罕見Bmh 類孟買血型1 例血清學鑒定

韓新樂

（江蘇省新沂市人民醫院，江蘇 新沂）

0 引言

孟買血型是1952 年Bhende 在印度發現的，是十分罕見的血型，這種個體紅細胞膜上缺乏A、B、H 抗原，而類孟買型與孟買型很相似，紅細胞上沒有H 抗原，但不同的是類孟買型紅細胞上有少量的A 或B 抗原，主要是H 基因受到其抑制基因Z 的影響，基因表達產物大大下降，但仍有一小部分H 產生，這部分抗原在正常A 基因或B 基因作用下，轉化成少量的A 或B 抗原，其血清中也有相應的抗A 或抗B 及抗H 抗體[1]。這給實驗室ABO 定型和交叉配血帶來困難，本例是武漢一家醫院送檢的標本，經上海血液中心血型參比實驗室基因測序為B101/O01,h3h3，也稱Bmh血型?，F將患者血清學檢測報道如下。

1 臨床資料

患者，女26 歲，G2PO，臨床診斷：宮腔粘連Ⅱ度，無手術史外傷史，無藥物史。否認有家族遺傳史；現欲行宮腔鏡手術備血，由于家屬不在本地，家系調查無法及時獲得。

2 血型血清學檢測

2.1 試劑

單克隆抗-A、抗-B 抗-H 標準ABO 的細胞（批號分別為：20150917、20150917、20150316、20160315）均購自上海血液生物醫藥有限公司?？?Lea、抗-Leb（Sanquin，Ho11and 批號：8000168048）。人源抗-A、抗-B 血清自制，實驗用O 細胞和B 細胞均來自3 d 以內獻血者。

2.2 方法

血型定型、抗體鑒定、吸收放散試驗、血型物質檢測均按文獻[2]操作。儀器：離心機（KA-2200，日本久保田）、普通離心機、水浴箱、孵育器。

3 試驗結果

3.1 ABO 正反定型

立即及多次離心后以及將反定型各個試管分別置4 ℃、37 ℃后反應結果如下表1。

3.2 H 抗原檢查

患者紅細胞與抗H 反應未見凝集，表明患者紅細胞上無H 抗原，見表2。

3.3 Lewis 血型檢測

Lewis 血型檢測該患者為Le（a-b+），提示患者是分泌型，見表3。

表1 患者正反血型鑒定結果（試管法）

表2 患者紅細胞懸液與抗H 抗體反應結果

表3 患者紅細胞懸液與抗Lea、Leb 試劑反應結果

3.4 患者血清中不規則抗體檢測

選擇2 個成人正常新鮮O 型、B 型及臍帶O 細胞，三洗，配成紅細胞懸液與患者血清反應，見表4。提示患者血清中存在抗-I 抗體。

表4 患者血清與正常新鮮O 型、B 型及臍帶血反應結果

3.5 吸收放散試驗

取一份患者洗滌壓積細胞加入一份等量人源抗B 血清混合放4 ℃過夜收，用冷的生理鹽水將紅細胞洗滌6 次，加入等量生理鹽水，于56 ℃10 min 進行熱放散，離心取放散液加入B 細胞；同時做O 細胞對照，結果放散液中有抗B 抗體，表明患者紅細胞上有B 抗原（對未次上清液2 滴加入B 細胞1 滴應為陰性），見表5。

3.6 吸收后血清效價測定

將患者細胞吸收前后的抗B 血清的效價進行檢測，患者紅細胞吸收前128，經吸收后抗B 已效價為64，也證實患者紅細胞上存在B 抗原。

表5 吸收放散試驗結果

3.7 唾液中血型物質檢測

將抗A、抗B、抗H 試劑血清進行標化，以出現2+ 凝集強度的最小稀釋度作為工作液對唾液中的血型物質進行中和抑制試驗，抗A 進行1:4 稀釋，抗B 進行1:8 稀釋，抗H 進行1:4 稀釋，在抗A、抗B、抗H 試管中加入相應的標化試劑50 μL，各加入經煮沸處理的唾液上清液50 μL 室溫充分作用30 min，然后加入相應的試劑A、B、O 細胞懸液50 μL，離心觀察結果表明，抗A 管2+，抗B 管陰性，抗H 管陰性，近一步證實唾液中有B 和H 血型物質。

4 結果

通過以上一系列的試驗可證實該患者為紅細胞上H 抗原缺失，存在弱的B 抗原，Lewis 血型為（a-b+），唾液和患者血清中分別檢出B 和H 血型物質，根據其血清學特征該患者的血型為類孟買Bmh。

5 討論

H 抗原受控于FUT1（H）、FCT2（Se）、FUT3（Le）三個基因，它們分別決定紅細胞上H 的表達，分泌液中H 物質的出現和消失，及紅細胞上是否有Lea或Leb抗原的出現。孟買型是紅細胞H 抗原缺乏的非分泌型，基因型是hh，其血清學特征是紅細胞不能被抗-A、抗-B、或抗-AB 凝集，血清中則含有抗A、抗B 和抗H 抗體，所以其唾液中無A、B、H 物質而類孟買是分泌型，其血清學特征為紅細胞與抗H 不凝集，與抗A、抗B 凝集很弱，甚至用吸收放散才能檢出A 和B 抗原，是因為其分泌液和血清中含有A、B 物質，類孟買型都是分泌型（Sese 或SeSe），其Lewis 血型可以為Le（a-b+）/Le（a-b-），Lewis 物質廣泛存在于人體，可以通過其檢測推斷其分泌性[3]。

通過表1、表2 可見：ABO 正反定型不符抗H 抗原陰性，考慮可能是類孟買血型；A、B、O 細胞在4 ℃時全部凝集考慮患者血清中可能有冷抗體存在；患者Lewis 血型為Le（a-b+），從而確定患者為分泌型，并且通過唾液中血型物質的檢測進一步明確了該患者為分泌型個體。

為了證實患者弱B 抗原存在，做了吸收放散試驗，結果與人源B 血清冷吸收后的血清，效價降低；患者紅細胞進行熱放散液中檢測出B 抗體，則可以證實了患者紅細胞上B 抗原的存在，患者唾液血型物質檢測結果證實了唾液中有B 和H 血型物質。綜上所述該患者血型為Bmh。通過選擇病人血清與成人O、B、臍O 細胞進行反應發現該患者血清中存在抗-HI 抗體，HI 抗體是一種自身冷抗體。曾經被認為是無害的，但也有因抗HI 引起的急性輸血反應報道。所以輸注時要注意保溫[4]

類孟買型目前鑒定方法有二種：血型血清學和分子生物學。血型血清學比較適合醫院日常檢測，根據近年文獻報道，總結有幾個特點：紅細胞上無H 抗原、血清中有弱抗A/B 抗體或H（HI）抗體，血清中及唾液中有少量ABH 物質；Lewis血型為分泌型。本例中B 抗原和抗H 抗體均較弱，有HI 冷抗體很容易誤定患者血型為O 型，容易造成嚴重后果[5-6]。本例類孟買患者輸血時，盡量輸注同型血或自身輸血，如果情況緊急選擇37 ℃與患者血清反應最弱或無反應的B 型或O 型預溫洗滌濾白紅細胞輸注，確?；颊甙踩?。