黑骨藤的化學成分和藥效研究進展

孫文娟，龍春芳，龍 毅*

（1.貴州中醫藥大學，貴州貴陽 550025；2.凱里學院，貴州凱里 556011）

黑骨藤是蘿藦科杠柳屬植物黑龍骨的干燥根或全株，別名鐵骨頭、黑骨頭、黑龍骨、飛仙藤等，已被收載于《全國中草藥匯編》、《中華本草苗藥卷》、《貴州省中藥材民族藥材質量標準》等眾多書籍中［1-4］.通過大量的文獻研究發現，黑骨藤中含有強心苷類、醌類、黃酮類、苯丙素類、三萜類、甾體類、揮發油類及神經酰胺類等多種類別的化學成分，在治療關節、神經、皮膚等系統疾病及腫瘤方面有一定的療效.本文對苗藥黑骨藤中主要的化學成分、疾病治療作用及治療機制等進行了綜述，以期為今后深入研究及臨床開發應用提供可靠的參考依據.

1 化學成分研究

近年來，研究者們采用不同提取分離純化的方法從黑骨藤中分離出大量不同種類的單體化合物.如2010 年，周欣等［5］在黑骨藤的正丁醇提取部位，首次分離得到了苷元為醌類和黃酮類的6個新的苷類化合物；2011年，徐冉等［6］在黑骨藤的氯仿萃取部位，首次分離鑒定了5個單體化合物，分別為香豆素類、三萜類和酚酸類化合物；2013年，宋國斌等［7］從黑骨藤的石油醚提取部位分離鑒定了28種成分，其中酸類成分含量占總揮發油提取物的34.14%，棕櫚酸的含量最高，可達到22.94%；2014年，趙超等［8］在黑骨藤的三氯甲烷和正丁醇萃取部位首次分離鑒定出了2個神經酰胺類化合物，即（2S，3S，4R，10E）-2-［（2R）-2-羥基二十四烷酰氨基］-10-十八烷-1，3，4 -三醇和1 -O -β -D -葡萄糖-（2S，3S，4R，10E）-2 -［（2R）-2 -羥基二十四烷酰氨基］-10-十八烷-3，4-二醇；趙珊等［9］和何燕玲等［10］分別在2017年和2019年在黑骨藤的水溶性提取部位共分離鑒定了33個單體化合物，且首次分離得到了12個咖啡?；鼘幩犷惢衔?

各項研究中分離的化合物主要集中在極性較大部位，尤以水提部位為多，這些化合物又通常具有細胞增殖抑制、抗氧化和抗腫瘤的活性.由此可以推測黑骨藤水溶性提取部位是抗類風濕性關節炎的主要活性部位，這或許是民間和臨床治療風濕性關節炎和類風濕關節炎等疾病時通常會采用水煎煮的方式進行服用的原因.

2 黑骨藤的治療作用及機制研究概述

2.1 治療關節系統疾病的作用

2.1.1抗炎、抗類風濕作用

黨榮敏等［11］通過實驗動物分組、造模以及實驗干預等方法研究大鼠的踝關節病理情況時發現，黑骨藤具備一定的抗炎作用.同時在這個實驗中，經過觀察發現，黑骨藤高劑量組滑膜細胞有增生，周圍軟組織的充血水腫不是特別明顯，與秋仙水堿組一樣只是少量的炎性細胞出現浸潤現象；黑骨藤中劑量組和低劑量組的滑膜細胞均出現了輕度的水腫情況，并且周圍軟組織也出現了充血水腫的情況，與此同時還可以看見少量炎性細胞的浸潤.因此，從黑骨藤不同劑量呈現的藥效作用來看，其抗炎作用與用藥劑量之間有著一定的量效關系.

黃明進等［12］采用黑骨藤60%乙醇提取物進行了藥理實驗，發現黑骨藤可以有效地降低患有類風濕性關節炎大鼠體內的血清及大鼠組織液中腫瘤壞死因子α、白介素-6和大鼠白介素-1β的含量水平，從而實現治療類風濕性關節炎的目的.李慧敏等［13］研究發現，黑骨藤中總黃酮和總皂苷是抗類風濕性關節炎的有效成分，它們的含量高低與抗炎效果的強弱成正比，總黃酮的抗炎作用可能小于總皂苷.

宋國斌等［14］發現黑骨藤中含有的揮發油通過降低血清中NO、丙二醛的含量和抑制小鼠腹腔毛細血管通透性亢進，產生抗炎作用.還有研究發現，黑骨藤乙醇提取物是通過減少iNOS和COX-2 表達以及TNF-α、IL-6、NO 和PGE2 等炎癥因子的產生來發揮抗炎作用的［15］.Liu 等［16］對黑骨藤皂苷及其活性化合物杠柳苷進行研究發現，黑骨藤皂苷可改善關節的腫脹，抑制關節骨質侵蝕，杠柳苷能抑制促炎癥因子水平和抑制LPS 誘導的細胞因子從滑膜細胞分泌.以上研究都證明，黑骨藤有一定的抗炎、抗類風濕的作用.

2.1.2鎮痛作用

劉明等［17］采用SPF 級昆明種小鼠，通過醋酸扭體法和熱板法對黑骨藤的鎮痛作用及發揮作用的有效部位進行了研究.結果表明黑骨藤中石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇、水的提取部位均有鎮痛作用，而其中正丁醇提取部位的鎮痛作用最為顯著，其作用能力與陽性對照鎮痛抗炎藥阿司匹林相當，對疼痛的抑制率可達到80.2%.炎癥發作時，在炎癥部位總是會伴隨著劇烈的疼痛，而這種疼痛既可以在局部發生，也可以反映在全身.以往臨床應用的很多藥物無法達到抗炎與鎮痛兼顧的治療效果，如中樞性和麻醉性的止痛藥只能起到止痛作用，糖皮質激素類藥物只能起到一定的抗炎作用，而且這類藥物的副作用相對而言比較多，如腸胃反應、肺損傷、成癮等，因此黑骨藤作為一種兼具抗炎與鎮痛作用的藥物，非常值得在臨床應用上進行深入研究.

2.2 治療神經系統疾病的作用

Pristionchus pacificus線蟲可以通過熱刺激的方法導致其神經損傷，這種神經損傷與人類神經損傷的情形非常接近，因此人們通常會采用這種方法進行神經系統疾病的研究.張貴源等［18］研究發現，黑骨藤具有修復神經損傷線蟲的功效，這一發現為黑骨藤在治療神經損傷方面的疾病提供了有價值的參考.大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞（PC12）已被廣泛地用于神經保護作用的藥物篩選與研究當中.通過研究被H2O2氧化損傷的PC12細胞，發現黑骨藤的乙醇提取物可以提高PC12細胞的存活率，由此可以證明，黑骨藤具有一定的抗氧化損傷作用［19］.王恒等［20］通過建立SNI（坐骨神經損傷）模型的方法，對黑骨藤的乙醇提取物作用于大鼠坐骨神經鉗夾的損傷進行了研究.結果表明，黑骨藤乙醇提取物對SNI 模型大鼠的坐骨神經功能具有改善功能，對SNI 模型大鼠坐骨神經的功能修復有明顯的治療作用.

2.3 治療皮膚系統疾病的作用

通過使用二硝基氯苯所誘發的小鼠遲發性超敏反應，發現了黑骨藤的醇沉部位的小鼠灌胃給藥對于抑制二硝基氯苯誘發的超敏反應具有明顯的抑制作用.研究數據表明，黑骨藤醇沉部位的劑量在50 mg/kg 的時候抑制二硝基氯苯誘發的超敏反應作用非常明顯，且劑量在50 mg/kg 和100 mg/kg 的黑骨藤醇沉部位還能明顯地抑制增強脾細胞增殖反應.由此可知，黑骨藤醇沉部位具有一定的免疫抑制活性，并且可考慮將其應用于過敏性疾病治療當中［21］.

特應性皮炎作為一種人體免疫調節作用異常的瘙癢疾病而存在.針對該病癥，鮑春梅等［22］通過研究黑骨藤皂苷對特應性皮炎小鼠的治療作用，發現黑骨藤皂苷可以治療特應性皮炎.目前雖然黑骨藤皂苷治療特應性皮炎的免疫調節機理還沒完全清楚，但為深入研究治療特應性皮炎提供了一定的理論依據.

2.4 治療腫瘤的作用

研究發現，杠柳苷元具有一定的抗腫瘤作用，但因其含量較低，且具有一定的不良反應，致使其進一步的開發應用有待研究［23］.張引娟等［24］通過研究杠柳苷對人乳腺癌細胞柱BT-549 的抑制作用，發現杠柳苷具有顯著的抗腫瘤作用.王瑾等［25］采用細胞毒活性篩選的方法，對從黑骨藤中分離得到的4個化合物進行了研究，發現其中3個強心苷類化合物對前列腺腫瘤（PC-3，DU-145）、黑色素瘤（UACC-62）及血液系統腫瘤（HL-60，CCRT-CEM）等細胞系的細胞具有顯著的細胞毒活性.梁勇等［26］利用MTT 法對黑骨藤進行抗腫瘤實驗，結果發現，黑骨藤提取物中乙酸乙酯部位的抗腫瘤活性非常顯著，同時確定了杠柳苷和一種酚酸類化合物是乙酸乙酯部位抗腫瘤活性的主要成分.

張鷹等［27］采用網絡藥理學的方法，研究了西南地區各省份黑骨藤防治肺癌的分子機制，發現黑骨藤中強心苷類成分對肺癌及多種腫瘤細胞具有較好的抑制作用.黃秀蘭等［28］研究發現黑骨藤可能是通過PI3K-AKT（細胞內信號轉導通路之一，發揮抑制凋亡、促進增值的關鍵作用）和NAKB（真核細胞轉錄因子，可致細胞增殖失控）兩條信號通路發揮抗肺癌的作用.雖然結論存疑，但也為黑骨藤臨床應用于基因干預方法治療肺癌提供了新的研究思路和方向.

2.5 其他作用

目前，關于黑骨藤心臟活性的研究報道極少.楊婉珠等［29］通過離體蛙心心臟灌流實驗，初步探討了黑骨藤醇提物乙酸乙酯部位對離體蛙心心率和心肌收縮力的影響，發現黑骨藤乙酸乙酯提取部位可以對離體蛙心的收縮活動起到有效的抑制作用.其作用機制，一方面可能與在心肌組織中的Ca2+-Mg2+-ATP 酶活性升高，同時抑制Ca2+內流，從而減少細胞膜內Ca2+濃度有關；另一方面，可能與其通過抑制AChE 活性，從而使M 受體興奮，β 受體被阻斷的作用有關.但由于黑骨藤中化學成分復雜多樣，且本研究仍處于離體實驗研究階段，其具體的作用機制需進行體內動物實驗或對黑骨藤醇提物乙酸乙酯部位進行純化后進一步研究，此研究結果為黑骨藤在治療心血管系統疾病中發揮作用奠定了理論基礎.Liang 等［30］通過體外抑制透明質酸酶實驗發現，使用聚酰胺純化的黑骨藤中提取的黃酮類物質，有良好的抗透明質酸酶能力.

3 臨床應用

由于苗藥黑骨藤對類風濕性關節炎有著良好的療效，因此被制作成了中藥制劑，以方便患者使用.其中黑骨藤追風活絡膠囊便于2002年作為OTC 甲類醫保工傷用藥問世.此藥物的出現，在為醫療工作做出貢獻的同時，也引起了大批實驗人員的注意，為此展開了一系列的科學研究.王可博等［31］發現治療風寒濕痹型類風濕關節炎，熱補針法與黑骨藤追風活絡膠囊一起使用有著較好的療效，今后在臨床上可以將這種方法進行更為深入的推廣應用.古金華等［32］也研究發現黑骨藤追風活絡膠囊對患者的軟骨修復有很好的促進作用，可顯著緩解風濕痹型膝骨關節炎疼痛及功能障礙，且作用于多種細胞因子.

采用聯合用藥的方法可以使類風濕性關節炎得到更為有效的治療，甲氨蝶呤作為臨床常用的抗風濕類藥物被用于此種方法當中.甲氨蝶呤改善類風濕病患者臨床癥狀的主要方式是抑制二氫葉酸還原酶以及輔酶F的形成，進而阻止了嘌呤和胸腺嘧啶的合成，在此基礎上有效地起到破壞炎性細胞的增殖、減少炎性因子的釋放和減輕炎癥反應的作用.但類風濕性關節炎的患者普遍都身體比較虛弱，而甲氨蝶呤不良反應較多，譬如長期使用后導致的消化系統損害、神經系統損害、黏膜損害、生殖系統損害等，所以在治療時間過長時，長期使用的不良反應較多從而限制了其臨床應用［33］.董元鳳等［34］應用隨機數字表法研究發現，黑骨藤追風活絡膠囊可以在一定比例的給藥用量的情況下緩解甲氨蝶呤的副作用，兩者對類風濕性關節炎的治療產生了相輔相成的作用，從而治療類風濕性關節炎采用黑骨藤追風活絡膠囊與甲氨蝶呤聯合用藥的方法是安全有效的.

4 結語與展望

黑骨藤作為貴州的十大苗藥之一，被廣泛地應用于人們日常的疾病治療當中，隨著現代醫學的不斷發展，其傳統功效通過現代藥理學的方法逐漸得到了相應的驗證.天然藥物有效成分普遍存在著成分復雜，研究困難的問題，黑骨藤也不例外.但正是因為黑骨藤成分繁雜，不僅使其具有抗炎、鎮痛、神經保護、防治腫瘤、抑菌等作用，還使其具有很多待開發的藥用價值.目前對黑骨藤的藥理學研究大多都停留在有效部位上，而對其單一的化學成分的藥效研究相對較少，因此在今后的研究中，可以對其具體化學成分的藥效進行更多的研究.臨床研究方面，對黑骨藤的副作用或毒性試驗的研究也相對較少，研究報道主要集中在其功效主治方面，為達到更為安全有效的用藥目的，在今后的臨床研究中要對其進行更為全面的研究.