC—DAD—ESI—Q—TOF/MS）定量測定大棗環磷酸腺苷（cAMP）的方法。采用超聲輔助提取，選用Waters Xbridge Amide（250 mm×4.6 mm，3.5 μm）親水色譜柱進行分離，以乙腈和20 mmol/L CH3COONH4+0.2% CH3COOH為流動相，流速為0.8 mL/min，柱溫為室溫。結果表明：在優化的親水色譜條件下，大棗水提物中cAMP與其他化合物分離良好。根據母離子和子離子的精確分子量信息，結合標準對照品的保留時間和UV信息可對其進行準確鑒別。cAMP在0.01～50.00 μg/mL范圍內具有良好的線性關系。

6 高效毛細管電泳法

高效毛細管電泳法具有靈敏度高、準確度高、簡便、快速等特點。

高瑞斌等人采用高效毛細管電泳法同時測定大棗中環磷酸腺苷、芹菜素及槲皮素，研究緩沖液濃度、pH值、β-環糊精濃度、檢測波長、分離電壓對分離結果的影響。結果表明：在最佳分離測定條件下，環磷酸腺苷、芹菜素及槲皮素快速分離，分別在16.5～529.4 mg/L，5.5～176.4 mg/L，8.8～282.4 mg/L范圍內線性關系良好，r值分別為0.999 8，0.999 8，0.999 7，加樣回收率分別為97.31%，95.62%，94.88%。

7 離子色譜法

莊紅艷等人建立一種檢測枸杞子和大棗中甜菜堿含量的直接離子色譜法。選用Thermofisher Ion Pac CS19（250 mm×4 mm）陽離子交換色譜柱和CG19（50 mm×4 mm）陽離子保護柱，以甲基磺酸（MSA）為流動相等度洗脫，流速為1.0 mL/min。結果表明：枸杞子和大棗中的甜菜堿在10 min內完成分離檢測，甜菜堿質量濃度在10～500 mg/L內具有良好的線性關系（r2=0.999 7），最低檢出限為1.8 mg/L，保留時間和峰面積的RSD（n=6）分別為0.15%和1.70%。該方法測定甜菜堿含量靈敏度高、重現性好、檢測過程簡便，具有較高的實用和推廣價值。

8 一測多評法

近年來，基于只測定1個成分而實現對多個目標成分進行同步監控的一測多評法（QAMS）已廣泛應用于中藥材的含量測定。

郭盛等人采用HPLC—ELSD技術，以白樺脂酸對照品為內參物，測定其與齊墩果酸、熊果酸、樺木酮酸、齊墩果酮酸、熊果酮酸的相對校正因子，利用相對校正因子計算三萜酸類化學成分的量;同時比較外標法所測得的大棗藥材中這6種化學成分的實際值與經QAMS所得的計算值之間的差異，以驗證QAMS的適用性、可行性和重復性。結果表明：相對校正因子的重現性較好，15批大棗藥材樣品中6種三萜酸類化學成分的QAMS計算值與外標法實測值之間無顯著性差異。該方法操作簡便，測定結果準確。

參考文獻

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Abstract： Jujube contains a variety of bioactive substances， and the determination of active components in jujube is of great significance. On the basis of consulting and collecting relevant domestic literature， this paper summarizes the research progress of the determination of active ingredients of jujube in recent years， in order to provide reference for further research on jujube.

Key words： jujube; active ingredients; content determination; research progress